小鼠及猕猴胚胎MECP2基因T158M单碱基突变体系的建立

文献名称Document name	小鼠及猕猴胚胎MECP2基因T158M单碱基突变体系的建立
编号Document number
PMIDPMID number
作者Author	周勤,王爽,张婷,等.
中文摘要Abstract in Chinese	目的:利用单碱基编辑技术定点修饰MECP2基因T158M位点,获得单一定点突变类型的啮齿类及非人灵长类胚胎,为建立模拟临床上Rett综合征的疾病动物模型奠定基础.方法:利用单碱基编辑技术构建3对T158 M-sgRNA质粒,并分别与BE系统(BE3或BF4max)质粒共转染293T细胞筛选高效的sgRNA,通过显微注射将体外转录的mRNA以不同的浓度组合注射到ICR小鼠和猕猴受精卵中,检测小鼠和猕猴胚胎发育率和编辑效率,评估BE3和BE4max的工作效率及最优浓度组合.结果:小鼠胚胎上BE4max(ng/μl)∶sgRNA (ng/μ1)=100∶50浓度组合时,小鼠胚胎发育率和编辑效率最佳,同时该浓度组合在猕猴胚胎上也获得了有效编辑效率.结论:成功在小鼠及猕猴胚胎上实现了MECP2基因T158M位点上C→T的转变,为后期建立T158M突变的RTT动物模型建立了稳定的胚胎编辑体系.
英文摘要Abstract in English
关键词Key word	Rett综合征, 单碱基编辑, 非人灵长类, 编辑效率
发表杂志Journal	中国生物工程杂志,China Biotechnology,2020,40(6)
发表年份Year	2020
录入/更新时间Date	2021/07/20