鹿茸多肽对鱼藤酮致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其机制

目的:探讨鹿茸多肽对鱼藤酮诱导的神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的干预作用及相关机制.方法:用0.5 μmol· L-1的鱼藤酮作用于SH-SY5Y细胞建立帕金森病(PD)体外模型,设置空白组、模型组、鹿茸多肽高、中、低剂量(150,100,50 g·L-1)组及雷帕霉素组.通过苏木精-伊红(HE)染色,罗丹明123(Rh123)染色,2',7'-二氯荧光黄二乙酸酯(DCFH-DA)染色及免疫组织化学染色观察各组细胞中路易小体的数量、线粒体膜电位的变化、活性氧簇(ROS)含量及α-突触核蛋白(α-syn),蛋白激酶B(Akt),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达情况.结果:HE染色结果显示,与空白组比较,模型组中细胞数目减少、触角结构变钝,形态变圆,胞质内可见嗜酸性路易小体.与模型组比较,雷帕霉素组及鹿茸多肽高、中、低剂量组中细胞形态并无明显差异,但是胞质中路易小体较少;罗丹明123染色结果显示,与空白组比较,模型组中细胞线粒体膜电位明显升高(P＜0.05).与模型组比较,雷帕霉素组及鹿茸多肽高、中、低剂量组中细胞线粒体膜电位均有所下降(P＜0.05);DCFH-DA染色结果显示,与空白组比较,模型组细胞中活性氧(ROS)含量明显增多(P＜0.05);与模型组比较,雷帕霉素组及鹿茸多肽高、中、低剂量组的活性氧(ROS)含量均下降(P＜0.05).免疫组织化学结果显示,与空白组比较,模型组α-syn,Akt,mTOR蛋白表达明显增多(P＜0.05);与模型组比较,雷帕霉素组及鹿茸多肽高、中剂量组α-syn,mTOR蛋白表达均明显减少(P＜0.05),雷帕霉素组及鹿茸多肽高剂量组中Akt表达明显减少(P＜0.05).结论:鹿茸多肽可能是通过抑制Akt/mTOR信号通路促进α-syn的降解,从而发挥神经元保护作用.

2020

2021/07/20

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脂联素通过AMPK/mTOR/4EBP1通路对子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的影响

背景与目的:脂联素(adiponectin,APN)被认为是一种强有力的抑制肿瘤细胞生长的抗癌因子,但APN调节细胞转移的作用机制尚不清楚.探讨在子宫内膜癌HEC-1B细胞中,APN能否通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/磷酸化真核启动因子4E结合蛋白1(4E binding protein 1,4EBP1)通路抑制细胞迁移及侵袭.方法:实验设计为4组:①APN组:20μg/mL APN作用于细胞30 min;②抑制剂组:10μmol/L复合物C(AMPK抑制剂)作用于细胞30 min;③APN+抑制剂组:10μmol/L复合物C预处理细胞30 min后,加入20μg/mL APN作用30 min;④对照组:仅加入无血清DMEM培养基.实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)技术检测4组细胞中B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP-9)的mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测4组细胞中Bcl-2、MMP-9及AMPK信号通路中AMPK、mTOR、4EBP1蛋白水平;Transwell及划痕实验检测4组HEC-1B细胞的迁移能力.结果:Bcl-2和MMP-9 mRNA的表达水平在APN组中分别为0.64±0.08和0.68±0.02,均明显低于APN+抑制剂组(分别为0.98±0.11和0.96±0.08;P=0.02和0.03).APN组中,HEC-1B细胞Bcl-2、MMP-9蛋白水平分别与对照组、抑制剂组、APN+抑制剂组比较,差异均有统计学意义(P=0.00).APN组中,HEC-1B细胞AMPK、mTOR、4EBP1蛋白水平分别为1.49±0.02、0.48±0.00、0.19±0.00.与对照组比较,蛋白水平明显升高(P=0.00).APN组穿膜细胞数为(78.72±10.74)个,APN+抑制剂组为(131.45±9.11)个,对照组为(131.91±12.29)个,APN组与对照组比较,差异有统计学意义(P=0.00),APN+抑制剂组与对照组相比,差异无统计学意义(P=0.12).APN组中,HEC-1B细胞迁移率为(19.27±1.14)％,与其余3组比较,4组组间差异均有统计学意义(P=0.00),其余3组组间差异无统计学意义(F=2.78,P=0.39).结论:APN可经AMPK/mTOR/4EBP1信号通路发挥抑制子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的效应,达到抗肿瘤作用.

2020

2021/07/20

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马鹿茸组合物缓解大小鼠体力疲劳的作用研究

目的 研究马鹿茸组合物抗体力疲劳的作用及其机制.方法 NIH小鼠和SD大鼠随机分为空白对照组、奕华胶囊组(600 mg/kg)、马鹿茸组合物低、中、高剂量组(135、270、810 mg/kg),各组动物分别灌胃给予相应溶液,每天1次,连续30 d.末次灌胃30 min后检测各组动物的负重游泳时长、肝糖原含量及游泳后血清尿素氮、血乳酸浓度.结果 与阴性对照组比较,马鹿茸组合物组动物的游泳时长增加(P<0.05)、肝糖原含量升高(P<0.05)、血乳酸曲线下面积降低(P<0.05).结论 马鹿茸组合物具有抗体力疲劳作用,其机制可能与增加机体肝糖原储备和降低运动所引起的血乳酸堆积有关.

2020

2021/07/20

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鳖甲育肝颗粒对乙醇性肝纤维化大鼠的影响

目的:探讨鳖甲育肝颗粒对乙醇性肝纤维化大鼠的防治作用.方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、鳖甲育肝颗粒对照组、秋水仙碱组、鳖甲育肝颗粒低剂量组和鳖甲育肝颗粒高剂量组(n=8),采用梯度乙醇灌胃法复制肝纤维化动物模型,即除了空白对照组及鳖甲育肝颗粒对照组灌胃等量纯净水外,其余各组大鼠第1～4周灌胃5 g/(kg·d)乙醇,第5～8周灌胃7 g/(kg·d)乙醇,第9～12周灌胃9 g/(kg·d)乙醇,第13～24周灌胃9.5 g/(kg·d)乙醇,其中乙醇剂量计算采用下列公式:乙醇剂量(g)=无水乙醇体积(ml)×预配乙醇浓度(％)×0.8(g/ml),同时每天灌胃相应的药物:鳖甲育肝颗粒对照组灌胃鳖甲育肝颗粒5.55 g/kg、秋水仙碱组灌胃秋水仙碱0.1 mg/kg、鳖甲育肝颗粒低剂量组灌胃鳖甲育肝颗粒1.85 g/kg、鳖甲育肝颗粒高剂量组灌胃鳖甲育肝颗粒5.55 g/kg,空白对照组及模型对照组灌胃等量纯净水.实验第169日观测鳖甲育肝颗粒对大鼠肝脏脏器宏观变化、肝组织含水量及其纤维化病理变化、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CREB表达水平的影响.结果:1.85、5.55 g/kg鳖甲育肝颗粒能明显改善乙醇性肝纤维化大鼠肝脏脏器宏观变化及肝组织纤维化病理变化,降低肝组织含水量及Hyp的含量,下调α-SMA、CREB表达水平.结论:鳖甲育肝颗粒具有明显的抑制乙醇性肝纤维化的作用,而下调CREB是其抗肝纤维化的作用机制之一.

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2021/07/20

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褪黑素防治骨质疏松症的研究现状

骨质疏松症是一种危害严重且发病率逐年增加的全身性代谢性骨病,是中老年的常见病、多发病.褪黑素是一种由松果体分泌的调节生物昼夜节律的信号分子.近年来国内外研究发现褪黑素具有促进成骨细胞增殖分化、抑制破骨细胞活性从而促进骨代谢平衡的作用.其中,褪黑素在多项骨质疏松症相关细胞实验、动物实验以及临床试验的骨代谢研究中均取得了良好的治疗效果.因其具有治疗骨质疏松症的潜在作用,笔者就其研究进展作一综述,并提出今后可能的研究方向和亟待解决的关键问题.

2020

2021/07/20

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依普利酮抑制盐皮质激素受体活化减缓梗阻性肾病细胞自噬的研究

目的 观察盐皮质激素受体阻断剂依普利酮对梗阻性肾病细胞自噬的作用和机制.方法 36只♂Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和依普利酮组,通过结扎大鼠单侧输尿管制备动物模型.依普利酮组给予依普利酮100 mg·kg-1·d-1,10 d后摘取梗阻侧肾脏,激光共聚焦显微镜检测NR3C2表达,免疫组化和Western blot检测SGK-1、p-mTOR、Atg5、Beclin-1和LC3的表达.结果 激光共聚焦显微镜下显示:NR3C2在假手术组表达于肾小管远端上皮细胞的细胞质,细胞核内未见表达,模型组较假手术组表达明显增强,主要见于细胞核,与模型组相比,依普利酮组NR3C2在细胞核表达明显减弱;免疫组化和Western blot结果 显示,与假手术组比,模型组SGK-1、Atg5、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表达增强,p-mTOR表达减弱,给予依普利酮治疗后SGK-1、Atg5、Bec-lin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表达被下调,p-mTOR被上调.结论 依普利酮可以通过抑制盐皮质激素受体活化,减缓梗阻性肾病细胞自噬的表达.

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2021/07/20

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hVEGFR2-KI小鼠血液生理生化参数的测定与分析

目的 对不同性别的4周龄、8周龄C57BL/6-Kdrem1 (hKDR)/NIFDC(以下简称hVEGFR2-KI)小鼠的血液参数进行测定,分析性别以及年龄对于该品系小鼠血液参数的影响.方法分别取20只4周龄、8周龄小鼠雌雄各半,采静脉血.用日本光电Mek7222血细胞分析仪测定hVEGFR2-KI小鼠的生理指标,奥林巴斯AU400全自动生化分析仪测定生化指标.结果在所测得的生理生化指标中,4周龄的hVEGFR2-KI小鼠雌雄之间于血红蛋白浓度(HGB)、总蛋白(TP)、总胆固醇(CHO)3项指标有显著差异(P＜0.05),在红细胞计数(RBC)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)4项指标上有极显著差异(P＜0.01).8周龄的hVEGFR2-KI小鼠雌雄之间共有11项生理生化指标有极显著差异(P＜0.01),分别是RBC、HCT、HGB、血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、中性粒细胞绝对值(NEUT)、单核细胞百分率(MON％)7项血液生理指标和CHO、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)4项血液生化指标;有5项具有显著差异(P＜0.05)的指标,包括淋巴细胞百分率(LYM％)、中性粒细胞百分率(NEUT％)、TP、尿素(BUN)和磷(P).不同周龄hVEGFR2-KI小鼠之间的差异分布更广,其中具有极显著差异(P＜0.01)的有RBC、HCT、MCH、HGB、白细胞计数(WBC)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度(RDW)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、淋巴细胞绝对值(LYM)、单核细胞百分率(MON％)、TP、CHO、白蛋白(ALB)、ALP、肌酐(CREA)、GLU、P共18项指标;具有显著差异的为PLT、LYM％、NEUT％、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、TG共5项指标.结论本次研究测定了不同性别的4周龄、8周龄的hVEGFR2-KI小鼠的生理生化指标,为hVEGFR2-KI小鼠的应用以及正常血液参数标准提供一定参考.

2020

2021/07/20

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在生理学教学中开展课程思政的实践与思考

本文在概述课程思政内涵的基础上，从生理学课程思政教学实践中，提出结合教材介绍中国科学家对世界生物医学发展的贡献、结合中国近代史介绍我国科学家爱国的情怀、结合生理科学史介绍生理科学家献身科学的奉献精神、结合人体和动物实验介绍敬畏生命的人文素养、结合教学内容拓展挖掘生理知识的思政素材、结合校史社情介绍学生身边的感人事迹、结合不良事件划定科研和临床实践的底线、结合教师的亲身经历激励学生去实现人生梦想等途径来加强课程思政教育；并进一步就如何提升教师开展课程思政教育的自觉性、建设适合基础医学教学开展课程思政的素材库、提升教师开展课程思政的教学能力、构建互联网+课程思政新模式和加强教师的职业道德修养提出相应建议。

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2021/07/20

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生物材料修复肩袖损伤的最新研究热点

背景:肩袖损伤是导致成人肩部功能障碍的主要原因,单纯手术缝合后的再撕裂率非常高,而生物材料修复可增加肩袖损伤术后的生物力学性能.目的:阐述肩袖损伤生物修复材料的最新研究及临床应用现状.方法:通过计算机检索PubMed、web of science数据库中关于肩袖损伤修复材料的最新研究,检索词为“Rotator Cuff Injuries;Biological materials;autograft;Extracellular matrix materials;Synthetic materials;biological scaffold;Biological patch;augmentation”.对纳入的57篇文献进行分类比较,探讨各类修复材料的优缺点.结果 与结论:目前肩袖损伤的生物修复材料大体可分为未经处理的人体自身组织移植材料、细胞外基质材料和人工合成材料3大类.对于未经处理的人体自身组织移植材料,最新的临床报道显示该种材料常常出现不同的临床效果;细胞外基质材料中,来源于同种异体人源性真皮材料目前报道的效果尚可,大多学者不建议使用猪的小肠黏膜下层补片,同种异体移植物的结果可能优于异种移植物;最新的三维胶原支架和人工合成可吸收材料因其较好的孔隙率及可诱导腱骨组织的愈合,具有较好的应用前景,但大多仍停留在动物实验阶段,需要更多的临床试验来证实其安全性及有效性.目前尚无一种十分安全有效的生物修复材料来治疗肩袖撕裂.随着组织工程技术和材料学的发展,利用生物支架或合成材料的宏观性能结合干细胞或细胞因子的微观性能,有望在未来找到一种令人满意的材料.

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2021/07/20

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昆明山海棠提取物对新西兰兔的胚胎-胎仔发育毒性研究

目的:研究昆明山海棠提取物对妊娠动物、胚胎及胎仔发育的影响.方法:取交配成功的新西兰雌兔,按体质量随机区组法分为溶剂对照组、阳性对照组(环磷酰胺,20 mg/kg)和昆明山海棠提取物高、中、低剂量组(15.0、7.50、3.75 g/kg,以生药量计),每组均至少18只.溶剂对照组和昆明山海棠提取物各剂量组雌兔在妊娠第6～18天灌胃水或相应昆明山海棠提取物药液,5 mL/kg,每天1次;阳性对照组雌兔在妊娠第10～13天于颈部皮下注射环磷酰胺,1 mL/kg,每天1次.依据《药物生殖毒性研究技术指导原则》相关要求,在实验期间观察并记录雌兔的一般情况、体质量和摄食量,并于妊娠第28天时对其实施安乐死,解剖后观察并记录其主要脏器、带胎子宫、胎盘子宫、胎盘、卵巢以及着床腺、吸收胎、死胎、活胎、黄体等相关指标,并对胎仔进行体质量、外观形态、内脏和骨骼发育等相关指标的检查.结果:与溶剂对照组比较,昆明山海棠提取物各剂量组孕兔的体质量、体质量增长、摄食量、主要脏器,孕兔妊娠、生殖功能以及胚胎形成和胎仔的生长发育、外观形态、内脏和骨骼发育等相关指标均未见明显异常改变(P>0.05);阳性对照组上述指标均有显著变化(P<0.05),表现出明显的孕兔母体毒性以及胚胎和胎仔发育毒性.结论:昆明山海棠提取物在剂量为3.75～15.00 g/kg(以生药量计)时对新西兰兔无明显母体毒性、胚胎或胎仔发育毒性.

2020

2021/07/20

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