| 中文名称Chinese name
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D5F173L转基因多巴胺小鼠模型。 |
| 编号Model number |
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| 英文名称English name |
D5F173L transgenic dopamine mouse model. |
| 物种Species name |
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| 品系Strain name |
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| 人类疾病Human diseases |
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| 传染性Infectivity |
否 |
| 微生物Microorganism |
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| 类别Category |
转基因 |
| 造模因素Modeling factors |
pcDNA-h-D5F173L表达载体人D5F173L质粒 |
| 制作方法Making method |
由美国乔治敦大学Pedro A. Jose博士惠赠的pcDNA-h-D5F173L表达载体人D5F173L质粒，转化入大肠杆菌JM109，摇菌扩增后测序，测序结果经Blast分析，显示得到的pcDNA-D5-F173L与Genebank 中序列对比得到目的突变位点正确。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到C57BL小鼠的受精卵中，用C57BL小鼠作假孕受体，制备转基因小鼠。转基因小鼠用碱裂解法提取基因组DNA。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。Western blot检测转基因小鼠肾组织中D5R的表达。 |
| 生物学特征Biological characteristics |
1. 特征性临床表现；
2. 转入基因表达；
3. 分子影像学分析结果。 |
| 医学用途Medical use |
心脏病研究 |
| 临床表现Clinical manifestation |
D5F173L转基因小鼠左室重量四至六月龄均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠，且随月龄增加差异显著性增加 |
| 病理表现Pathology |
2.4 收缩末期左室内径，左室前后壁及左室收缩功能相关性分析显示：
a)内径变化：四到六月龄D5F173L转基因小鼠收缩末期左室内径均明显低于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs. hD5WT, 阴性对照, n=6，t test)；
b)前壁变化：D5F173L转基因小鼠收缩末期左室前壁与hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠相比四月龄无显著性变化 (* P>0.05 vs. hD5WT, 阴性对照, n=6，t test)；五月龄及六月龄D5F173L转基因小鼠收缩末期左室前壁均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs. hD5WT, 阴性对照, n=6，t test)；
c)后壁变化：四到六月龄D5F173L转基因小鼠收缩末期左室后壁均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs. hD5WT, 阴性对照, n=6，t test)；
d) D5F173L转基因小鼠收缩末期左心室内体积与左心室内径随月龄的增加显著减小（P<0.05，n=6，t test），收缩末期左室前后壁厚度显著性增加（P<0.05，n=6，t test）；其余三组小鼠收缩末期左室内体积、左室内径及左室前后壁随月龄有变化趋势但无显著性差异（P>0.05，n=6，t test）。
2.5 左心室缩短分数分析显示： D5F173L转基因小鼠左心室缩短分数四至六月龄均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠，且随月龄增加差异显著性增加(* P<0.01 vs. D5WT, 阴性对照, n=6，t test) 。
图9 多巴胺D5突变基因F173L(D5F173L), S390G(D5S390G)及正常人D5基因(hD5WT)（对照）转基因小鼠左心室缩短分数的变化
A:各实验组小鼠四至六月龄间左室缩短分数比较。
B:同月龄内各实验组小鼠左心室缩短分数比较。
2.6 左心室重量分析：D5F173L转基因小鼠左室重量四至六月龄均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠，且随月龄增加差异显著性增加(* P<0.05 vs. D5WT, 阴性对照, n=6，t test)，
图10 多巴胺D5突变基因F173L(D5F173L), S390G(D5S390G)及正常人D5基因(hD5WT)（对照）转基因小鼠左室重量的变化
A:四组小鼠同月龄内左室重量比较。
B:四组小鼠四至六月龄间左室重量比较。
该结果表明血压升高过程中左室心肌细胞发生肥大，从而引起多巴胺D5突变基因F173L(D5F173L)转基因小鼠左心室的重构。
3. 肾组织病理切片HE染色及免疫组化结果显示：多巴胺D5突变基因F173L(D5F173L)转基因小鼠肾小球球囊间隙较正常人D5基因(hD5WT)（对照）转基因小鼠稍微变窄，肾小管上皮细胞内Na-K-ATP酶表达有所增加。
图11 多巴胺D5突变基因DF173L及正常人D5基因(hD5WT)转基因小鼠肾组织HE染色及Na-K-ATP酶免疫组化结果
A: 正常人hD5WT基因转基因小鼠肾组织HE染色。
B: 多巴胺D5突变基因DF173L转基因小鼠肾组织HE染色
C: 免疫组织化学检测Na-K-ATP酶在转正常人hD5WT基因小鼠肾组织中的表达
D: 免疫组织化学检测Na-K-ATP酶在转突变基因多巴胺D5F173L小鼠肾组织中的表达。 |
| 发病天数Days of onset |
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| 发病过程Pathogenesis process |
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| 临床诊断Clinical diagnosis |
1. 特征性临床表现；
2. 转入基因表达；
3. 分子影像学分析结果。 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
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| 保藏单位Preservation unit |
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| 参考文献Reference |
发表文章
1. 张艳荣，全雄志，董伟，张连峰，杨志伟。多巴胺D5受体转基因小鼠的建立。中国比较医学杂志，2008, 5（18）:54-658. |
| 录入/更新时间Date |
12-03-20 |
| 备注Remarks |
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