| 中文名称Chinese name
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直肠途径SHIV-1157ipd3N4恒河猴感染模型 |
| 编号Model number |
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| 英文名称English name |
Rectal route, SHIV-1157ipd3N4, Ganges RIver monkey, infection model |
| 物种Species name |
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| 品系Strain name |
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| 人类疾病Human diseases |
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| 传染性Infectivity |
是 |
| 微生物Microorganism |
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| 类别Category |
感染性动物模型 |
| 造模因素Modeling factors |
感染毒株SHIV-1157ipd3N4，病毒原液滴度为1×106 TCID50/mL（TZM-bl细胞滴定）。 |
| 制作方法Making method |
1、实验用病毒：感染毒株SHIV-1157ipd3N4，病毒原液滴度为1×106 TCID50/mL（TZM-bl细胞滴定）。
2、感染动物：选用体重4-6 kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。
3、感染方法：将麻醉好的实验猴放在操作台上，动物采取俯卧位以保证直肠粘膜充分暴露，缓慢将SHIV-1157ipd3N4中国恒河猴细胞适应株的稀释液注入肛窦处，实验猴保持此姿势30min。
4、SHIV-1157ipd3N4直肠感染猴样品采集和指标测定：感染采取小量多次的方法，共接种13次，前3次接种的病毒浓度为10 TCID50/mL，然后20 TCID50/mL接种5次，再50 TCID50/mL接种4次，最后对仍未感染的G1023R 100 TCID50/mL接种1次，每次接种间隔4-7d。在每次感染前及13次感染结束后定期采EDTA抗凝血3ml，分别测定CD348及血浆病毒载量。
5、SHIV-1157ipd3N4直肠感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA,使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。
6、SHIV-1157ipd3N4直肠感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+T细胞绝对数。 |
| 生物学特征Biological characteristics |
病毒血清学检查阳性。 |
| 医学用途Medical use |
主要用于艾滋病发病机制研究，艾滋病药物疫苗评价。 |
| 临床表现Clinical manifestation |
无 |
| 病理表现Pathology |
10只感染猴外周血CD4+T淋巴细胞绝对数在小剂量多次感染过程中基本保持稳定，存在小幅度的波动。56d后明显升高并维持在这一相对高水平，其中G1018R、G1020R和 G1022R在63d时升高约1000/μL，幅度较大，其余感染猴升高约500/μL（图3）。 |
| 发病天数Days of onset |
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| 发病过程Pathogenesis process |
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| 临床诊断Clinical diagnosis |
1、SHIV-1157ipd3N4直肠感染恒河猴外周血病毒载量结果
小剂量多次感染使直肠组10只猴感染SHIV-1157ipd3N4后检出血浆病毒RNA载量和载量峰值的时间点各不相同，G1015R、G1016R、G1019R和G1022R早在感染后14d检出，G1018R出现在18d，G1017R出现在21d，G1020R、G1021R和G1024R出现在35d，G1023R最后出现在56d。所有实验猴的血浆病毒RNA载量峰值都在阳转后1w内出现，G1015R和G1016R在21d峰值过后，35d时出现约105 copies/ml的反弹； G1017R和G1023R都只出现了2个大小相近的小高峰，21d 时G1017R峰值约105 copies/ml而56d 时G1023R峰值约104 copies/ml；G1019R、G1020R和G1022R存在105-106 copies/ml水平的大小相近的数据点，峰值不明显；G1018R、G1021R和G1024R分别在21d、35d和35d出现105 copies/ml以上的明显峰值。10只感染猴载量峰值的范围是2.89×104-2.38×106 copies/ml。在全部13次小剂量感染结束后，10只感染猴都进入103-104 copies/ml平台期（图1）。
图1 SHIV-1157ipd3N4小剂量多次直肠途径感染中国恒河猴血浆病毒载量结果
Fig.1 The viremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaques infected intrarectally with repeated low dose of SHIV-1157ipd3N4
2、SHIV-1157ipd3N4直肠感染恒河猴外周血CD4+/CD8+比值结果
10只感染猴外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞比值在小剂量多次感染过程中呈现多次小幅度波动，总体保持稳定，其中G1016R、G1018R、 G1020R、G1021R、G1023R和 G1024R出现明显一过性下降，随后迅速恢复。随感染时间延长，G1016R、G1019R和 G1021R外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞比值逐渐下降至0.43-1.0并维持倒置，而G1015R始终徘徊在1.0，其它感染猴稳定在1.0以上（图2）。
图2 SHIV-1157ipd3N4小剂量多次直肠途径感染中国恒河猴外周血CD4+/CD8+比值
Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytes in Chinese-original rhesus macaques infected intrarectally with repeated low dose of SHIV-1157ipd3N4
3、SHIV-1157ipd3N4直肠感染恒河猴外周血CD4+T细胞绝对数结果
10只感染猴外周血CD4+T淋巴细胞绝对数在小剂量多次感染过程中基本保持稳定，存在小幅度的波动。56d后明显升高并维持在这一相对高水平，其中G1018R、G1020R和 G1022R在63d时升高约1000/μL，幅度较大，其余感染猴升高约500/μL（图3）。
图3 SHIV-1157ipd3N4小剂量多次直肠途径感染恒河猴外周血CD4+T细胞绝对数变化
Fig.3 The CD4+ T cell counts (per l blood) in Chinese-original rhesus macaques infecte intrarectally with repeated low dose of SHIV-1157ipd3N4 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
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| 保藏单位Preservation unit |
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| 参考文献Reference |
1.赵长城，高锡强，吴芳新，张伟伦，薛婧，魏强，秦川. 白细胞介素21对SHIV 感染的恒河猴外周血CD8+T 细胞分泌γ干扰素的影响[J]. 中国比较医学杂志. 2012.22(4): 5-9.
2.赵长城，高锡强，薛婧，丛喆，张伟伦，苏爱华，陈霆，魏强，秦川. IL-21对恒河猴SHIV 特异性CD8+ T细胞毒性效应的影响[J]. 中国实验动物学报. 2012. 20(5): 29-34.
3.Yue Li，Qiang Liu，Zhenwu Luo，Yan meng Feng，Zhe Li，Qiang Wei and Y iming Shao. Partial Protection of SHIV-Infected Chinese Rhesus Macaques Against Super-Infection with Heterologous SHIV Isolate. Current HIV Research,2012,10,627-635.
4.Zhao CC, Xue J, Cong Z, Gao XQ, Zhang WL, Chen T, Wu FX, Xiong J, Ju B, Su A, Wei Q, Qin C. Circulating IL-21 levels increase during early simian-human immunodeficiency virus infection in macaques. Arch Virol. 2013 Apr;158(4):853-8. |
| 录入/更新时间Date |
12-03-20 |
| 备注Remarks |
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