小鼠非开胸式主动脉弓狭窄心衰模型的构建及评价

目的 采用非开胸式主动脉弓狭窄术(transverse aortic constriction,TAC)建立稳定可靠的小鼠心力衰竭模型,并对小鼠心力衰竭的的病理进程进行分析观察.方法 采用非开胸式TAC术建立C57BL/6J小鼠心力衰竭模型,通过心动超声成像,左心室质量指数,病理组织学检查来评价心脏功能及心衰程度.结果 左心室质量指数随时间逐渐升高,与假手术组比,术后4周、8周、12周均有非常显著性差异(P<0.01).心动超声显示,与假手术组相比,TAC术后4周左心室前壁厚度、左心室校正重量(LV mass corrected),心率(heart rate,HR),心输出量(cardiac output,CO)显著增加(P<0.01).术后8周左心室壁厚度、左心室校正重量和左心室收缩末期容积(LV Vol;s)显著增加(P<0.01),射血分数(ejection fraction,EF)和短轴率(fractional shortening,FS)显著减小(P<0.01).TAC术后12周,左室舒张末期内径(LVID;d)、左室收缩末期内径(LVID;s)、左心室舒张末期容积(LV Vol;d)和左心室收缩末期容积(LV Vol;s)显著增加(P<0.01),射血分数和短轴率进一步降低(P<0.01),同时病理学检查显示心肌纤维不同程度异常或病变.结论 实验结果表明,采用非开胸式TAC术建立小鼠心衰模型稳定可行,能够模拟的人类压力超负荷导致的左心室肥厚到心力衰竭的病理生理过程.

2020

2021/07/20

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独立通风笼具(IVC)的日常维护和清洁消毒

IVC笼具在我国实验动物设施的使用率越来越高.但目前除了新建的部分设施配有洗笼机可以相对彻底清洗及消毒灭菌IVC外,国内大部分的实验动物设施还需要采取人工的方式来清洗IVC笼盒、笼架及辅助结构,致使IVC的清洗、消毒灭菌不是那么完善及彻底,有的设施还缺少日常IVC维护及清洁消毒的措施.不彻底的清洁消毒IVC会对实验动物健康及环境设施有较大影响.作者从实际经验出发就IVC的日常维护及IVC各部件的维护、清洁消毒方法做一详细的介绍.

2020

2021/07/20

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金黄色葡萄球菌ATCC25923人工感染BALB/c雌鼠肾脏组织PRNP和PRND的表达变化研究

目的 为了研究细胞型朊蛋白和Doppel蛋白在金黄色葡萄球菌感染中的作用.方法 本实验用金黄色葡萄球菌ATCC25923感染BALB/c雌鼠后,分别在1～7 d内解剖小鼠,进行组织抹片革兰氏染色和石蜡切片制作,最后采用荧光定量PCR检测PRNP和PRND在1?7 d中的相对表达量.结果 金黄色葡萄球菌最先出现在肾脏,且对肾脏组织有损伤作用;PRNP和PRND基因在每个时段的表达量都高于空白对照组,其中PRNP在第1d的表达量最高,为空白对照组的6.1倍.PRND在第2d的表达量最高,为空白对照组的13.1倍.结论 小鼠肾脏的PRNP和PRND的mRNA表达水平随着金黄色葡萄球菌感染的时间发生变化.

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2021/07/20

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IVIM-DWI与DCE-MRI检查大鼠强直性脊柱炎骶髂早期改变

[目的]使用磁共振IVIM-DWI及DCE技术扫描早期强直性脊柱炎(AS)大鼠模型,并与病理结果对照,评价磁共振诊断早期AS的应用价值.[方法]用牛蛋白聚糖联合完全/不完全弗式佐剂诱导20只Wistar雄性大鼠为实验组,20只健康同种属大鼠作为对照组.分别在诱导后第7、12、17、22周测量骶髂区IVIM-DWI及DCE-MRI序列参数,并取骶髂关节行组织病理检查.采用ROC曲线分析评价各参数的诊断效能.[结果]牛蛋白聚糖诱导后第7、12周两组间所有MRI参数均无统计学意义,病理未见异常.诱导后第17周,实验组Fenh％、Senh％和F值均显著高于对照组,两组间差别有统计学意义(P＜0.05);实验组Dslow、Dfast及F值亦均高于对照组,但两组间差异无统计学意义(P＞0.05);22周时,实验组参数Fenh％、Senh％、Dslow、Dfast、及F值均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).第17周实验组骶髂区滑膜区可见炎细胞浸润,第22周实验组骶髂区滑膜内出现血管翳,软骨表面渗出.ROC曲线分析表明:各参数中F值的曲线下面积最大(0.82),Senh％(s-1)具有的敏感性最高(71.4％),而F值的特异度最好(95.O％).[结论]磁共振IVIM-DWI及DCE-MRI序列可敏感地监测强直性脊柱炎骶髂关节炎症早期局部微环境的改变,可为临床早期诊断AS提供可靠的影像学证据.

2020

2021/07/20

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长期低剂量抗生素的暴露对孕妇及婴幼儿的影响

抗生素的不当使用可导致严重的妊娠并发症及产褥期疾病的发生.同时抗生素的暴露能够影响生命体早期肠道微生态构建,进而导致后代免疫系统疾病、神经系统疾病及代谢性疾病发病率的增加.然而,长期低剂量抗生素的研究尚处于动物实验阶段.

2020

2021/07/20

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经血管输注间充质干细胞在临床前及临床研究中的血栓风险

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)因其具有特殊的低免疫原性和免疫调节能力,展现出良好的应用前景.但是近年来,MSCs产品的组织来源及体内移植途径的多样性,导致MSCs不良反应的报道越来越多.尤其是MSCs经血管输注过程中的栓塞问题越来越普遍.因此,本文就目前临床前和临床研究经血管输注MSCs后引起栓塞的因素进行总结,从而为临床前动物实验出现的栓塞风险如何正确有效预测临床上潜在风险提供思路.

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2021/07/20

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8-羟基-2-(二丙基氨基)四氢萘干预弥漫性轴索损伤模型大鼠低氧诱导因子1α的表达

背景:8-羟基-2-(二丙基氨基)四氢萘(8-hydroxy-2-(di-n-propylamino)tetralin,8-OH-DPAT)具有降低脑温的作用,且此作用可能是其发挥神经保护作用的潜在机制之一.目的:观察8-OH-DPAT对弥漫性轴索损伤大鼠脑组织低氧诱导因子1α 表达的影响,探讨8-OH-DPAT对弥漫性轴索损伤大鼠神经保护作用的途径.方法:实验方案经北部战区动物实验伦理委员会批准.将Wistar大鼠随机分为4组:模型组(n=35)、恒温组(n=35)、8-OH-DPAT组(n=35)和正常组(n=7).除正常组外,其他各组均参照Marmarou法制作弥漫性轴索损伤模型,恒温组和8-OH-DPAT组建模成功后腹腔注射8-OH-DPAT,模型组和正常组腹腔注射生理盐水;恒温组用恒温毯维持体温(37.0±0.5)℃.每隔1 h测量大鼠脑温.分别于弥漫性轴索损伤后6,12,24,72,168 h观察大鼠脑组织的损伤程度以及血清和损伤脑组织中低氧诱导因子1α 的表达.结果与结论:①造模后1 h,与恒温组和模型组比较,8-OH-DPAT组大鼠脑温明显下降(P<0.05),至造模后2 h降至最低(P<0.05),之后缓慢上升;②苏木精-伊红染色显示,模型组大鼠脑组织损伤最为严重,恒温组次之,8-OH-DPAT组损伤最轻;③免疫组织化学和ELISA结果显示,正常组血清及脑组织低氧诱导因子1α 表达很低;弥漫性轴索损伤后6 h,模型组血清及脑组织低氧诱导因子1α 表达增多,24 h达高峰,之后逐渐减少;与模型组比较,恒温组和8-OH-DPAT组对应时间点血清及脑组织低氧诱导因子1α 表达明显减少(P<0.05或P<0.01),8-OH-DPAT组减少更明显(P<0.01);④结果说明,8-OH-DPAT对弥漫性轴索损伤大鼠脑组织的神经保护作用与其降低大鼠脑温,减少损伤脑组织低氧诱导因子1α 的表达有关.

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2021/07/20

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ACE2在不同物种间的同源性分析及其对2019-nCoV宿主范围的启示

目的 分析不同物种间ACE2的同源性,并探讨2019-nCoV利用其作为受体在人与动物间跨物种传播的可能性.方法 从NCBI网站中下载不同物种ACE2的氨基酸序列,使用MEGA 7软件和在线程序BLAST和iTOL进行分析.结果 ACE2全长氨基酸序列(1-805)在哺乳动物中(尤其是非人灵长类动物)同源性较高.进一步分析与2019-nCoV的S蛋白结合的ACE2肽酶结构域(ACE2-PD)序列(19-615),发现反刍动物(牛、羊)和猫与人类ACE2-PD的识别率进一步提高,而蝙蝠略有下降.ACE2蛋白上与S蛋白直接相互作用的20个关键氨基酸(接口氨基酸)序列比对发现,猕猴与人类的接口氨基酸序列完全相同,反刍动物(牛、羊)和猫的接口氨基酸与人类相似.结论 灵长类动物可作为良好的动物感染模型,反刍动物(牛、羊)和猫也有可能是2019-nCoV的潜在感染动物.因此,应积极推进动物间2019-nCoV的病原学和血清学检测.

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2021/07/20

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精液液化异常的中、西医机制与治疗研究进展

精液的凝固与液化是一种保护精子运动和正常生育能力的自然生理现象,为哺乳类和灵长类动物所特有.在正常成年男性的一次射精量中,精子只占7％左右,其余均为精浆,其中70％来自精囊,20％来自前列腺,剩下的3％来自尿道球腺[1].在混合各腺体部分后精液自发凝固呈粘稠胶冻状,使其射入阴道后不至于立即流失.凝固物在随后几分钟内液化,使活动精子逐渐释放.液化时间是评价精子质量的重要标准之一,室温下,正常精液标本在射精后60min内液化,且通常在15min内完成.如果超过60min仍不能液化或液化不完全则称为精液液化异常(abnormal semen liquefaction)[2],包括液化迟缓和不液化,是导致男性不育的重要原因,值得生殖医学界的重视与关注.

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2021/07/20

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双硫仑联合铜离子对人骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响

背景:研究表明双硫仑本身具有抗肿瘤活性,可联合铜(Cu)离子在体内外水平对多种肿瘤发挥抑癌作用,但关于双硫仑对骨肉瘤细胞增殖和凋亡作用的影响尚未阐明.目的:探讨双硫仑-Cu在体内外水平对骨肉瘤增殖与凋亡能力的影响以及可能的作用机制.方法:实验方案经山西医科大学动物实验伦理委员会批准(批准号为2017LL077).①体外实验:配置双硫仑在进入人体后的转换物二乙基二硫代氨基甲酸钠(diethyldithiocarbamate,DDTC)和Cu离子的复合物DDTC-Cu(0.5,1,2,3和5μmol/L),设置DDTC单药(5μmol/L)、Cu单药(5μmol/L)和空白对照组.药物处理人骨肉瘤细胞Saos-2细胞和MG-63细胞,CCK8法检测不同浓度DDTC-Cu对Saos-2细胞和MG-63细胞的增殖抑制作用;采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测DDTC-Cu对Saos-2细胞凋亡水平变化;②体内实验:取4周龄BALB/c-nu/nu雌性裸鼠共10只,随机分为DDTC-Cu组和对照组.采用异位移植方法,在裸鼠右侧背部皮下注射Saos-2细胞和Matrigel混悬液(1:1混合),注射量400μL/只;接种2周后,对照组裸鼠腹腔注射地塞米松(0.5 mg/kg,隔日1次),DDTC-Cu组裸鼠腹腔注射地塞米松(0.5 mg/kg,隔日1次)和DDTC-Cu复合物(10 nmol/g,隔日1次);观察两组荷瘤小鼠移植瘤生长情况,绘制瘤体生长曲线.接种5周后麻醉下处死动物,完整取出瘤体,免疫组织化学检测瘤体石蜡切片组织中ki67蛋白的表达水平,Western blot检测瘤体组织中细胞增殖和凋亡蛋白的表达及JNK通路蛋白表达的变化.结果与结论:①体外实验结果:DDTC-Cu组对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用明显高于其他3组;CCK-8实验结果显示DDTC-Cu对骨肉瘤细胞增殖抑制呈剂量依赖性,两株细胞的24 h药物半抑制浓度分别为0.337μmol/L和0.487μmol/L;流式细胞学检测结果显示DDTC-Cu可呈剂量依赖性促进Saos-2细胞的凋亡;②体内实验结果:DDTC-Cu组裸鼠移植瘤的体积和质量均小于对照组;免疫组织化学结果显示,DDTC-Cu组的瘤体中ki-67蛋白表达水平较对照组降低;Western blot检测结果显示,DDTC-Cu组瘤体蛋白中p-JNK和c-jun的表达水平均上调.结果提示,双硫仑联合Cu离子在体内外水平抑制人骨肉瘤细胞增殖并促进骨肉瘤细胞凋亡,其作用机制可能与JNK通路活化有关.

2020

2021/07/20

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