骨搬移治疗感染性骨缺损大鼠骨生长因子的表达

背景:研究表明骨愈合是在多种生长因子参与下完成修复、再生与重建的病理生理性过程,其中碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子1在骨愈合的过程中发挥重要作用.目的:探讨胰岛素样生长因子1和碱性成纤维细胞生长因子2种骨生长因子在骨搬移术治疗大鼠感染性骨缺损前后的表达情况.方法:取SD大鼠36只,在每只大鼠胫骨下端造约4 mm的感染性骨缺损,2周后随机分为手术组和对照组.对照组做清创后安装支架不进行搬移;手术组清创后进行骨搬移手术治疗.于安装支架后第2周通过X射线摄片;第2,3,4周通过苏木精-伊红染色和ELISA检测2组感染性骨缺损的愈合情况及胰岛素样生长因子1和碱性成纤维细胞生长因子的表达情况.实验方案经广西医科大学动物实验伦理委员会批准(批准号为201903036).结果与结论:①X射线片显示:手术组2周后缺损区有骨痂形成,周围软组织未见肿胀,愈合效果良好;②苏木精-伊红染色显示:与对照组相比,手术组纤维组织有所减少,成骨细胞增多,骨小梁趋于致密并有较多间充质细胞和新生毛细血管生成;③ELISA结果显示:相比于对照组,手术组胰岛素样生长因子1表达量在第2,3周显著增多(P<0.05);碱性成纤维细胞生长因子在第2周表达量显著增多(P<0.05);④结论:骨搬移手术治疗后大鼠的胰岛素样生长因子1和碱性成纤维细胞生长因子表达上调,提示胰岛素样生长因子1和碱性成纤维细胞生长因子表达上调可能是促进感染性骨缺损愈合的原因之一.

2020

2021/07/20

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血常规和血生化指标在患强直性脊柱炎食蟹猴中的临床价值

目的 探讨部分血常规(WBC、PLT、MPV、NEUT、LYMPH、MONO、EO、BASO、NLR、MLR、ELR)和血生化指标(TP、ALB、A/G、GLOB、TG、CHO、HDL-C、LDL-C、ALP)对患有强直性脊柱炎的食蟹猴的临床价值.方法 随机选取40只患强直性脊柱炎的食蟹猴和40只正常食蟹猴,检测两组食蟹猴中部分血常规与血生化指标.分别用秩和检验和独立样本t检验对比分析两组间是否存在差异,并利用受试者工作特征曲线(ROC)计算各指标的灵敏度、特异度和AUC值.结果 在血常规指标中,除PLT外,强直性脊柱炎组中WBC、MPV、NEUT、LYMPH、MONO、EO、BASO、NLR、MLR、ELR均显著高于对照组,且各指标比值指标的AUC值均接近0.9;在血生化中,除TG无显著性差异外,强直性脊柱炎组中HDL-C、LDL-C、TP和ALB均显著低于对照组,GLOB、ALP和CHO显著高于对照组,ALP和GLOB的AUC值均大于0.9.结论 本研究筛查的各种血常规和血生化指标可作为强直性脊柱炎食蟹猴筛查及药物评价的关键指标,并对强直性脊柱炎的后续研究提供重要参考.

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2021/07/20

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长链非编码RNA XIST通过miR-186调控宫颈癌细胞侵袭迁移及凋亡的分子机制

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)XIST通过miR-186调控宫颈癌细胞侵袭迁移及凋亡.方法:宫颈癌细胞中转染XIST shRNA,qRT-PCR检测XIST表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移,Western blot检测Cleaved Caspase-3、MMP-2和MMP-9蛋白表达.生物信息学软件预测XIST和miR-186互补结合位点,荧光素酶报告载体鉴定.qRT-PCR检测XIST shRNA对miR-186表达影响.宫颈癌细胞中共转染XIST shRNA和miR-186 inhibitor,检测细胞凋亡、侵袭迁移和Cleaved Caspase-3、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平,评估抑制miR-186对XIST shRNA影响宫颈癌细胞凋亡、侵袭和迁移的作用.结果:转染XIST shRNA可以下调宫颈癌细胞中XIST表达水平,促进细胞凋亡并抑制细胞侵袭和迁移,诱导Cleaved Caspase-3蛋白表达,减少MMP-2和MMP-9蛋白表达.XIST可靶向调控miR-186表达,XIST shRNA可提高miR-186表达.miR-186 inhibitor可明显逆转XIST shRNA对宫颈癌细胞miR-186表达促进、凋亡促进、侵袭迁移抑制和Cleaved Caspase-3、MMP-2、MMP-9蛋白表达影响.结论:下调XIST通过促进miR-186表达抑制宫颈癌细胞侵袭迁移并诱导细胞凋亡.

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2021/07/20

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两种工况下8种腔静脉滤器疲劳强度的对比研究

为探索腔静脉滤器疲劳失效的原因,有必要研究滤器受到周期循环变载荷作用下的疲劳强度.应用SolidWorks软件建立8种腔静脉滤器的模型,应用有限元软件ABAQUS模拟分析8种滤器在周向脉动循环载荷和径向压缩循环载荷下的疲劳强度,并实验验证其中1种滤器的安全性.在周向疲劳分析中,8种滤器所有单元的交变应变点均处于疲劳极限曲线下方,且安全系数均大于1,满足疲劳寿命要求;在径向疲劳分析中,新型滤器和TrapEase滤器的部分单元的交变应变点位于疲劳极限曲线的上方,且安全系数均小于1,其余6种滤器均满足疲劳寿命要求.可回收滤器不一定满足10年的疲劳寿命要求,可作为临时滤器使用.通过14 d、21 d和28 d的动物实验,对3头小香猪置入Aegisy滤器,综合评价了滤器的安全性,该结果为腔静脉滤器的设计研发和临床应用提供良好的参考依据.

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2021/07/20

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主动脉弓缩窄诱导大鼠心肌肥大Raf/MEK/ERK通路的变化

目的:通过观察心肌肥大大鼠加速纤维肉瘤/丝裂素活化蛋白激酶激酶/胞外信号调节蛋白激酶(Raf/MEK/ERK)通路关键因子的基因和蛋白表达及蛋白磷酸化修饰水平上的变化,了解Raf/MEK/ERK通路在心肌肥大调控中的作用.方法:20只SD大鼠随机分为假手术组和模型组,通过主动脉弓缩窄(TAC)法建立心肌肥大模型,12周后颌下静脉取血分离血清,检测氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)含量,之后进行超声心动图测定和麻醉下的血流动力学测定,收集心肌标本,观察心肌组织的病理学改变,检测心肌组织Raf/MEK/ERK通路的关键因子基因、蛋白表达水平及蛋白磷酸化水平的变化.结果:与假手术组比较,TAC模型组大鼠超声心动图的左室舒张末期室间隔厚度(IVSd)、左室收缩末期室间隔厚度(IVSs)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWd)、左室后壁收缩末期厚度(LVPWs)显著增厚(P<0.05,P<0.01),左室收缩末期内径(LVIDs)显著减小(P<0.01),左心室质量(LV Mass)、左心系数LW(LV Mass/Weight)比值显著增加(P<0.05,P<0.01);大鼠心率(HR)、左心室最大收缩速率(+dp/dtmax)、左心室最大舒张速率(-dp/dtmax)均显著降低(P<0.01),血清中NT-pro BNP含量显著增加(P<0.01);心肌细胞排列杂乱,心肌细胞肥大、胞质明显增多,炎症细胞浸润,出现大量胶原纤维沉积,大面积心肌细胞呈现蓝色;大鼠心肌组织中c-Raf在Ser259和Ser338上的磷酸化蛋白phospho-c-Raf(Ser259)和phospho-c-Raf(Ser338)表达水平显著升高(P<0.01),其下游MEK1/2、ERK1/2的磷酸化蛋白phospho-MEK1/2(Ser217/Ser221)和phospho-ERK1/2(Thr202/Tyr204)表达水平也显著增高(P<0.01).结论:Raf/MEK/ERK通路在心肌肥大中的调控作用,可能通过激活关键因子c-Raf、MEK1、MEK2、ERK1和ERK2特异性位点的磷酸化实现的.

2020

2021/07/20

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"腰三针"干预腰多裂肌损伤大鼠多种氧化应激因子的表达

背景:腰椎后路手术是目前临床进行诸多手术如椎间盘切除、椎管减压等的主要手术入路,但有10％-40％的腰椎后路手术患者在术后不久可再次出现腰背部疼痛及相关功能障碍,这与手术过程中对椎旁肌如多裂肌的过度牵拉或钝性损伤有关.目的:观察腰三针对大鼠腰多裂肌损伤后氧化应激因子丙二醛、活性氧、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及磷酸化蛋白激酶B表达的影响.方法:将24只雄性SD大鼠随机分为3组,每组8只.模型组、腰三针组分别采用0.5％布比卡因盐酸盐肌内注射复制大鼠腰多裂肌损伤模型;对照组予生理盐水肌内注射.对照组与模型组造模后不进行针刺干预,腰三针组造模后给予针刺靳三针之"腰三针",即大肠俞、肾俞、委中,针刺后连接电针,波形选用疏密波,电针频率采用2 Hz/10 Hz,电流强度选择1 mA,持续干预20 min,每天干预1次,共干预7 d.电针干预7 d后,通过苏木精-伊红染色观察损伤部位多裂肌形态学变化,采用试剂盒检测各组大鼠多裂肌中丙二醛、活性氧、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的表达;采用Western-blot法检测多裂肌中磷酸化蛋白激酶B蛋白的表达.实验经广东省第二中医院实验动物伦理委员会批准,伦理批准号:048617.结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,干预7 d后,模型组可见肌纤维损伤明显,但已出现部分修复,但炎性细胞数量仍较多;腰三针组可出现较多新生的肌纤维,炎性细胞明显减少;②腰三针组肌纤维横截面积明显优于模型组(P<0.01);③干预后,模型组丙二醛、活性氧表达量明显高于对照组(P<0.01);腰三针组丙二醛、活性氧表达明显低于模型组(P<0.01),超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶表达高于模型组(P<0.01或P<0.05);腰三针组磷酸化蛋白激酶B蛋白表达明显高于模型组(P<0.01);④结果说明,腰三针干预可显著降低多裂肌损伤后氧化应激水平,可能与提高磷酸化蛋白激酶B的表达有关.

2020

2021/07/20

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可溶性识别分子PTX3的研究进展

PTX3(pentraxin 3,PTX3)是一种可溶性识别分子,在炎症因子和外源微生物刺激下由多种细胞快速产生,在细菌、真菌和病毒感染引发的天然免疫中发挥重要作用.研究发现,PTX3蛋白在炎症条件下可结合外源抗原,从而激活补体、启动吞噬等免疫效应;在癌症中PTX3通过与补体C1q(Complement component 1q)和H因子(Factor H,FH)相互作用,激活并调节补体级联,可作为外源性抑癌因子,抑制肿瘤相关炎症;在损伤组织中,PTX3与纤维蛋白结合又能发挥组织修复作用.因此,PTX3蛋白是抗感染反应、癌症进程和组织修复的关键成分.此外,PTX3还可作为多种人类疾病的生物标志物,为临床诊断提供新的依据.本文结合国内外对PTX3研究的进展情况,对其在不同生物学过程中的功能作用做详细介绍.

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2021/07/20

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性别差异对大鼠佐剂性关节炎模型的影响

目的 探讨性别差异是否影响SD大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)的成模过程.方法 取完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA),含卡介苗10 g·L-1100μL,在大鼠的足跖皮内注射,诱导大鼠AA模型,在实验周期内检测雄雌大鼠的体质量、关节肿胀度、踝关节病理、脾脏病理等,综合各项指标比较雄雌大鼠在整体表现和病理上的差异.结果 雄雌大鼠AA模型成功建立;关节肿胀度、关节肿胀数、关节炎指数、全身评分雄雌大鼠之间差异均无显著性;模型组雌鼠的体质量较雄鼠的体质量下降更明显;踝关节病理评分:骨质侵蚀与炎症在雄雌大鼠之间差异有显著性,且雌鼠较雄鼠严重;脾脏评分:雄雌大鼠的动脉周围淋巴鞘细胞的密度、边缘区增生与生发中心数量差异有显著性且雌鼠评分明显高于雄鼠.结论 雄雌大鼠的疾病严重程度在临床表现与病理方面存在差异,可为以后建立AA模型时对大鼠性别的选择提供参考依据.

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2021/07/20

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免疫刺激协同液氮冷冻损伤血管构建动脉粥样硬化易损斑块大鼠模型

背景:易损斑块是致急性心、脑血管缺血事件的病理基础,建立合适的动物易损斑块模型以供研究对心脑血管疾病的防治工作具有重要的指导意义,但目前尚无公认的构建易损斑块模型的方法.目的:探讨免疫刺激能否协同液氮冷冻损伤血管构建大鼠动脉粥样硬化易损斑块模型,以期能够复制出能广泛应用的动脉粥样硬化模型.方法:雄性SD大鼠40只,经适应性喂养1周后将其随机分为4组,即对照组、高脂组、液氮组、免疫刺激+液氮组.对照组予以常规饲料,其他3组予以高脂饲料喂养,2周后各组大鼠腹腔一次性注射维生素D3注射液;对照组及高脂组大鼠仅做假手术处理,不进行液氮及免疫刺激,术后分别继续予以常规饲料及高脂饲料喂养10周;液氮组及液氮+免疫刺激组施以液氮冷冻损伤术,术后继续予以高脂饲料饲养10周,期间液氮+免疫刺激组大鼠皮下注射牛血清白蛋白(3次/周,共计3周)及腹腔注射卵清白蛋白(间隔3 d注射,共计5次).造模10周后,取血检测大鼠血脂指标、炎症及氧化应激损伤指标、血红素氧合酶1蛋白表达量;取靶血管段观察粥样斑块的病理变化.实验方案经西南医科大学实验动物伦理委员会批准(批准号为IACUC:20170917006).结果与结论:①与对照组大鼠相比较,高脂组大鼠胆固醇水平、炎症及氧化应激指标、血红素氧合酶1蛋白表达量以及镜下组织病理学检查均无明显变化(P>0.05);与对照组及高脂组相比较,液氮组、液氮+免疫刺激组大鼠胆固醇水平、炎症及氧化应激指标、血红素氧合酶1蛋白表达量均明显升高(P<0.05),镜下组织病理学检查也提示有明显斑块,且液氮+免疫刺激组升高趋势更为显著(P<0.05);与液氮组相比较,液氮+免疫刺激组大鼠血脂、炎症及氧化应激指标、血红素氧合酶1蛋白表达量均明显升高(P<0.05),镜下组织病理学检查提示粥样斑块较液氮组更为明显;②结果说明,免疫刺激能协同液氮冷冻损伤血管加速大鼠颈总动脉粥样硬化易损斑块模型形成,为动脉粥样硬化性疾病的干预实验奠定基础.

2020

2021/07/20

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电针脊髓损伤模型大鼠"足三里"与"伏兔"穴神经细胞凋亡因子Caspase-3的表达

背景:中医自《内经》开始就提出了"治痿独取阳明"之理论,但是有关电针干预足阳明胃经治疗脊髓损伤的报道相对较少.目的:探讨电针刺激"足三里""伏兔"穴对脊髓损伤大鼠受损节段Caspase-3表达的影响.方法:将64只SPF级SD雌性大鼠随机分为4组,即对照组、预标记组、损伤后标记组和电针干预组,每组16只.对照组及预标记在操作前给予Brdu(50 mg/kg)连续10 d腹腔注射标记细胞,对照组于第11天给予咬除椎板,并不损伤脊髓,预标记组第11天给予制作脊髓损伤模型;损伤后标记组及电针组在制作脊髓损伤后连续10 d腹腔注射Brdu标记细胞,其中损伤后标记组不给予干预措施,电针组造模后第3天开始针刺足三里、伏兔穴.各组分别于损伤后3,10,17,24 d取脊髓组织,运用苏木精-伊红染色观察神经元数量的变化;免疫组织化学染色观察Brdu阳性细胞表达;qRT-PCR技术检测Caspase-3 mRNA的变化;Western blot检测Caspase-3蛋白表达的变化.实验方案经广西医科大学动物实验伦理委员会批准(批准号201712001).结果与结论:①脊髓损伤以后Caspase-3的mRNA及蛋白表达均高于脊髓没有受到损伤的对照组,脊髓损伤后神经元的数量明显较对照组少;随着时间的推移,预标记组、损伤后标记组及电针干预组Caspase-3 mRNA及蛋白表达先升高后降低,而电针组的Caspase-3表达明显减少,与预标记组及损伤后标记组比较差异有显著性意义(P<0.05);②苏木精-伊红染色显示随着时间的推移电针组的神经元数量明显比未经干预的预标记组、损伤后标记组高,在第24天时逐渐接近对照组的神经元数量;③免疫组织化学结果显示电针组阳性蛋白表达呈先升高后降低的趋势,17 d升至最高,24 d降至最低,整体阳性蛋白表达高于其他组(P<0.05);④结果说明,电针刺激"足三里""伏兔"穴可以减少Caspase-3 mRNA及蛋白表达,减少神经细胞的凋亡,同时可以促进神经元数量的增加,从而促进神经细胞的再生修复.

2020

2021/07/20

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