| 中文名称Chinese name
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直肠途径SHIVSF162P3恒河猴感染模型 |
| 编号Model number |
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| 英文名称English name |
Rectal route, SHIVSF162P3, Ganges RIver monkey, infection model |
| 物种Species name |
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| 品系Strain name |
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| 人类疾病Human diseases |
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| 传染性Infectivity |
是 |
| 微生物Microorganism |
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| 类别Category |
感染性动物模型 |
| 造模因素Modeling factors |
1、感染毒株为SHIVSF162p3中国恒河猴细胞适应株，中国恒河猴PBMCs滴定病毒原液TCID50滴度为1×104 TCID50/mL。 |
| 制作方法Making method |
1、实验用病毒：感染毒株为SHIVSF162p3中国恒河猴细胞适应株，中国恒河猴PBMCs滴定病毒原液TCID50滴度为1×104 TCID50/mL。
2、感染动物：选用体重4-6 kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。
3、感染方法：将麻醉好的实验猴放在操作台上，动物采取俯卧位以保证直肠粘膜充分暴露，缓慢将SHIVSF162p3中国恒河猴细胞适应株的稀释液注入肛窦处，实验猴保持此姿势30min。
4、SHIVSF162p3直肠感染猴样品采集和指标测定：感染采取小量多次的方法，共感染21次。前3次接种的病毒浓度为1 TCID50/mL，然后2 TCID50/mL接种3次，10 TCID50/mL接种3次，20 TCID50/mL接种3次，最后30 TCID50/mL接种5次，每次接种间隔4-7d。在每次感染前及21次感染结束后,采EDTA抗凝血3mL，分别测定外周血CD4+/CD8+比值及血浆病毒载量。
5、SHIVSF162p3直肠感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA，使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。
6、SHIVSF162p3直肠感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+T细胞绝对数。 |
| 生物学特征Biological characteristics |
血清学检查可检出病毒。 |
| 医学用途Medical use |
主要用于艾滋病发病机制研究、艾滋病疫苗药物评价。 |
| 临床表现Clinical manifestation |
无明显临床表现。 |
| 病理表现Pathology |
7只实验猴的CD4+/CD8+比值在某一段时间内均有明显下降的趋势。G0813R和G0821R两只猴的CD4+/CD8+比值从感染初期的2.0左右，到感染100天后逐渐下降至1.0左右，其中，G0821R猴在感染后158天出现倒置；G0819R和G0817R两只猴的CD4+/CD8+比值在感染后100天左右下降至1.0以下，出现倒置，随后发生反弹；G0812R、G0814R和G0815R三只感染猴均在感染后100天，CD4+/CD8+比值下降至1.0以下，之后维持倒置现象。 |
| 发病天数Days of onset |
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| 发病过程Pathogenesis process |
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| 临床诊断Clinical diagnosis |
1、SHIVSF162p3直肠感染恒河猴外周血病毒载量结果
G0812R与G0821R载量峰值最高，分别为为106和106.5拷贝/ml，而G0813R、G0814R、G0815R、G0817R和G0819R载量峰值较低，介于103～105拷贝/ml之间（图1）。
图1 SHIVSF162p3小剂量多次直肠途径感染恒河猴血浆病毒载量结果
Fig.1 The viremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaques infected intrarectally with repeated low dose of SHIVSF162p3
2、SHIVSF162p3直肠感染恒河猴外周血CD4+/CD8+比值结果
7只实验猴的CD4+/CD8+比值在某一段时间内均有明显下降的趋势。G0813R和G0821R两只猴的CD4+/CD8+比值从感染初期的2.0左右，到感染100天后逐渐下降至1.0左右，其中，G0821R猴在感染后158天出现倒置；G0819R和G0817R两只猴的CD4+/CD8+比值在感染后100天左右下降至1.0以下，出现倒置，随后发生反弹；G0812R、G0814R和G0815R三只感染猴均在感染后100天，CD4+/CD8+比值下降至1.0以下，之后维持倒置现象（图2）。
图2 SHIVSF162p3小剂量多次直肠途径感染恒河猴外周血CD4+/CD8+比值
Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytes in Chinese-original rhesus macaques infected intrarectally with repeated low dose of SHIVSF162p3
3、SHIVSF162p3直肠感染恒河猴外周血CD4+T细胞绝对数结果
7只实验猴的CD4+细胞绝对数在感染88天内都基本保持稳定，在1000-2000个/µL全血上下浮动，没有明显的升高或降低（图3）。
图3 SHIVSF162p3直肠途径感染恒河猴外周血CD4+T细胞绝对数的变化
Fig.3 The CD4+ T cell counts in Chinese-original rhesus macaques infected intrarectally with repeated low dose of SHIVSF162p3 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
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| 保藏单位Preservation unit |
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| 参考文献Reference |
1.熊竞，丛喆，王卫, 陈霆，吴芳新，刘克剑，苏爱华，鞠斌，魏强。SHIVSF162P3病毒感染急性期复制水平与慢性期CD4+T细胞亚群分布及频度相关性分析。中国病毒病杂志，2012,2（5）：354-359。Experimental infection of SHIVSF162p3 in rhesus macaques: correlation analysis of the viral RNA levels in the acute phase and the distribution of CD4+T cell subsets in the chronic phase. Chin J Viral Dis, 2012,2（5）：354-359.
2.Xue J, Cong Z, Xiong J, Wang W, Jiang H, Chen T, Wu F, Liu K, Su A, Ju B, Chen Z, Couto MA, Wei Q, Qin C. Repressive effect of primary virus replication on superinfection correlated with gut-derived central memory CD4(+) T cells in SHIV-infected Chinese rhesus macaques. PLoS One. 2013 Sep 2;8(9):e72295. |
| 录入/更新时间Date |
12-03-20 |
| 备注Remarks |
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