| 作者Author |
目的 观察去小胶质细胞化对早期糖尿病小鼠视网膜光感受器细胞的影响.方法 选取6～8周龄的SPF级雄性C57BL/6J小鼠作为实验动物,未经处理的5只作为空白对照组(A组),10只采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法成功诱导出糖尿病后的小鼠随机等分为B、C两组.A、B组继续喂养标准实验饲料4周,C组在喂养1周标准实验饲料后添加含290 mg·kg-1 PLX3397(集落刺激因子1受体拮抗剂)的AIN-76A(标准饮食配制的啮齿类实验动物纯化饲料)3周以去除小胶质细胞.4周后于同一时间点处死各组动物,眼球标本均于处死后即刻获取并固定.制备视网膜石蜡切片,HE染色后光学显微镜下观察视网膜结构;小胶质细胞特异性抗体P2ry12免疫荧光化学法检测小胶质细胞在视网膜上的分布,并测算平均吸光度(D)值以间接代表小胶质细胞的数量;TUNEL法测定光感受器细胞的凋亡情况;将上述观察指标在三组间进行比较.结果 光镜观察视网膜结构显示,与A组相比,B组神经纤维层变水肿,内丛状层、内核层及外核层排列变疏松;C组也出现上述改变,但程度较轻.小胶质细胞的免疫荧光化学检测结果显示:A组可在视网膜内层检测到少量的小胶质细胞;B组的小胶质细胞则分布于视网膜全层,提示其由内层向全层发生迁移;C组在各层均未检测到小胶质细胞.B组视网膜P2ry12的D值均较A组和C组高(t=3.478、8.166,均为P<0.05),A组也明显高于C组(t=30.409,P<0.001).光感受器细胞每高倍视野凋亡数A、B、C三组分别为(0.67±0.87)个、(9.22±1.56)个、(2.22±0.97)个,B组与A组及C组相比差异均有统计学意义(t=14.360、11.408,均为P<0.001);A组凋亡细胞数较C组少,差异均有统计学意义(t=-3.585,P=0.02).结论 在糖尿病早期小胶质细胞参与了糖尿病视网膜光感受器细胞的损害过程,通过早期对小胶质细胞进行耗竭化处理可缓解视网膜的水肿和外核层细胞的凋亡. |
当前位置：
