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| 文献名称Document name | 小鼠CYP2E1基因靶向miRNA表达载体的构建及鉴定 |
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| 编号Document number | |
| PMIDPMID number | |
| 作者Author | 张伟, 李小颖, 张连峰 |
| 中文摘要Abstract in Chinese | 目的 设计并构建靶向小鼠CYP2E1基因的miRNA干扰质粒,为探索CYP2E1基因功能奠定基础.方法 应用invitrogen设计软件设计两条干扰小鼠CYP2E1基因的靶向miRNA序列,合成相应的回文DNA序列,退火后分别连接到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体上,构建两套miRNA真核表达载体CYP2E1-miR1和CYP2E1-miR2,并使用该载体特有的串联方法将两载体上的miRNA前体寡核苷酸序列进行串联成为CYP2E1-miR1-miR2;将上述重组载体分别与构建的pcDNA3.1(+)-CYP2E1表达质粒共转染入293T细胞,RT-PCR法鉴定其干扰效果.结果 经酶切及测序鉴定,针对鼠CYP2E1基因的miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制共转染入293T细胞的pcDNA3.1(+)-CYP2E1质粒的表达,且串联质粒CYP2E1-miR1-miR2优于单独的干扰质粒CYP2E1-miR1及CYP2E1-miR2.结论 小鼠CYP2E1基因的靶向miRNA表达载体构建成功. |
| 英文摘要Abstract in English | |
| 关键词Key word | CYP2E1, 微小RNA, RNA干扰 |
| 发表杂志Journal | 中国比较医学杂志 |
| 发表年份Year | 2009 |
| 录入/更新时间Date | 2021.7.1 |
