有氧运动对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响及机制

目的 观察长期有氧运动对自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化的影响,并探讨调控胶原代谢的信号分子——转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和组织金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)在其中的作用机制.方法 30只雄性SHR随机分为安静对照(SHR-RC)组和有氧运动(SHR-AT)组,同时将15只Wistar-Kyoto大鼠作为正常血压对照(NC)组.NC组和SHR-RC组动物在鼠笼安静饲养,SHR-AT组进行24周跑台训练.实验结束后利用无创血压仪测定尾动脉血压,超声心动术检测心脏结构与功能,Masson染色获取心脏胶原容积分数(CVF),实时荧光定量PCR检测心钠素(ANP)、脑钠素(BNP)和β-肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA表达量,Western blotting检测TGF-β1、CTGF、MMP-2[包括总MMP-2(72 ku)和活化型MMP-2(64 ku)]、TIMP-2和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达量.结果 与NC组比较,SHR-RC组大鼠心腔扩张同时室壁变薄,心脏CVF增加,心功能下降,ANP、BNP和β-MHC mRNA以及TGF-β1、CTGF、TIMP-2和α-SMA蛋白表达量上调(P<0.05),活化型MMP-2蛋白表达量以及活化型MMP-2/TIMP-2比值下降(P<0.05);与SHR-RC组比较,SHR-AT组心脏扩张减轻,心脏CVF下降,心功能增强,ANP、BNP和β-MHC mRNA以及α-SMA蛋白表达量下调,活化型MMP-2蛋白表达量以及活化型MMP-2/TIMP-2比值增加(P<0.05),而TGF-β1、CTGF和TIMP-2蛋白表达量无明显变化(P>0.05).结论 长期规律有氧运动能够改善SHR心肌纤维化,并延缓心脏重塑和心力衰竭进程,其机制与胶原降解增加(但对胶原合成无影响)以及抑制成纤维细胞向成肌纤维细胞分化有关.

2020

2021/07/20

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TRIML1对肝癌细胞恶性生长的影响

目的:探讨TRIML1对肝癌细胞恶性生长的影响.方法:在HepG2肝癌细胞中筛选鉴定过表达TRIML1稳定株.利用CCK8法检测过表达TRIML1稳定株的生长增殖活性;软琼脂克隆形成实验分析过表达TRIML1稳定株的克隆形成能力.裸鼠成瘤实验分析过表达TRIML1稳定株的动物体内成瘤能力.使用炎症细胞因子TNF-α刺激过表达TRIML1稳定株和阴性对照8 h,收取细胞上清,ELISA检测IL-6分泌情况.在Huh7肝癌细胞中用小干扰RNA(siRNA)敲低TRIML1,spheres形成实验检测敲低TRIML1对Huh7生长状况的影响,并且收取上清检测IL-6的分泌.结果:成功筛选出过表达TRIML1的稳定株;过表达TRIML1稳定株细胞增殖活性明显高于对照组(P<0.01);过表达TRIML1稳定株的软琼脂集落数明显高于对照组(P<0.01);过表达TRIML1稳定株组的裸鼠瘤体体积和重量明显高于对照组(P<0.01);过表达TRIML1稳定株的IL-6本底水平的分泌和TNF-α诱导的分泌均高于对照组(P<0.01).TRIML1敲低后,Huh7细胞spheres形成能力显著下降,IL-6的分泌量也降低,反向验证上述效应.结论:TRIML1能明显促进肝癌细胞体内和体外的恶性增长,效应可能与IL-6的表达上升有关.

2020

2021/07/20

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肝衰竭修复替代治疗的现状与发展对策

背景:为解决肝移植的临床应用受供肝来源短缺限制的问题,世界各国科学家正在积极探索,相继研究发展了人工肝、组织工程肝脏、异种器官移植等技术手段以期解决缓解器官短缺的问题,从而对肝衰竭起到一个修复或替代的治疗作用.目的:阐述肝衰竭修复替代治疗的发展历程、研究现状和未来预期.方法:检索web of science、万方数据库2000至2019年发表的文献,检索关键词为“artificial liver,liver tissue engineering,hepatic failure,肝衰竭,肝移植”.结果 与结论:针对肝衰竭等晚期肝脏疾病,主要有原位肝移植、细胞移植、人工肝系统和组织工程肝脏等修复替代治疗手段.国内目前已有多家医院和机构自主研发了人工肝装置,尽管生物型人工肝和混合型人工肝在肝衰竭治疗上展现出很好的发展前景,但大多仍处于动物实验阶段,未来应加大生物反应器的研发力度,增强支架内的细胞活率.利用生物材料和种子细胞构建的组织工程肝脏可以在一定程度上模拟肝脏的合成、解毒、代谢和分泌等生理性功能,可经体内移植治疗终末期肝病,是组织功能领域的研究热点,而解决生物支架体内移植的凝血问题、促进支架的血管化形成是该领域的需要努力的方向.异种移植是解决人类器官供体严重短缺的最佳途径,但该技术距离临床应用依然还有很长的路要走.

2020

2021/07/20

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miR-26b-3p对乳腺癌细胞生物学行为的影响及作用机制研究

背景与目的:miRNA是一类长度为21～23个核苷酸的单链非编码RNA分子,其作用机制主要为靶向于mRNA的3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)从而抑制其靶基因的表达.miRNA在肿瘤的发生、发展过程中发挥着关键作用,探讨miR-26b-3p对乳腺癌生物学行为的影响及作用机制.方法:通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测miR-26b-3p在三种乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453中的表达,选取miR-26b-3p表达水平最低的乳腺癌细胞转染miR-26b-3p mimics后,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞的增殖,采用transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,通过小动物活体成像及裸鼠移植瘤模型检测miR-26b-3p对乳腺癌细胞裸鼠移植瘤生长和转移的影响,采用双荧光素酶报告基因分析检测miR-26b-3p与锌指E盒结合同源盒基因1(zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)的相互作用,采用RTFQ-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测ZEB1的表达.结果:乳腺癌细胞系MDA-MB-453中miR-26b-3p表达最低,在MDA-MB-453细胞中转染miR-26b-3p mimics后,miR-26b-3p的表达水平显著升高(P<0.05),细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),细胞的迁移(P<0.001)和侵袭能力(P<0.01)显著降低.过表达miR-26b-3p可抑制裸鼠体内乳腺癌移植瘤的生长和转移.miR-26b-3p可与ZEB1的3'UTR结合,抑制ZEB1的表达.结论:miR-26b-3p可靶向于ZEB1,抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制乳腺癌的生长和转移.

2020

2021/07/20

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睾酮治疗少弱精子症的疗效与作用机制的实验动物研究

2020

2021/07/20

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不同强度耐力运动干预下生长期大鼠骨细胞代谢水平的变化

背景:随着社会的发展和人们生活水平的提升,处于生长发育敏感期的青少年健康日益受到关注.运动可改善骨细胞代谢,但有关耐力运动对生长期大鼠骨细胞代谢水平影响方面的研究不多.目的:探讨不同强度耐力运动对生长期大鼠骨细胞代谢水平的影响.方法:实验方案经成都体育学院运动与健康学院动物伦理委员会批准.选择40只大鼠适应性训练1周后,随机分为对照组、低强度耐力运动组、中强度耐力运动组、高强度耐力运动组.对照组大鼠常规饲养,不进行训练干预.各运动实验组训练12周,每周训练5 d,每天训练60 min.每2周进行一次最大摄氧量测试,根据测试结果调整后2周的训练负荷.小、中、大强度耐力运动组主负荷期的运动强度为分别为50％,65％及80％最大摄氧量.运动训练实验后观察各组大鼠骨密度、骨结构、骨代谢的指标变化.结果与结论:①关于大鼠股骨骨密度、全身骨密度,运动实验后,小、中等强度耐力运动组与对照组相比均有改善(P<0.05);大强度耐力运动组优于小强度耐力运动组、对照组(P<0.01).小、中强度耐力运动组运动实验前、后相比差异有显著性意义(P<0.05);大强度耐力运动组运动实验前、后相比差异有非常显著性意义(P<0.01).②关于大鼠骨小梁面积,运动实验后,小强度耐力运动组、中强度耐力运动组与对照组相比均有改善(P<0.05);大强度耐力运动组显著优于对照组(P<0.01);大强度耐力运动组优于小、中强度耐力运动组(P<0.05).③关于大鼠股骨组织中骨钙素、碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶等指标,运动实验后,小、中强度耐力运动组与对照组相比均有改善(P<0.05);大强度耐力运动组显著优于对照组(P<0.01);大强度耐力运动组优于小、中强度耐力运动组(P<0.05).④关于大鼠血清中骨钙素、碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶等指标,运动实验后,小强度耐力运动组、中强度耐力运动组与对照组相比均有改善(P<0.05);大强度耐力运动组显著优于对照组(P<0.01);大强度耐力运动组优于小、中强度耐力运动组(P<0.05).⑤结果说明,不同耐力运动干预可不同程度地改善生长期大鼠骨密度、骨结构、骨组织、血清等指标,促进生长期大鼠骨生长,其中大强度耐力运动效果最佳.

2020

2021/07/20

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姜黄素通过抑制TGF-β/smad2信号通路抑制人肝星状细胞纤维化作用研究

目的:探讨姜黄素(Curcumin)对肝纤维化体内外的作用和机制.方法:以人肝星状细胞LX-2为研究目标,CCK-8检测正常条件和TGF-β激活状态下LX-2细胞增殖情况;qRT-PCR和Western blot检测姜黄素对LX-2细胞CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、p-smad2和p-65/NF-κB表达的影响;ELISA检测免疫炎性因子IL-10和IFN-γ的表达变化;CCl4诱导小鼠肝纤维化模型,100 mg/kg给药,检测小鼠给药前后血液中谷草转氨酶(AST)及谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)的水平变化;HE染色观察小鼠肝组织给药前后结构变化和损伤;马松染色观察小鼠肝组织给药前后纤维胶原表达的变化;Western blot检测小鼠肝组织给药前后α-SMA、p-smad2和p-65/NF-κB表达的影响;羟脯氨酸试剂盒检测小鼠肝组织给药前后羟脯氨酸含量的变化.结果:CCK-8实验结果显示10、15、20、25μmol/L姜黄素对LX-2均有抑制作用,且20μmol/L抑制作用最强(P<0.05);姜黄素显著抑制CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、p-smad2和p-65以及免疫炎性因子IL-10和IFN-γ的表达(P<0.05);动物实验结果显示姜黄素可以有效改善CCL4诱导的肝组织损伤和肝功能损伤(P<0.05),减少肝组织内胶原的沉积(P<0.05),抑制肝组织内p-smad2和p-65/NF-κB表达(P<0.05).结论:姜黄素通过抑制TGF-β/smad2信号通路从而抑制人肝星状细胞纤维化作用.

2020

2021/07/20

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缓释生长因子羧甲基壳聚糖支架抑菌功能的研究

目的 制备缓释生长因子的羧甲基壳聚糖支架(PRP/CMCS)并检测其抑菌功能.方法 利用冻干技术构建一种富含多种生长因子的PRP/CMCS,观察支架的结构,ELISA法检测生长因子负载率和缓释效果,并通过抑菌圈试验和糖尿病合并细菌小鼠创面模型验证其抑菌功能.结果 PRP/CMCS的孔径在20～125μm的范围内,孔隙率大于80％.血管内皮生长因子(VEGF)及血小板衍生生长因子(PDGF)第1天的负载率分别为35.7％和4.7％,体外缓释7 d累计释放量分别占总负载率的48.7％和14.6％.抑菌圈试验证明PRP/CMCS对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用;动物实验也证实了其抑菌效果及具有促进难愈创面愈合的功能.结论 PRP/CMCS具有稳定的抑菌功能,可作为一种高效可靠的抗感染促愈合材料.

2020

2021/07/20

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细胞衰老在老年骨质疏松症防治中的研究进展

越来越多的研究认为衰老是许多年龄相关疾病的最大危险因素,认为抑制衰老可延迟多种慢性病的出现或降低其严重程度,老年骨质疏松症常与这些衰老相关疾病共存.临床前研究和动物实验发现,随着衰老,骨微环境中的衰老细胞增加,衰老相关的促炎性分泌蛋白产生增多,导致骨吸收增加和骨形成减少.而消除衰老细胞或抑制促炎性分泌蛋白的产生可预防年龄相关的骨丢失.本文就细胞衰老对老年骨质疏松症的影响作分析总结,综述近年来研究进展,以期为老年骨质疏松症的研究与治疗提供参考.

2020

2021/07/20

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内皮祖细胞促进血管发生及新骨生成辅助治疗骨缺损

背景:骨折是临床常见的骨科疾病,虽然大多数骨折可以通过坚强内固定等手术治疗实现一期愈合,但仍有相当比例的骨折愈合不良,最终导致骨缺损,而骨缺损部位的血管新生对骨缺损的修复起到至关重要的作用.基于内皮祖细胞促进组织血管发生的能力,其对骨再生和修复的辅助作用逐渐成为学界关注的焦点.目的:综述骨缺损疾病中使用内皮祖细胞促进血管发生及新骨生成的研究进展.方法:遵循PRISMA指南,检索CNKI、万方数据库和PubMed数据库1986至2019年期间关于内皮祖细胞辅助治疗骨缺损的动物实验、临床试验及其机制的文章,检索词分别为"内皮祖细胞,血管生成,血管发生,治疗,骨缺损""endothelial progenitor cells(EPCs),angiogenesis,vasculogenesis,therapy/treatment,bone defect",最后选择58篇文章纳入结果分析.结果与结论:①骨缺损时可以促进内皮祖细胞的激活与归巢;②内皮祖细胞可以促进血管发生;③内皮祖细胞是通过促进血管发生进而促进骨再生的;④将内皮祖细胞辅助治疗骨缺损推广至临床应用目前尚存在一些问题有待解决;⑤需要通过进行更多的临床试验,并且进一步深入研究内皮祖细胞参与血管发生的确切机制,为将来的临床应用提供数据支持,给大量骨缺损致残患者带来更好的治疗.

2020

2021/07/20

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