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| 文献名称Document name | 小鼠Lin28基因的克隆及原核表达 |
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| 编号Document number | |
| PMIDPMID number | |
| 作者Author | 宁方勇, 王春生, 张秋婷, 安星兰, 朴善花, 安铁洙 |
| 中文摘要Abstract in Chinese | 目的 探讨获取小鼠Lin28蛋白的方法.方法 提取8.5 d ICR小鼠胚胎mRNA后反转录为cDNA序列,用一对两端引入特定酶切位点(Nco Ⅰ及Xho Ⅰ)引物,从该cDNA中扩增出Lin28基因编码区序列；将获得的Lin28基因编码区序列克隆到pMD18-T载体上.对质粒双酶切回收其中Lin28基因片段,与pET-30a(+)载体相连接并转化Rosetta( DE3)型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,最后采用SDS-PAGE对表达结果进行分析.结果 对所克隆的Lin28蛋白编码区的DNA序列分析表明,Lin28 CDS区包括终止密码子在内为630 bp,与参照DNA( NM_145833)相比同源性为99.37％,与参照氨基酸序列相比同源性为100％；在IPTG诱导下pET-30a(+)-Lin28重组质粒可表达与预期相符的约为27.5×103的蛋白质.结论 利用克隆的小鼠Lin28基因,采用原核表达方法,成功获得小鼠Lin28蛋白,为进一步开展以重组蛋白诱导体细胞重编程研究奠定基础. |
| 英文摘要Abstract in English | |
| 关键词Key word | ICR小鼠, Lin28, 克隆, 原核表达 |
| 发表杂志Journal | 中国实验动物学报 |
| 发表年份Year | 2011 |
| 录入/更新时间Date | 2021.7.1 |
