| 中文名称Chinese name
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直肠途径SIVmac251恒河猴感染模型 |
| 编号Model number |
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| 英文名称English name |
rectal route SIVmac251 monkey infection model in Ganges RIver |
| 物种Species name |
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| 品系Strain name |
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| 人类疾病Human diseases |
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| 传染性Infectivity |
是 |
| 微生物Microorganism |
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| 类别Category |
感染性动物模型 |
| 造模因素Modeling factors |
SIV是猴获得性免疫缺陷综合征（Simian Immune Deficiency Syndrome，SAIDS）的主要致病病毒，为典型的C型病毒粒子，基因组长度大约为9.2kb，基因组成同HIV-1和HIV-2基本相同，其完整的原病毒基因含有二个LTR以及同HIV类似的基因：gag、pol、vif、tat、rev、env和nef。所有基因在SIV的排列顺序同HIV完全一样。目前国内外对SIV的研究多集中在非克隆株SIVmac251和克隆株SIVmac239上，因为这两个病毒株能在多种猕猴属动物身上引发致死性免疫缺陷综合征，同时伴有CD4+淋巴细胞下降，继发机会性感染病毒性脑膜脑病。这些都与人类AIDS类似。 |
| 制作方法Making method |
1、实验用病毒：感染毒株为SIVmac251中国恒河猴细胞适应株，中国恒河猴PBMCs滴定病毒原液TCID50滴度为5×104 TCID50/mL。
2、感染动物：选用体重4-6 kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。
3、感染方法：将麻醉好的实验猴放在操作台上，动物采取俯卧位以保证直肠粘膜充分暴露，缓慢将10000 TCID50的SIVmac251病毒液2mL注入肛窦处，实验猴保持此姿势30min。
4、SIVmac251直肠感染猴样品采集和指标测定：在感染前和感染后3、7、10、14、21、28、35、42、56、70、84天采集EDTA抗凝血4mL，分别测定血常规、血浆病毒载量、CD4+/CD8+、CD4+和CD8+细胞绝对数。
5、SIVmac251直肠感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA，使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。
6、SIVmac251直肠感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+和CD8+细胞绝对数。 |
| 生物学特征Biological characteristics |
1.恒河猴血浆病毒载量均转为阳性，即在感染后病毒载量持续升高；
2.感染猴CD4+/CD8+的比例在感染后出现持续下降，出现倒置现象。
3. 两只恒河猴CD4+细胞绝对数在SIVmac251感染后发生应激性增高，然后出现明显的大幅下降，随后又在短期内迅速反弹，并最终在40天前后达到相对稳定的状态。 |
| 医学用途Medical use |
艾滋病研究、药物或疫苗评价。 |
| 临床表现Clinical manifestation |
1、SIVmac251直肠感染恒河猴血浆病毒载量结果
直肠途径接种SIVmac251病毒后，恒河猴血浆病毒载量均转为阳性，即在感染后病毒载量持续升高，14天病毒载量达到高峰，约107copies/mL左右，一直到35天均处于106-107 copies/mL的较高水平，随后载量下降并维持在104-105 copies/mL这一水平。
图1 SIVmac251直肠途径感染恒河猴血浆病毒载量结果
Fig.1 The viremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaques infected intrarectally with SIVmac251
2、SIVmac251直肠感染恒河猴外周血CD4+/CD8+比值结果
感染猴CD4+/CD8+的比例在感染后出现持续下降，出现倒置现象。1006075和1007054分别于第14天、第21天将至最低点，数值分别为0.39和0.5。随后1007054的CD4+/CD8+的比例回升至1，此后一直在0.9上下波动；而1006075回升至1，后又降至0.5，此后一直维持在该水平。
图2 SIVmac251直肠途径感染恒河猴外周血CD4+/CD8+比值
Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytes in Chinese-original rhesus macaques infected intrarectally with SIVmac251
3、SIVmac251直肠感染恒河猴CD4+和CD8+细胞绝对数结果
两只恒河猴CD4+细胞绝对数在SIVmac251感染后发生应激性增高，然后出现明显的大幅下降，随后又在短期内迅速反弹，并最终在40天前后达到相对稳定的状态。外周血中CD8+细胞变化不尽相同，经过急性期的剧烈震荡后，1007054猴在感染28天后水平基本稳定，1006075猴在感染28天后CD8+T细胞数量持续升高。
图3 SIVmac251直肠途径感染恒河猴外周血CD4+ 和CD8+细胞绝对数变化
Fig.3 The CD4+ cell counts and CD8+ cell counts (per l blood) in Chinese-original rhesus macaques infecte intrarectally with SIVmac251 |
| 病理表现Pathology |
直肠途径接种SIVmac251病毒后，恒河猴血浆病毒载量均转为阳性，即在感染后病毒载量持续升高，14天病毒载量达到高峰，约107copies/mL左右，一直到35天均处于106-107 copies/mL的较高水平，随后载量下降并维持在104-105 copies/mL这一水平。 |
| 发病天数Days of onset |
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| 发病过程Pathogenesis process |
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| 临床诊断Clinical diagnosis |
恒河猴血浆病毒载量均转为阳性即可诊断。 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
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| 保藏单位Preservation unit |
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| 参考文献Reference |
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| 录入/更新时间Date |
12-03-20 |
| 备注Remarks |
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当前位置：
