| 中文名称Chinese name
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阴道途径SHIV-1157ipd3N4恒河猴感染模型 |
| 编号Model number |
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| 英文名称English name |
Vaginal route SHIV-1157ipd3N4 Ganges RIver monkey infection model |
| 物种Species name |
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| 品系Strain name |
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| 人类疾病Human diseases |
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| 传染性Infectivity |
是 |
| 微生物Microorganism |
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| 类别Category |
感染性动物模型 |
| 造模因素Modeling factors |
感染毒株SHIV-1157ipd3N4，病毒原液滴度为1×106 TCID50/mL（TZM-bl细胞滴定）。 |
| 制作方法Making method |
1、实验用病毒：感染毒株SHIV-1157ipd3N4，病毒原液滴度为1×106 TCID50/mL（TZM-bl细胞滴定）。
2、感染动物：选用体重4-6 kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。
3、感染方法：将麻醉好的实验猴放在操作台上，动物采取俯卧位，后肢抬高，暴露阴道口。用2mL预冷的无菌PBS清洗阴道。再将稀释好的适当浓度的病毒液1mL缓慢推入。实验猴保持此姿势30min。
4、SHIV-1157ipd3N4阴道感染猴样品采集和指标测定：感染采取小量多次的方法,共感染11次。前3次使用20TCID50的SHIV1157ipd3N4病毒,后8次使用10TCID50的病毒，间隔4-8d，进行阴道感染。在每次感染前及11次感染结束后定期采EDTA抗凝血3ml，分别测定CD348及血浆病毒载量。
5、SHIV-1157ipd3N4阴道感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA,使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。
6、SHIV-1157ipd3N4阴道感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+T细胞绝对数。 |
| 生物学特征Biological characteristics |
病毒血清学检查阳性。 |
| 医学用途Medical use |
主要用于艾滋病发病机制研究，艾滋病疫苗药物评价。 |
| 临床表现Clinical manifestation |
无 |
| 病理表现Pathology |
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| 发病天数Days of onset |
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| 发病过程Pathogenesis process |
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| 临床诊断Clinical diagnosis |
1、SHIV-1157ipd3N4阴道感染恒河猴外周血病毒载量结果
7-1到7-5猴都在初次感染后11d出现血浆病毒载量，高峰期载量都在106copies/mL以上，其中3只在107copies/mL以上。7-2和7-5在初次感染后38d血浆病毒载量转阴，且持续至感染后111d，急性期病毒载量只维持了20d。其余3只猴7-1，7-3，7-4急性期时间较长，且维持在104copies/mL左右。7-6在初次感染后63d首次检出血浆病毒载量，高达3.336×107copies/mL，至139d转阴（图1）。
图1 SHIV-1157ipd3N4小剂量多次阴道途径感染中国恒河猴血浆病毒载量结果
Fig.1 The viremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaques infected IVAG with repeated low dose of SHIV-1157ipd3N4
2、SHIV-1157ipd3N4阴道感染恒河猴外周血CD4+/CD8+比值结果
6只实验猴的CD4+/CD8+比在病毒载量出现后均有一个短期内快速下降并迅速反弹的过程。除7-4和7-6外，其他4只实验猴均未出现明显倒置，但CD4+/CD8+比值有逐渐降低的趋势。7-4在载量高峰时CD4+/CD8+降到了0.5，反弹后在70d再次降到0.5并逐渐维持在这个水平上。7-6在载量高峰时（70d）CD4+/CD8+降到了0.62，随后逐渐上升，至110d时已恢复至1.0左右（图2）。
图2 SHIV-1157ipd3N4小剂量多次阴道途径感染中国恒河猴外周血CD4+/CD8+比值
Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytes in Chinese-original rhesus macaques infected IVAG with repeated low dose of SHIV-1157ipd3N4
3、SHIV-1157ipd3N4阴道感染恒河猴外周血CD4+T细胞绝对数结果
7-1到7-6实验猴的CD4+细胞绝对数在感染50天内都基本保持稳定，在1000个/µL全血上下浮动，随后均有逐步下降，但下降幅度不大，最低值始终在600以上（具体数据未显示）。只有7-1从77d起有一次大幅下降，到感染后98d时，已降到222个细胞/µL猴血（见图3），随后迅速反弹至1000以上（图3）。
图3 SHIV-1157ipd3N4小剂量多次阴道途径感染恒河猴外周血CD4+T细胞绝对数变化
Fig.3 The CD4+ T cell counts (per l blood) in Chinese-original rhesus macaques infecte IVAG with repeated low dose of SHIV-1157ipd3N4 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
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| 保藏单位Preservation unit |
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| 参考文献Reference |
1.丛喆，蒋虹，金光，王卫，高虹，姚南，陶真，陈霆，杨志伟，Sylvain.Fleury，Anick Chalifour，Ruth.M.Ruprecht，魏强，秦川。SHIV1157ipd3N4小量多次阴道粘膜感染中国猕猴的初步研究。实验动物与比较医学，2011，31（1）：38-42。Efficient Repeated Low-dose Intravaginal Infection with SHIV1157ipd3N4 in Rhesus Monkey. Laboratory Animal and Comparative Medicine, 2011，31（1）：38-42. |
| 录入/更新时间Date |
12-03-20 |
| 备注Remarks |
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