包载花旗松素纳米脂质体改善糖尿病心肌病心心肌细胞纤维化的实验研究

目的:研究新型纳米脂质体包载花旗松素对于糖尿病心肌病(DCM)引起心肌细胞纤维化的预防作用及其机制.方法:采用注入法结合超声分散技术制备包载花旗松素纳米脂质体并对其进行质量表征.将60只SD大鼠随机分成4组:正常对照组、模型组、花旗松素溶液组(20μg·kg-1)、花旗松素纳米脂质体组(20pμg·kg-1),每组15只.除正常对照组外,其余各组通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立大鼠Ⅰ型糖尿病(DM)动物模型.各组分别尾静脉注射给药,2次/周,连续16周,模型组和正常对照组给予等量生理盐水.给药结束后采用Masson胶原染色法测定心肌胶原容积分数(CVF),用ELISA及West-em Blot法测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量和核因子2相关因子2(Nrf2)、NAD(P)H醌脱氢酶1(NQO1)的蛋白表达.结果:载药纳米脂质体形态圆整、分散均匀、稳定性好、包封率高.与正常对照组比较,模型组心肌组织CVF值、MDA含量及Nrf2、NQO1蛋白表达显著升高(P＜0.05),SOD及GSH-Px含量显著下降(P＜0.05).载药纳米脂质体干预组大鼠心肌组织CVF值及MDA含量较花旗松素溶液组及模型组显著下降(P＜0.05),而SOD、GSH-Px含量及Nrf2、NQO1蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论:新型花旗松素纳米脂质体通过激活Nrf2/ARE信号从而发挥对抗DM引起心肌细胞氧化应激损伤作用,改善DCM大鼠心肌纤维化,有望成为DCM的新型治疗形式.

2020

2021/07/20

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骨炎方治疗骨感染作用机制的实验研究

目的:探讨中药复方骨炎方对家兔慢性骨髓炎的抗炎效应.方法:采用家兔右胫骨骨髓腔内注射金黄色葡萄球菌的方式以诱导慢性骨髓炎模型,动物分为模型组、阳性药克林霉素组(60 mg/kg)、骨炎方两个剂量组(生药量分别为3.6和1.8 g/kg)以及假手术组.各组灌胃给药,分别于给药后第2,4,6周对右胫骨行X线片检查并予诊断分型,采血测定白细胞计数和血沉,取血清测定白介素(IL)-1β,IL-4,IL-6,IL-10等细胞因子含量.结果:骨炎方高剂量组第2,4,6周的X线片诊断分型与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01);骨炎方低剂量组第4,6周的X线片诊断分型与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,骨炎方高、低剂量组白细胞计数和血沉在给药后第2,4,6周均有明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,骨炎方高、低剂量组第2,4,6周的促炎细胞因子IL-1β和IL-6水平均有明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05),第6周的抗炎细胞因子IL-4水平有明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01);高剂量组抗炎细胞因子IL-10水平则在第4,6周有明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:骨炎方抗家兔慢性骨髓炎的作用机制可能与抑制致病菌、控制炎症反应、恢复促炎/抗炎细胞因子平衡等有关.

2020

2021/07/20

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半自动脊柱手术机器人系统在脊柱外科治疗中的应用

背景:临床常用的手术机器人主要依赖进口,自动化程度不高,核心技术无法突破,国产机器人方兴未艾,手术机器人造价昂贵,手术费用居高不下.课题组及深圳鑫君特智能医疗器械有限公司协同开发了Orthobot脊柱外科专用手术机器人系统,对国产手术机器人的发展意义重大.目的:通过动物腰椎模型探讨Orthobot半自动脊柱手术机器人系统在腰椎手术的应用可行性,验证其安全性及有效性,优化手术流程.方法:将12具实验猪腰椎标本(L1-L6)随机分成2组,实验组(6具)采用术前CT扫描数据结合术中C臂机X射线透视进行配准,在三维CT数据下规划钉道,应用Orthobot机器人系统进行腰椎标本椎弓根定位,克氏针钻孔,沿克氏针攻丝,制备钉道;对照组(6具)直接采用术中C臂机X射线透视数据,在二维X射线数据下规划钉道.记录术中钉道规划时间、克氏针植入时间、射线暴露时间及机器人单个钉道制备总耗时.复查CT扫描,参照Abul-Kasimhierarchy分级系统评估植入椎弓根螺钉钉道的准确性与优良率.结果与结论:①实验组钉道规划时间、单个钉道制备总耗时长于对照组(P<0.001),两组射线暴露时间、克氏针植入时间比较无显著性意义(P>0.05);②复查CT评估显示,实验组制备60个腰椎椎弓根螺钉钉道的优良率为96.7％(58/60),明显优于对照组的优良率85.0％(51/60)(P<0.05);③结果表明对比单纯采用术中C臂,应用半自动Orthobot脊柱手术机器人系统结合术前CT与术中C臂置钉的准确率高、安全有效,但术中系统注册匹配时间增加、手术总耗时更长.

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2021/07/20

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红带锥蝽实验条件下发育特征研究

目的 研究红带锥蝽的发育历程,为其调查和防制提供参考依据. 方法 以福建省漳州市华安县湖坪村采集的红带锥蝽为研究对象,于2018年5月-2019年9月在温度26℃、相对湿度60％的实验室环境条件下进行饲养.以ICR小鼠为唯一供血源(供血3d),观察并记录红带锥蝽各个发育阶段的孵化、吸血、蜕皮等情况. 结果 在设定的实验条件下,红带锥蝽可完成整个生活史,包括卵、Ⅰ～Ⅴ龄若虫和成虫等7个阶段,平均历时117.7 d.卵的孵化率为92.2％ (391/424).若虫和成虫均吸血,且每一龄若虫均需饱血才能蜕皮,雌性成虫需吸血才能产卵.Ⅰ～Ⅴ龄若虫的吸血率和蜕皮率分别为86.4％ (338/391)和72.4％ (283/391)、76.7％(217/283)和58.3％ (165/283)、71.5％ (118/165)和52.1％ (86/165)、91.9％ (79/86)和64.0％ (55/86)、96.4％ (53/55)和56.4％ (31/55).若虫的吸血量随龄期增长而逐渐增大,Ⅰ～Ⅴ龄若虫的平均吸血量分别为(2.9±11.0)、 (8.0±3.0)、 (14.9±8.8)、 (85.4±17.8)、 (101.6±54.2)mg,吸血后的平均体质量增重倍数分别为5.4±1.8、3.8±1.2、2.8±1.1、5.1±1.4、2.6±1.1.Ⅴ龄若虫平均吸血量最大,Ⅰ龄若虫吸血后平均体质量增重倍数最大. 结论 红带锥蝽在实验条件下通过动物饲血能完成生活史,可为相关研究提供实验平台.

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2021/07/20

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睑板腺功能障碍动物模型的研究进展

睑板腺功能障碍被认为是干眼的主要危险因素之一.随着干眼发病率逐年升高,睑板腺功能障碍也越来越受到重视.目前睑板腺功能障碍的病因和发病机制尚未完全阐明,有待于进一步实验研究探索,因此寻找一种契合人类睑板腺功能障碍特征的动物模型有着十分重要的意义和广阔的应用前景.目前已知构建睑板腺功能障碍动物模型的方式主要包括局部或全身药物诱导,转基因或基因敲除技术,手术封闭睑板腺开口以及摘除泪腺,暴露于干燥压力环境或改变饮食等,实验对象多采用大鼠、小鼠、兔、狗等.本文将总结现有的睑板腺功能障碍动物模型制备方式,为相关研究提供一定参考依据.

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2021/07/20

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慢性脑低灌注对大鼠回肠黏膜Occludin及Claudin-2表达的影响

背景:前期研究发现,慢性脑低灌注可致大鼠肠道黏膜屏障发生改变,而闭合蛋白occludin及claudin是构成肠道黏膜屏障的重要组成部分.目的:探讨慢性脑低灌注对大鼠回肠黏膜屏障的影响.方法:20只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术和慢性脑低灌注组.慢性脑低灌注组通过永久结扎双侧颈总动脉建立大鼠慢性脑低灌注模型;假手术组双侧颈总动脉只分离而不结扎和剪断.术后4周通过苏木精-伊红染色观察大鼠回肠组织形态学变化并评分,TUNEL荧光染色检测回肠细胞凋亡情况,Western blot检测回肠紧密连接蛋白Claudin-2,Occludin的表达水平,免疫组织化学检测Occludin表达变化.实验方案经西部战区总医院动物实验伦理委员会批准.结果与结论:①苏木精-伊红染色形态学观察显示,与假手术组相比,慢性脑低灌注组大鼠回肠组织形态结构出现损伤不明显,病理评分无显著升高(P>0.05);②Western blot结果显示,与假手术组相比,慢性脑低灌注组大鼠回肠组织claudin-2表达升高,而Occludin表达降低(P<0.05);③TUNEL荧光染色显示,与假手术组相比,慢性脑低灌注组的细胞凋亡比例显著升高(P<0.05);④免疫组织化学结果显示,慢性脑低灌注组大鼠回肠组织Occludin表达降低(P<0.05);⑤结果说明,慢性脑低灌注会导致回肠黏膜屏障紧密连接蛋白Occludin表达降低及Claudin-2升高,可能存在一定肠道黏膜屏障功能损伤.

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2021/07/20

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黑血3D DANTE-CUBE磁共振管壁成像技术对动脉粥样硬化血管重复扫描的实验研究

目的:利用3.0T磁共振3D DANTE-CUBE序列对动脉进行重复扫描及可重复性分析,评价该序列在动物动脉管壁成像中的稳定性和可靠性.方法:研究对象为8只新西兰大白兔,其中实验组(5只)行高脂饲料喂养加腹主动脉内膜拉伤术造模.运用3D DANTE CUBE的T1WI和T2WI序列对腹主动脉扫描,2周后重复扫描一次.“观察者1”测量两次扫描图像,以计算重复扫描的一致性;针对第二次扫描,“观察者1”前后测量2次、“观察者2”测量1次,以计算组内和组间的一致性.定量参数为管腔面积(AL)、血管总面积(AT)和管壁面积(Aw).最后对目标血管行病理检查.结果:最终6只兔(实验组3只)纳入统计,DANTE-CUBE的T1WI和T2WI序列均可清晰显示管壁病变和斑块成分,实验组的管壁面积显著大干对照组(P＜0.001).重复扫描的一致性T1WI的AL、T2WI的AL和Aw的一致性都非常好(IC C＞0.75,CV＜15％).观察者内的一致性:T1WI的所有参数的一致性都非常好(ICC＞0.75,CV＜15％);T2WI的AL和Aw的一致性非常好(ICC＞0.75,CV＜15％).观察者间的一致性分析:T1WI和T2WI的所有参数的一致性都非常好(ICC＞0.75,CV＜15％).结论:本研究3D DANTE-CUBE管壁成像序列可以精准且稳定地评价动物的动脉粥样硬化管壁,为进一步的临床应用奠定了技术基础.

2020

2021/07/20

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ApoE基因敲除构建大鼠缺血性脑卒中模型的实验研究

目的 探讨采用载脂蛋白E(ApoE)基因敲除构建稳定的大鼠缺血性脑卒中的过程.方法 选用健康的6周龄雄性ApoE基因敲除大鼠100只,SPF级SD雄性大鼠100只,依据大鼠种类分为两组.用线栓法堵塞大脑中动脉2 h,缺血后2 h向外拔出线栓约2 mm再灌注22 h后行Zea-Longa评分,评分在2-3分为成功模型.统计不同种类大鼠成模成功率情况;在模型构建3 d、7 d时行神经功能缺损严重程度评分(NSS)和横木行走实验(BWT)评分评估模型的稳定性,同时行核磁共振(MRI)检查了解各处理梗塞病灶范围及变化;再通后灌注7 d断头取脑,进行氯化三苯基四氮唑(TTC)染色及荧光染色观察梗塞范围变化情况.结果 ApoE基因敲除大鼠与SD大鼠两组模型3 d内成功率高,分别为76％和77％,7 d内模型成功率分别为75％和73％,两组无统计学差异(P>0.05).ApoE基因敲除大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型缺血再通灌注7 d时NSS和BWT评分较3 d时稍减低,但无统计学差异;SD大鼠模型组在缺血再通灌注7 d时NSS和BWT评分较3 d时稍减低,但有显著统计学差异(P<0.001).MR影像显示缺血区域呈现明显高信号,随时间推移两组动物模型缺血范围呈先扩大后缩小趋势,SD组大鼠模型缺血范围较ApoE基因敲除组大.TTC染色缺血区染染成苍白色.ApoE基因敲除模型组荧光标记显示神经细胞大小、分布较SD组均匀,阳性细胞数明显高于SD组(P<0.05).结论 ApoE基因敲除大鼠可用于制备稳定的MCAO模型.

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2021/07/20

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续苓健骨方对骨质疏松模型大鼠miRNA表达谱的作用研究

目的 通过分析骨质疏松症大鼠模型miRNA表达谱变化,探讨续苓健骨方治疗骨质疏松症的分子机制.方法 建立去卵巢法骨质疏松模型大鼠12只,分为模型组6只、续苓健骨方组6只.假手术组6只为对照.造模1个月后,续苓健骨方灌胃12周,检测大鼠胫骨骨密度,检测腰椎miRNA表达谱,对差异表达的miRNAs进行生物信息学分析.结果 与假手术组比较,模型组腰椎miRNAs 58条显著下调、97条显著上调;与模型组比较,续苓健骨方组腰椎miRNAs下调的50条显著上调、上调的60条显著下调;与假手术组比较,续苓健骨方组腰椎miRNAs仅8条有差异.生物信息学分析发现,差异miRNAs靶基因主要参与HIF-1、甲状腺激素、Hedgehog、GnRH、自噬、cAMP及MAPK等信号通路.结论 建立了续苓健骨方治疗骨质疏松模型大鼠的miRNA表达谱;差异miRNAs可能通过调控HIF-1、甲状腺激素、Hedgehog、GnRH、自噬、cAMP及MAPK等信号通路参与续苓健骨方对骨质疏松大鼠的治疗过程.

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2021/07/20

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甲状旁腺素联合降钙素对大鼠骨质疏松的治疗作用

目的 探讨甲状旁腺素联合降钙素对大鼠骨质疏松的影响及其作用机制,为临床治疗提供理论依据.方法 100只雌性SD大鼠随机分为5组:假手术组、去势组、甲状旁腺素组、降钙素组、联合用药组,每组20只,构建去卵巢大鼠骨质疏松动物模型.骨组织骨密度(bone mineral density,BMD)和骨矿物质含量(bone mineral content,BMC)测定,血清E2检测,骨代谢相关生化指标和标志物检测,观察骨形态结构变化.结果 去势组较假手术组腰椎和股骨BMD和BMC、股骨最大负荷及血清E2、Ca、P、骨保护素水平均显著降低(P<0.05),而联合用药组上述指标较去势组均显著增高(P<0.05).去势组血清碱性磷酸酶、OC、RANK水平较假手术组均显著升高(P<0.05),而联合用药组上述指标较去势组均显著降低(P<0.05).去势组骨小梁明显减少,排列稀疏错乱,并出现大片断裂现象,大量纤维组织,骨细胞少见;联合用药组骨小梁较多且致密,形态结构较规整,骨细胞排列较整齐,骨连续性好,骨密质较厚且均匀.结论 甲状旁腺素联合降钙素通过提高雌激素水平,调节维持骨代谢,提高骨密度和矿物含量,改善生物力学性能,改善骨组织病理形态学,起到抗骨质疏松疗效和骨保护作用.

2020

2021/07/20

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