| 中文摘要Abstract in Chinese |
RGMb蛋白是反义导向分子(repulsive guidance molecule,RGM)家族成员之一,可在细胞水平上介导骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)的信号通路.大量研究报道,RGMb参与调控细胞的增殖、分化、凋亡以及细胞间的黏附能力.本研究旨在探讨RGMb对子宫内膜腺细胞的作用及其分子机制.应用siRNA与过表达技术处理子宫内膜腺细胞系(Ishikawa),采用qPCR与Western印迹技术确定其转染效率,以及BMP相关信号通路(MAPK与Smad)成员的表达.结果 显示:下调RGMb基因的表达显著降低了p-ERK1/2(1.861±0.1864 vs 0.885±0.0869,P=0.0090)与p-Smad 1/5/8(1.624±0.1238 vs 1.093±0.0890,P=0.0253)的表达水平.过表达RGMb基因显著升高了p-ERK1/2(1.237±0.1114vs 2.089±0.1658,P=0.0130)与p-Smad1/5/8(1.139±0.0562 vs 1.98±0.1449,P=0.0056)的表达水平.而RGMb基因下调和过表达对p-P38MAPK蛋白表达水平均无显著影响(P＞0.05).采用CCK-8和qPCR技术检测RGMb对Ishikawa细胞增殖活力及增殖相关基因的影响.结果 显示:转染80 nmol/L RGMb siRNA显著降低Ishikawa细胞的增殖活力(0.479±0.0271 vs0.3487±0.0094,P=0.0104),同时降低增殖相关基因CCND1(1±0.0366 vs0.6719±0.0236,P=0.0017)和CDK2(1±0.0370 vs0.853±0.0135,P=0.0202)表达水平;转染1 μg/mL RGMb基因过表达质粒显著提高Ishikawa细胞增殖活力(0.283±0.0030vs0.3714±0.0140,P=0.0001),同时增加CCND1(1±0.0178 vs 1.375±0.0356,P=0.0007)和CDK2(1±0.0188 vs 1.376±0.0513,P=0.0023)基因的表达水平.以上结果表明,RGMb可能通过p-ERK1/2与p-Smad 1/5/8影响Ishikawa细胞增殖活力,为进一步研究RGMb调控子宫机能的分子机制提供科学依据. |
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