| 中文名称Chinese name
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静脉途径SHIVchn19p4恒河猴感染模型 |
| 编号Model number |
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| 英文名称English name |
Venous route SHIVchn19p4 Ganges RIver monkey infection model |
| 物种Species name |
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| 品系Strain name |
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| 人类疾病Human diseases |
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| 传染性Infectivity |
是 |
| 微生物Microorganism |
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| 类别Category |
感染性动物模型 |
| 造模因素Modeling factors |
感染毒株为SHIVchn19p4中国恒河猴细胞适应株，TZM-bl细胞检测病毒感染效价为1.5×104 TCID50/mL。 |
| 制作方法Making method |
1、实验用病毒：感染毒株为SHIVchn19p4中国恒河猴细胞适应株，TZM-bl细胞检测病毒感染效价为1.5×104 TCID50/mL。
2、感染动物：选用体重4-6 kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。
3、感染方法：猴G0601V和G0602V经后肢静脉感染1ml (1×104 TCID50/ml) 病毒。
4、SHIVchn19p4静脉感染猴样品采集和指标测定：在感染前和感染后4、7、9、11、14、18、21、28、35、42、49、56、70、84及120d采集猴静脉血3ml（EDTA抗凝），用于外周血病毒载量、CD4+细胞绝对数及总结合抗体滴度测定。
5、SHIVchn19p4静脉感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA，使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。
6、SHIVchn19p4静脉感染猴外周血CD4+绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+T细胞绝对数。
7、SHIVchn19p4静脉感染恒河猴外周血总结合抗体滴度检测：恒河猴血浆样品从1：2开始2倍连续稀释后，用“人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）”检测交叉性体液免疫反应，高于Cut-off值的最大血浆稀释度定义为SHIV特异性总结合抗体滴度。 |
| 生物学特征Biological characteristics |
病毒血清学检查阳性。 |
| 医学用途Medical use |
主要用于艾滋病发病机制研究，艾滋病药物或疫苗评价。 |
| 临床表现Clinical manifestation |
无 |
| 病理表现Pathology |
G0601V猴和G0602V猴均在感染后9d检测出病毒载量约为105copies/mL，两只猴分别于19d和16d出现病毒载量高峰，峰值约为106copies/mL。G0601V猴在感染后40d载量下降至最低，至感染后84d载量维持在104 copies/ mL。G0602V猴在感染后33d-84的载量维持在104 copies/ mL。 |
| 发病天数Days of onset |
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| 发病过程Pathogenesis process |
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| 临床诊断Clinical diagnosis |
1、SHIVchn19p4静脉感染恒河猴外周血病毒载量结果
G0601V猴和G0602V猴均在感染后9d检测出病毒载量约为105copies/mL，两只猴分别于19d和16d出现病毒载量高峰，峰值约为106copies/mL。G0601V猴在感染后40d载量下降至最低，至感染后84d载量维持在104 copies/ mL。G0602V猴在感染后33d-84的载量维持在104 copies/ mL（图1）。
图1 SHIVchn19p4静脉感染中国恒河猴外周血病毒载量结果
Fig.1 The viremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaques infected intravenously with SHIVchn19p4
2、SHIVchn19p4静脉感染恒河猴CD4+细胞绝对数结果
G0601V猴CD4+ T 细胞数在SHIVchn19p4感染后围绕1300个/ul水平波动；G0602V猴 CD4+T细胞数在SHIVchn19p4感染后围绕1550个/ul水平上下波动（图2）。
图2 SHIVchn19p4静脉感染中国恒河猴外周血CD4+T淋巴细胞绝对数
Fig.2 The CD4+ T cell counts (per l blood) in Chinese-original rhesus macaques infected intravenously with SHIVchn19p4
3、SHIVchn19p4静脉感染恒河猴外周血总结合抗体滴度测定
G0601V猴的抗体在感染后19d开始出现，于感染后40d达到峰值，随后维持在较高水平；G0602V猴的抗体在感染后12d开始出现，随后抗体水平不断增高，直至感染后84d与G0601V猴的抗体水平较为接近（图3）。
图3 SHIVchn19p4静脉感染中国恒河猴外周血总结合抗体滴度测定
Fig.3 The binding antibody in peripheral blood in Chinese-original rhesus macaques infected intravenously with SHIVchn19p4 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
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| 保藏单位Preservation unit |
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| 参考文献Reference |
1.丛喆，陶真，刘浩，姚南，金光，陈霆，魏强. SHIVchn19p7中国恒河猴细胞适应株的制备和生物特性研究[J]. 医学动物防制. 2010. 26(8): 690-691.
2.刘浩，刘强，丛喆，王卫，乔红伟，陈志伟，魏强。C亚型SHIVCHN19P4强毒株在中国恒河猴体内的传代研究。中国比较医学杂志，2011，21（4）：6-11。Serial Passages of Virus Clade C SHIVCHN19P4 in Chinese Rhesus Macaque. CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE, 2011，21（4）：6-11. |
| 录入/更新时间Date |
12-03-20 |
| 备注Remarks |
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