复方一枝蒿颗粒抗小鼠急性弓形虫感染的实验研究

目的 观察复方一枝蒿颗粒单用或联合阿奇霉素治疗小鼠急性弓形虫感染效果. 方法 通过腹腔注射弓形虫RH株速殖子的方法建立KM小鼠急性弓形虫感染动物模型,随机分成4组:急性弓形虫感染模型对照组、复方一枝蒿颗粒治疗组、复方一枝蒿颗粒与阿奇霉素联合治疗组,阿奇霉素对照组.观察小鼠病症及存活情况,采用ELISA法检测小鼠外周血弓形虫循环抗原CAg的表达变化;采用双基因PCR法检测弓形虫RH株速殖子在小鼠腹腔和脑、心、肺、肝、脾、肾等脏器中的增殖变化,并制备病理切片,染色后观察各脏器组织病理学变化. 结果 复方一枝蒿颗粒能够适当延长小鼠生存时间,延长率17.74％.组织学变化显示药物可减轻小鼠肺脏组织瘀血,并使小鼠脾脏出现大量多核型巨细胞形态.复方一枝蒿颗粒可抑制虫体在腹腔和肝、肾、心、肺组织中的增殖,感染4d时对小鼠腹腔冲洗液中游离速殖子的增殖抑制率可达92.80％,联用阿奇霉素增值抑制率达98.53％.相对定量PCR法显示弓形虫复方一枝蒿颗粒对小鼠肝、肾、心、肺组织中弓形虫增殖抑制率分别为(79.60±0.08)％、(42.00±0.20)％、(50.80±0.08)％、(60.40±0.21)％,作用虽弱于阿奇霉素对照组和联合药物组,但可显著抑制小鼠脑组织中弓形虫的增殖,增值抑制率达(76.80±0.07) ％(F=63.08,P＜0.01);核酸检测弓形虫529基因比B1基因在小鼠脏器中的表达更稳定,适宜作为弓形虫在宿主脏器组织中的监测指标.复方一枝蒿颗粒能降低虫体循环抗原CAg在感染小鼠外周血清中的表达水平,与感染组小鼠相比(3 970.82±20.52) pg/ml,至感染4d时药物组小鼠血清中CAg水平为(3 163.01±15.94) pg/ml. 结论 复方一枝蒿颗粒单用或联合阿奇霉素使用对小鼠急性弓形虫感染有一定治疗效果.与阿奇霉素对虫体的直接杀伤作用不同,复方一枝蒿颗粒主要通过增强脾脏免疫细胞吞噬作用和抑制虫体向脑能远端脏器的侵袭抑制感染鼠的病情发展,推测可能通过调节小鼠免疫功能起到治疗小鼠急性弓形虫感染的作用.

2020

2021/07/20

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黄芩提取物局部治疗实验性牙周炎的研究

目的:建立SD大鼠实验性牙周炎动物模型,观察黄芩提取物对其IL-1β和牙槽骨骨密度等的影响.方法:建模组(牙周炎组和黄芩提取物组)在大鼠上颌第二磨牙腭侧局部注射牙龈卟啉单胞菌液(P.g.W83),丝线结扎牙颈部,再局部涂抹菌液,饲以软食;8周后采用50mg/L黄芩提取物局部给予药物治疗,4周后检测龈沟液和唾液中的IL-1β含量及牙槽骨骨密度等变化.结果:8周后建模组大鼠双侧上颌第二磨牙腭侧牙龈组织红肿,易出血,牙周袋约3～4mm;龈沟液和唾液中IL-1β明显升高;Micro CT显示牙槽骨吸收达根1/2处,根分叉区可见牙槽骨吸收低密度投射区,牙周炎模型建立成功;50mg/L黄芩提取物治疗4周后,龈沟液和唾液中的IL-1β明显下降,牙槽骨密度、高度等显著升高.结论:该方法能够快速、稳定、有效地建立SD大鼠实验性牙周炎模型,50mg/L黄芩提取物能明显改善大鼠牙周炎组织中IL-1β和牙槽骨状况,为牙周病的临床防治提供实验依据.

2020

2021/07/20

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仙灵骨葆胶囊对去势大鼠骨组织H3K36me3、H3K9me3及JMJD2A表达的影响

目的 研究仙灵骨葆胶囊对去势大鼠骨组织中组蛋白 H3 第 36 位点赖氨酸三甲基化( histone H3 lysine36 trimethylation,H3K36me3)、组蛋白H3第9位点赖氨酸三甲基化(histone H3 lysine9 trimethylation,H3K9me3)和组蛋白去甲基化酶 JMJD2A表达水平的影响.方法 参照随机数字表法将24只SD雌性大鼠分为4组:空白对照组、阴性对照组、实验组、阳性对照组,每组6只.手术处理:空白对照组切除卵巢旁部分脂肪,另外3组大鼠经手术切除双侧卵巢.干预措施:术后1周,实验组给予仙灵骨葆胶囊(30. 85 mg/100 g),阳性对照组给予福美加(11. 7 mg/100 g),其余2组给予同体积蒸馏水.持续给药3个月后,HE染色观察骨微结构;采用逆转录-聚合酶链式反应( reverse transcription- polymerase chain reaction,RT-PCR)测组蛋白H3、JMJD2A mRNA表达,免疫印迹试验(Western blot)检测大鼠股骨髁骨组织的H3K36me3、H3K9me3、JMJD2A蛋白表达.结果 空白组、实验组及阳性对照组骨微结构优于阴性对照组;空白组、实验组及阳性对照组骨组织中JMJD2A表达高于阴性对照组(P＜0. 05),空白组、实验组及阳性对照组各组组蛋白H3mRNA表达低于阴性对照组( P＜0. 05),空白组、实验组及阳性对照组各组H3K9me3及H3K36me3蛋白表达低于阴性对照组( P＜0. 05).结论 仙灵骨葆胶囊可改善去势大鼠骨质疏松症状,其机制可能与其提高去势大鼠骨组织中JMJD2A表达,抑制H3K36me3和H3K9me3的表达有关.

2020

2021/07/20

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利用光遗传学技术实施终止室性心律失常的实验研究

目的 探讨基于光遗传学技术的程控光照终止大鼠室性心律失常的有效性及其影响因素.方法 将SD大鼠18只随机等分成3组:ChR2光照组,ChR2未光照组,空载病毒组,前两组动物经颈静脉注射100μl光敏蛋白载体病毒pAAV-CAG-hChR2(H134R)-mCherry,空载病毒组注射100μl空载病毒pAAV-CAG-mCherry.8周后,所有大鼠均麻醉后开胸充分暴露心脏,结扎冠状动脉左前降支后给予Burst电刺激(10 V,50 Hz,100个脉冲,持续2 s)诱发心室颤动或室性心动过速,ChR2光照组和空载病毒组分别给予4个间隔1 s的脉冲宽度为1 s的473 nm蓝光照射心外膜表面,ChR2未光照组不进行光照,观察光照终止的有效性,同时改变光功率密度(2、4、8、10、20倍阈值)观察不同光功率密度对终止效率的影响.对心脏组织石蜡切片进行HE染色和荧光观察.结果ChR2光照组的终止成功率为98.0％ ±2.0％,明显高于ChR2未光照组(51.7％ ±6.0％)和空载病毒光照组(57.2％±6.8％).功率密度依次增加(2、4、8、10以及20倍功率密度阈值),终止率也逐渐增加,分别为64.0％ ±6.8％ 、70.0％ ±7.1％ 、74.0％ ±8.7％ 、88.0％ ±3.7％ 和98.0％ ±2.0％.HE染色显示急性心肌梗死存在,石蜡切片红色荧光显示ChR2光照组 、ChR2未光照组转染目标光敏感蛋白ChR2成功.而空载病毒组未表达ChR2.结论 表达了ChR2 的心脏发生室性心律失常 ,可被光遗传学技术有效终止 ,且终止成功率与光照功率密度相关 .

2020

2021/07/20

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以动物模型为基础的腹部战伤损伤控制手术模拟训练

目的 为提高基层军医的腹部战伤损伤控制手术能力,采用枪弹伤动物模型进行模拟训练.方法 以自制研发的实验动物致伤平台为基础,将家猪固定于致伤仪器上,瞄准指定部位,用空气冲击波将直径为4.98 mm的钢珠激发,制成"非均一性"腹部枪弹伤动物模型,根据伤情完成适宜的损伤控制手术.在8个基层单位的卫生机构中,以每5人为一手术组分组进行模拟训练,并按照腹部损伤控制手术评分标准,在训练前和训练后进行考核评分.结果 根据需要可构建肝脏、脾脏、血管、胃肠道及系膜损伤等枪弹伤动物模型,非常贴近战时实际损伤情况,适用于损伤控制手术训练,并在此模型下开展腹部损伤控制手术模拟训练,训后成绩提高了24.60％.结论 本研究建立的动物模型及模拟训练流程有利于提高基层军医腹部损伤控制手术能力.

2020

2021/07/20

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跨骺钢板固定一定周期取出:继续观察一段时间后骺板的生长抑制情况

背景:临床上儿童干骺端、骺板周围骨折比较常见,跨骺板钢板内固定对稳定骨折有较为重要的作用.但内固定一定周期后取出内固定物,继续观察一定时间骺板的发育恢复情况鲜有报道.目的:设计骺板周围骨折动物模型,分析跨骺板置入锁定钢板一定周期取出钢板,继续观察一段时间后骺板的生长抑制情况.方法:建立32只幼兔右股骨远端骺板上方5 mm骨折模型,随机分4组,每组8只.应用相同型号钢板和螺钉,跨骺板周围骨折线行钢板置入内固定.术后2,4,8,12周取出内固定物,继续观察2周处死幼兔.取出股骨标本,测量股骨长度;作病理切片,测量骺板厚度及肥大细胞计数;观察形态学中肥大细胞及骺板厚度变化情况.将骨折模型作为实验组,以左股骨远端骺板作为对照.结果 与结论:①实验组在内固定2周后,取出钢板继续观察2周,股骨长度、骺板厚度、肥大细胞计数等与对照组对比,差异无显著性意义;②实验组内固定4,8,12周,取出钢板继续观察2周,与对照组相比,实验组股骨长度、骺板厚度、肥大细胞计数等指标未能完全恢复至正常,差异有显著性意义(P＜0.05);③结果表明,在内固定物不伤及骺板的前提下,跨骺板钢板内固定初期(≤2周)取出钢板继续观察2周,适当压力作用对骺板生长发育未产生显著影响;④但持续过久压力限制时(≥4周),内固定对骺板压力限制时间过长,虽然也及时取出内固定,但肢体长度、骺板厚度、肥大细胞计数等指标均未能完全恢复正常,可导致骺板生长部分或者完全阻滞,引起肢体畸形及骺板发育停滞.

2020

2021/07/20

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一起因加工动物内脏引起的布鲁氏菌病聚集性疫情分析

目的 调查一起由加工动物内脏导致的布鲁氏菌病聚集性疫情,为布鲁氏茼病预防与控制提供借鉴.方法 通过对医院、村庄进行主动搜索,检索医疗机构上报的传染病报告信息管理系统等方式获得该区的人间布鲁氏菌病病例,采取现场查看、当面访谈和电话调查的方式开展病例个案调查,同时完成病例标本实验室检测.结果 本起布病疫情共报告2例确诊病例和9例隐性感染者.虎红平板凝集实验、试管凝集实验(SAT)均为阳性.结论 根据患者临床表现、流行病学调查以及实验室检测结果,该起布鲁氏菌病聚集性疫情是由加工羊内脏引起的.应强化生物安全意识,落实防护措施.

2020

2021/07/20

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穿山龙总皂苷经TGF-β1/α-SMA通路减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化的实验研究

目的:探讨穿山龙总皂苷(TSRDN)经转化生长因子-β1/α-平滑肌动蛋白(TGF-β1/α-SMA)通路减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化的作用机制.方法:96只大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、泼尼松组(3 mg·kg-1),以及TSRDN低、中、高剂量组(20,40,80 mg·kg-1),每组16只.以博莱霉素5 mg·kg-1滴入气管建立肺纤维化动物模型,连续给药28 d后,检测羟脯氨酸含量、肺系数,观察肺组织病理变化,同时采用反转录·聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织中TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白表达量.结果:假手术组肺组织结构正常,无间质纤维组织增生,偶见炎性细胞;模型组大鼠组织巨噬细胞活化,炎性细胞浸润,肺泡隔增宽,表面有较多出血灶,形成弥散性肺纤维化,多呈3级纤维化和2级肺泡炎改变;泼尼松组和TSRDN给药组胶原组织增生降低,肺泡间隔增宽不明显,多数肺组织结构较为清晰,多呈2级和1级纤维化改变,炎性细胞浸润减少.与假手术组比较,模型组大鼠肺系数、肺组织羟脯氨酸含量、肺泡炎评分、肺纤维化评分、TGFβ1、α-SMA mRNA和蛋白表达水平显著升高(P＜0.05);与模型组比较,泼尼松组和TSRDN各剂量组大鼠上述相关指标均降低(P＜0.05),且随着TSRDN剂量的升高,TSRDN各剂量组大鼠上述相关指标逐渐降低,呈剂量依赖性(P＜0.05);与泼尼松组比较,TSRDN低、中剂量组大鼠肺系数、肺组织羟脯氨酸含量、肺泡炎评分、肺纤维化评分、TGFβ1、α-SMA mRNA和蛋白表达水平均升高(P＜0.05),TSRDN高剂量组大鼠上述相关指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论:TSRDN具有一定的抗肺纤维化作用,其机制可能通过TGF-β1/α-SMA信号途径干预纤维蛋白形成和沉积.

2020

2021/07/20

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畲药"十二时辰"醇提液皮肤用药的慢性毒性实验研究

目的:观察畲药"十二时辰"醇提液皮肤用药的慢性毒性作用,初步评价其皮肤长期用药的安全性.方法:采用新西兰家兔进行皮肤用药30 d涂皮慢性毒性试验,固定涂药时间,连续30 d,末次给药后进行血常规、血液生化指标、脏器指数及组织病理学检查.结果:畲药"十二时辰"醇提液用于家兔皮肤慢性毒性实验期间,动物生长发育良好,血常规、血液生化指标、脏器指数及组织病理学检查与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:畲药"十二时辰"醇提液皮肤长期用药对家兔无明显毒性,是较安全的皮肤外用药.

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2021/07/20

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不同剂量龙血生肌温敏凝胶对失神经支配创面促愈合的实验研究

目的:观察应用不同剂量的龙血生肌温敏凝胶对大鼠失神经支配创面促愈合的影响,明确最佳剂量.方法:健康SD大鼠80只,建立失神经支配创面动物模型,随机分成4组,高剂量组、中剂量组、低剂量组、对照组各20只,高、中、低剂量组分别用相应剂量(0.8、0.4、0.2 g/mL)的龙血生肌温敏凝胶,对照组使用凡士林纱布外敷创面,观察创面愈合的大体情况,计算创面愈合所需的时间及其愈合率,采用HE染色检测各时间点创面组织切片的成纤维细胞数量.结果:高、中、低剂量组及对照组创缘皮肤血供均良好,无明显红肿发炎及坏死征兆;创面愈合时间及愈合率对比,高剂量组及中剂量组相近,均比低剂量组及对照组优(P<0.05),而低剂量组又比对照组愈合快(P<0.05).高中低剂量组的成纤维细胞数量在5个时间点均比对照组显著增多(P<0.05),高、中剂量组的成纤维细胞数量在造模后第11天比低剂量组显著增多(P<0.05).结论:龙血生肌温敏凝胶对失神经支配创面有促愈合作用,中高剂量的龙血生肌温敏凝胶疗效最佳.

2020

2021/07/20

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