双侧颈总动脉结扎致大鼠脑血流低灌注不同时程的神经功能障碍和病理学变化

目的 比较大鼠双侧颈总动脉结扎后不同时程的神经功能障碍、脑组织大体病理/显微病理和血清学炎性指标的变化.方法 将SPF级Wistar大鼠麻醉后,施行永久性双侧颈总动脉结扎术.造模成功的大鼠按随机数字表分为术后2周、4周和6周共3组,每组10只.同时设立假手术组,大鼠10只,操作方法同模型组,但只穿线不结扎.分别于术后2周、4周和6周对大鼠进行神经功能检测,然后腹主动脉取血,采用ELISA法检测血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量.采用脑组织TTC染色法评价脑缺血范围,HE染色后进行显微镜下脑组织形态学观察.结果 与假手术组比较,双侧颈总动脉结扎后2周组、4周组和6周组大鼠的神经功能评分明显降低(P ＜ 0.05);与2周组比较,4周组和6周组大鼠的神经功能评分下降明显(P ＜ 0.05).血清炎性指标检测发现,与假手术组比较,不同时程模型组大鼠的IL-6水平明显升高(P ＜0.05),其余两个指标的差异无统计学意义(P ＞0.05).大鼠脑组织病理学观察显示,与假手术组比较,双侧颈总动脉结扎后2周组、4周组和6周组大鼠的脑组织缺血范围随时程延长而增加,脑组织形态也都有不同程度的损伤和炎性浸润.结论 大鼠双侧颈总动脉结扎后脑组织病理改变由缺血发展到梗死灶出现,并伴随神经功能障碍,随时程的延长而变化不同,应根据药物作用机制选择干预时机.

2020

2021/07/20

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基于Caco-2细胞单层模型对盐酸氨溴索吸收机制的研究

目的 通过Caco-2细胞单层模型研究盐酸氨溴索(ambroxol hydrochloride,AMB)的吸收机制,提高其生物利用度.方法 通过跨上皮电阻(transepithelial electrical resistancev,TEER)、低渗透性药物阿昔洛韦的表观渗透系数Papp(AP→BL)和罗丹明123的外排率(efflux ratio,ER)验证Caco-2细胞单层模型的完整性和功能性.考察浓度、药物相互作用、体液pH对AMB的Papp(AP→BL)和ER值的影响.结果 整个实验过程中Caco-2细胞单层的TEER>200Ω·cm2,阿昔洛韦的Papp(AP→BL)<10-6cm/s,罗丹明123的ER>2.与高渗透性对照组比较,AMB低剂量组的Papp(AP→BL)显著降低(P<0.01),ER值无显著差异(P>0.05).与AMB单独给药组比较,联合给药组的AMB Papp(AP→BL)值显著降低(P<0.05),ER值无显著差异(P>0.05).与AMB低pH组比较,AMB中、高pH组的Papp(AP→BL)显著增高(P<0.01).结论 AMB为易化扩散转运方式,与METO联合给药不利于AMB的吸收,提高肠液pH可促进AMB的吸收.

2020

2021/07/20

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miR-205-5p/PRKCA/p38信号通路在淫羊藿苷抑制动脉粥样硬化中的介导作用

目的 探讨miR-205-5p/蛋白激酶Cα(PRKCA)/p38信号通路在淫羊藿苷(ICA)抑制动脉粥样硬化(AS)中的介导作用.方法 首先通过整体动物实验研究ICA对载脂蛋白(Apo)E-/-小鼠的抗AS作用;然后取小鼠胸主动脉组织进行基因芯片检测,再通过生物信息分析找到有意义的miRNA及其作用的靶基因,级联通路;最后应用定量聚合酶链反应(qPCR)及Western印迹方法对所构建的通路在体内外实验标本中进行验证.结果 在整体动物实验中,血脂水平和HE染色结果表明,ICA具有抗AS作用;通过对基因芯片检测结果分析找到目标miR-205-5p,通过生物信息分析预测其靶基因为PRK-CA,并级联p38信号通路分子,构建miR-205-5p/PRKCA/p38信号通路;qPCR及Western印迹结果显示,在ApoE-/-小鼠胸主动脉及氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激血管平滑肌细胞(VSMCs)中,模型组miR-205-5p表达显著下降(P<0.001),PRKCA mRNA及蛋白表达显著升高,p38蛋白磷酸化显著增加(P<0.001);ICA干预后,miR-205-5p表达显著升高(P<0.001),PRKCA mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.001),p38蛋白磷酸化显著减少(P<0.001),且具有量效关系;ICA对ox-LDL刺激VSMCs的增殖和迁移具有显著抑制作用(P<0.001或P<0.05).结论 ICA具有抗AS作用,其机制可能是通过提高miR-205-5p表达,下调PRKCA mRNA及蛋白表达,进而减少p38蛋白磷酸化,并抑制VSMCs增殖与迁移,从而发挥其抗AS作用.

2020

2021/07/20

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液质饲料喂养制备酒精性心肌病小鼠模型

目的 利用液质饲料喂养的方法 建立酒精性心肌病小鼠模型,为酒精性心肌病机制研究提供良好动物模型.方法 利用含有酒精的液体饲料和不含酒精的对照饲料喂养16周龄C57小鼠(酒精组n=21;不含酒精组n=9),含有酒精的饲料酒精浓度由4.8％逐步升高至5.4％,共喂养8周,每周进行体重测量,监测死亡率,8周后进行心脏超声心动图检测以及病理学检测.结果 酒精喂食组从第二周体重开始降低,一直持续到第八周体重较对照组均有明显的减轻;同时酒精组小鼠在酒精喂食期间死亡7只(占33.3％),而对照组没有死亡现象;心脏超声结果 显示,酒精组小鼠较对照组心室前壁、后壁均显著变薄,心室内径增大,并且心脏射血分数和短轴缩短率显著变小;酒精组小鼠心脏/体重指数较对照组显著增大,同时HE染色结果 也证实酒精组小鼠心脏明显增大.结论 经过8周的酒精液质饲料喂养后,小鼠心脏呈现整体变大,左室壁变薄,心功能变差等酒精性心肌病的典型病理特征.因此,通过此方法 能够成功制备酒精性心肌病小鼠模型.

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2021/07/20

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HAART治疗SIVmac239感染恒河猴血浆细胞因子与疾病指征的相关性分析

检测SIVmac239(猴免疫缺陷病毒)感染恒河猴血浆细胞因子的浓度并分析其与疾病特征的相关性.方法 SIVmac239慢性感染的中国恒河猴,给予为期147 d的HAART(高效抗逆转录病毒治疗).测定血浆病毒载量及细胞因子浓度,检测外周血T淋巴细胞亚群变化,并分析血浆细胞因子和疾病特征的相关性.结果 HAART治疗期间SIVmac239感染的恒河猴血浆病毒载量降低到检测限以下.大部分细胞因子的浓度在感染后增高并在HAART治疗期间持续升高.在停止HAART治疗后,IL-1β、IL-6、IL-10、TGF-β1和IL-2浓度稍有下降,但仍明显高于感染前.TNF-α、IFN-α、IFN-γ则持续增高.只有IP-10在HAART治疗期间浓度出现了下降.IL-6、IL-1β和TGF-β1与血浆病毒载量呈负相关,IP-10与血浆病毒载量呈正相关.结论 建立感染和HAART治疗中多数细胞因子均升高,停药以后多数细胞因子浓度降低但仍高于正常水平.IL-6、TGF-β1、IP-10这三种细胞因子无论变化趋势还是与疾病特征的相关性都与临床相符合.

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2021/07/20

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右归丸通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对膝骨关节炎模型鼠软骨组织保护作用的研究

目的 研究右归丸对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响.方法 采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,模型制备成功6周后用右归丸进行干预,灌胃2个月后取材.HE法观察各组大鼠软骨组织病理形态改变并进行Mankin评分,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠软骨组织白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)和基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达变化,Western blot法检测各组大鼠软骨组织磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)、磷酸化的蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,pAkt)、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,pmTOR)和Beclin1的蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织Makin评分明显升高,软骨组织IL-1β、MMP-3和MMP-13的基因表达均明显升高,软骨组织PI3K、pAkt和pmTOR的蛋白表达均明显升高(P＜0.01);而模型组大鼠软骨组织Beclin1的蛋白表达明显降低(P＜0.01);模型组关节软骨边缘严重破坏,软骨细胞排列紊乱.与模型组相比,右归丸组大鼠软骨组织Makin评分明显降低,软骨组织IL-1β、MMP-3和MMP-13的基因表达均明显降低,软骨组织PI3K、pAkt和pmTOR的蛋白表达均明显降低,Beclin1的蛋白表达明显升高(P＜0.05或P＜0.01),其软骨结构趋于正常,软骨细胞分布偶见不均,关节软骨表面欠光滑.结论 右归丸可能是通过抑制IL-1β、MMP-3、MMP-13、PI3K、pAkt、pmTOR的表达和增强Beclin1的表达来达到治疗KOA的目的.

2020

2021/07/20

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重金属中毒影响脑内神经发生的研究进展

神经发生是由神经干细胞产生成熟的高度分化功能性神经细胞的过程,是哺乳动物大脑中一个重要的生物学现象,对神经系统发育、成熟以及功能的产生和维持都十分关键[1].神经发生在胚胎期和出生后早期最为活跃,能够产生机体中所有类型的神经细胞,如神经前体细胞、神经干细胞、神经元和胶质细胞等[2],此阶段称为胚胎神经发生(embryonic neurogenesis);而到了成年时期,这种现象也会在局部脑区持续存在,此阶段称为成年神经发生(adult neurogenesis)[3].

2020

2021/07/20

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圣约翰草提取物对慢性不可预知性应激致小鼠抑郁模型的影响

目的 观察圣约翰草提取物对慢性不可预知性应激致小鼠抑郁模型的作用及其机制.方法 采用慢性不可预知性应激法建立小鼠抑郁模型,将动物随机分为正常对照组、模型对照组、盐酸氟西汀组、圣约翰草提取物低、中、高[0.2 g/(kg·d)、0.4 g/(kg·d)、0.8 g/(kg·d)]剂量组,连续给药4周,给药同时对小鼠进行不同条件应激,末次给药后对小鼠进行自主活动、悬尾检测,检测血清5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)含量,取海马组织观察病理学变化.结果 圣约翰草提取物低、中、高剂量组均能逆转模型组指标变化(P<0.05或P<0.01),增加抑郁小鼠血清中5-HT、NE含量(P<0.05),减轻海马组织神经元的损伤.且与盐酸氟西汀组作用相当.结论 圣约翰草提取物对慢性不可预知性应激致小鼠抑郁模型具有明显的抗抑郁作用,其作用可能是通过调节神经递质5-HT和NE含量,减轻海马组织神经元损伤.

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2021/07/20

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川芎生物碱的物质基础及药理作用研究进展

目的:了解川芎生物碱的物质基础及药理作用研究进展,为进一步开发利用川芎植物资源提供参考.方法:以"川芎""生物碱""物质基础""药理作用""Ligusticum chuanxiong""Alkaloids""Material basis""Pharmacological activity"等为关键词,在中国知网、中国专利网、PubMed、Web of Science等数据库中组合查询2008-2019年发表的相关文献,对川芎生物碱的物质基础和药理作用等的研究进展进行归纳与总结.结果与结论:共检索到相关文献72篇,其中有效文献50篇.物质基础研究表明,目前从川芎中共分离得到20个生物碱单体;其中川芎嗪被认为是川芎的特征性生物碱,可作为评价川芎生物碱含量的指标性成分,其含量高低与川芎来源、追肥情况及提取工艺等密切相关.现代药理研究表明,川芎生物碱具有脑保护作用(包括抑制脑缺血再灌注损伤、抗偏头痛、保护神经)、抑制血栓形成和血小板聚集、抗心肌缺血及抑制子宫平滑肌收缩等作用.目前,川芎生物碱的药理研究与临床运用之间还存在一定差距;川芎嗪在川芎中的含量高低存在争议,尚待进一步明确.故建立完善的质量评价标准、深入研究川芎生物碱的物质基础,可为川芎的开发利用提供更多依据.川芎生物碱为川芎的重要有效部位,在血液系统和脑损伤保护方面作用显著,故可作为今后的重点研究方向.

2020

2021/07/20

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N-乙酰半胱氨酸对烟熏模型大鼠肺组织氧化应激的影响

背景:N-乙酰半胱氨酸是谷胱甘肽的前体,可以直接清除氧自由基.然而,N-乙酰半胱氨酸是否通过降低氧化应激反应,减轻吸烟导致的肺损伤尚不完全清楚.目的:探讨N-乙酰半胱氨酸对烟熏大鼠肺组织氧化应激的影响,并阐明其可能的作用机制.方法:将30只雄性大鼠随机分为对照组、烟熏组、烟熏+N-乙酰半胱氨酸组.将烟熏组和烟熏+N-乙酰半胱氨酸组大鼠置于被动吸烟动物染毒系统,每次暴露20支香烟的烟雾中,2次/d,1 h/次,持续8周.N-乙酰半胱氨酸组大鼠每天被动烟熏前给予N-乙酰半胱氨酸200 mg/kg灌胃,持续8周.正常对照组大鼠仅单纯放置在染毒系统内,正常饲养8周.实验方案由沈阳医学院实验动物伦理委员会于2018年10月批准,批准号:研伦审第(2018)85号.结果 与结论:①病理观察发现烟熏组大鼠肺组织排列紊乱、肺泡间隔增厚、炎症细胞浸润和间质纤维化,而烟熏+N-乙酰半胱氨酸组肺组织出血、间质内炎症细胞数量显著减少、纤维化程度减轻;②与对照组相比,烟熏组大鼠肺组织丙二醛5和肌醇酶α基因表达升高,超氧化物歧化酶1基因表达显著降低,而N-乙酰半胱氨酸可抑制上述变化;③免疫荧光和Western blot结果均发现烟熏+N-乙酰半胱氨酸组大鼠肺组织丙二醛5和肌醇酶α蛋白表达较烟熏组显著降低,超氧化物歧化酶1蛋白表达较烟熏组升高.此外,烟熏+N-乙酰半胱氨酸组核因子E2相关因子和Keap1蛋白表达明显升高,Bach1蛋白表达显著降低;④结果表明,N-乙酰半胱氨酸通过降低氧化应激对烟熏导致的肺损伤发挥保护作用,其作用机制可能通过激活核因子E2相关因子/Keap1信号通路实现.

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2021/07/20

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