SMA小鼠中相关剪接因子表达与SMN2外显子7列入比率关系研究

目的 研究SMN2外显子7在SMA小鼠不同组织的列入,筛选与其相关的剪接因子.方法 通过RT-PCR和非变性PAGE电泳分析在神经及非神经组织中SMN2外显子7列入比例,通过QPCR筛选分析剪接因子在大脑和脊髓与非神经组织中的mRNA水平.结果 SMN2外显子7在大脑和脊髓组织中列入比例显著高于非神经组织,QPCR筛选显示Nova1/2在大脑和脊髓中的表达显著高于大部分非神经组织.通过差异分析显示,Srsf7/9及Nova2在SMAⅠ型小鼠脊髓中的表达显著高于对照小鼠.结论 神经组织中,Srsf7/9和Nova1/2基因高表达与SMN2外显子7列入比例显著提高呈正相关,剪接因子SRSF7/9及NOVA1/2可能参与SMN2基因的剪接调控.

2020

2021/07/20

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氯喹抗冠状病毒的作用及其安全性研究进展

冠状病毒作为一种人畜共患病毒,可引起肺部感染,严重的会引起死亡甚至肆虐传播.2019年12月底陆续出现了新型冠状病毒——严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者.针对冠状病毒,目前并无特效药.氯喹作为一种经典抗疟药,可通过改变内吞体pH值、自噬反应以及改变病毒包膜的糖基化模式等途径发挥抗病毒效应.在细胞水平上,氯喹对SARS-CoV、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)和SARS-CoV-2均有抑制作用.近期临床研究初步表明,氯喹可以提高COVID-19患者成功救治率,改善预后.由于氯喹副作用较多,近些年已经较少用于临床,氯喹用于治疗COVID-19的安全性需要深入评估.本文结合氯喹的药理学特点,针对氯喹抗冠状病毒感染的作用及其安全性作一概述,以期为其临床合理应用提供参考.

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2021/07/20

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心脏不停跳大鼠单肺体外循环肺损伤模型的建立

目的 建立心脏不停跳大鼠单肺体外循环(CPB)肺损伤模型,为研究CPB肺损伤的发病机制及保护措施提供实验平台.方法 健康成年SD大鼠24只,随机分为单纯开胸组(T组)、单纯CPB组(C组)和缺血再灌注组(IR组),每组8只.T组仅开胸,C组开胸后建立CPB,IR组建立CPB期间行左肺缺血再灌注损伤.在CPB前(T1)、开放左肺门即刻(T2)及实验结束时(T3)行动脉血气分析,记录红细胞压积(Hct)、血乳酸(Lac)和肺功能的变化.实验结束时,检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;剪取左肺组织,观察左肺组织的病理变化.结果 CPB后Hct下降(P<0.05).与T组比较,实验结束时C组和IR组肺功能下降,Lac和肺损伤评分较T组高(P<0.05);上述变化在IR组中最为突出.IR组中血液和肺组织的IL-1β、TNF-α含量最多(P<0.05).结论 该自创实验动物模型建立成功,能模拟临床CPB肺损伤的病理生理变化,对CPB肺保护相关研究有着积极的推动作用.

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2021/07/20

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高分子绷带结合塑料杆建立的兔膝骨关节炎模型

背景:目前国内外有多种建立兔膝骨关节炎模型的方法,但大多模型建立中方法较为繁琐,原有的石膏制动方法存在部分缺陷.目的:探索采用高分子绷带结合塑料杆的方法建立兔膝骨关节炎模型.方法:选用雄性新西兰大白兔16只,随机分为模型组和对照组.模型组采用屈曲位高分子绷带固定制动的方法建立兔膝骨关节炎模型,对照组为正常组.模型组膝关节固定8周后去除高分子绷带,取2组兔滑膜、软骨及半月板进行苏木精-伊红染色组织病理学观察,并进行关节软骨Mankin评分.实验方案经新疆医科大学第一附属医院动物伦理委员会批准(批准号为IACUC-20170222026).结果 与结论:①光学显微镜下可见,模型组半月板软骨细胞及基质增多,部分软骨细胞体积增大,软骨陷窝清晰可见;滑膜组织少量慢性炎细胞浸润,胶原纤维增多,部分增粗伴玻璃样变性,部分滑膜组织呈绒毛-结节状增生;部分软骨面有轻微裂隙,软骨细胞及基质轻度增生,少部分软骨细胞及基质减少,胶原纤维排列紊乱.病理结果显示,具有典型的膝骨关节炎病理学改变;②模型组Mankin评分显著高于对照组(P＜0.05);③结果说明,采用高分子绷带结合塑料杆能成功建立兔膝骨关节炎模型,局部固定稳定性好,关节角度可控,并且定装置使膝关节完全暴露,局部透气性较好.

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2021/07/20

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白细胞介素-8在兔咽喉反流中的作用

目的 初步研究白细胞介素-8 (IL-8)在兔动物模型中的表达,并探讨其在咽喉反流发病中的作用.方法 将20只普通级新西兰兔随机分为实验组和对照组,每组各10只.实验组采用扩张食管上、下括约肌的制作咽喉反流动物模型,对照组为假操作组.建模完成后定期对动物进行24hpH监测和反流体征量表(RFS)评分,并取上呼吸道不同部位组织进行免疫组化染色检测IL-8的表达水平.结果 24 h pH监测结果显示实验组动物出现了明显的咽喉反流,与对照组相比,两组间Ryan指数阳性率差异具有统计学意义(P ＜0.001);实验组与对照组的RFS评分阳性率差异具有统计学意义(P=0.029).实验组与对照组在声带部位的组间IL-8免疫组化染色评分差异具有统计学意义(P=0.015),在咽鼓管、扁桃体、下鼻甲部位差异无统计学意义(P＞0.05).结论 咽喉反流可导致喉部IL-8的高表达,IL-8可能在咽喉反流的发生发展中起重要作用.

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2021/07/20

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免疫调控受体TIGIT在“怒”模型大鼠胸腺及外周血单个核细胞表达的意义

背景:既往研究表明,应激反应能引起机体免疫功能紊乱.免疫调控受体TIGIT能够抑制T细胞活性,促进T细胞凋亡及T细胞亚群分布失衡.应激反应的免疫反应机制是否与TIGIT的表达及作用相关,目前尚未明确.目的:探讨免疫调控受体TIGIT在“怒”模型大鼠胸腺细胞及外周血单个核细胞中的表达情况及TIGIT与免疫功能的相关意义.方法:将48只Wistar雄性大鼠随机分成空白组(正常大鼠)、模型7d、14d、21 d组,每组12只.除空白组外,其余各组以“社会隔离法”结合足底电击法进行“怒”模型大鼠复制.以旷场试验、攻击行为试验观察大鼠行为学变化,记录试验前后体质量变化及胸腺指数,应用免疫组织化学法观察各组大鼠胸腺及外周血单个核细胞中TIGIT阳性表达情况,流式细胞术测试外周血CD4+、CD8+T细胞亚群表达水平,并进行胸腺细胞及外周血单个核细胞上TIGIT表达与外周血CD4+T/CD8+T淋巴细胞比值的相关性分析.实验方案经江西中医药大学动物实验伦理委员会批准.结果 与结论:①模型14d组、21 d组大鼠旷场试验水平活动、垂直活动得分,修饰动作次数较空白组升高(P＜ 0.05,或P＜0.01);②模型7d组、14d组、21d组攻击行为试验的攻击隐藏时间较空白组明显缩短(P＜0.01),攻击次数和攻击累计时间明显增多(P＜0.01),体质量和胸腺指数明显下降(P＜ 0.05,或P＜0.01);③模型7d组、14d组胸腺及外周血单个核细胞中TIGIT表达较空白组明显升高(P＜0.01);④模型7d组、14d组大鼠外周血T细胞亚群CD4+/CD8+比值较空白组明显下降(P＜ 0.05,或P＜0.01);⑤大鼠外周血T细胞亚群CD4+/CD8+比值与胸腺T细胞上TIGIT表达呈负相关(r2=0.627 0,P＜0.00 01),与单个核细胞上TIGIT表达呈负相关(r2=0.624 4,P＜ 0.000 1);⑥结果提示,模型大鼠处于应激“怒”状态,动物行为学发生明显改变,应激大鼠出现胸腺萎缩及外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值水平异常,免疫功能出现紊乱,此现象可能与胸腺及外周血单个核细胞TIGIT表达水平相关,但其具体作用机制需进一步研究.

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2021/07/20

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高G环境下大鼠胫骨的力学性能

背景:随着中国航天事业的发展,飞行员面临承受高G力学环境,这种环境会对飞行员骨骼造成严重影响.而胫骨作为最容易发生骨折的骨骼之一,目前对极端力学环境下胫骨生物力学研究较少.目的:通过高G离心加载装置制作动物模型,探究不同高G力学环境对大鼠生长发育和胫骨力学性能的影响.方法:取解放军军事医学科学院实验动物中心提供的雄性Wistar大鼠,通过高G离心加载装置设置悬臂以不同的转速和加速度运行模拟高G环境,并制作动物模型.每周称量大鼠体质量.取大鼠左侧胫骨进行三点弯曲实验,计算胫骨挠度、弹性模量、极限载荷;右侧胫骨进行蠕变实验,在胫骨中段皮质骨表面施加恒定应力并保持3600 s,观察其蠕变应变变化.实验已由天津理工大学动物伦理委员会批准.结果与结论:高G环境会影响大鼠正常生长发育,抑制体质量增长并降低了大鼠胫骨的力学性能,使胫骨的极限挠度分别下降了8.1％,12.2％,37.8％,51.4％;极限载荷分别下降了16％,9％,25.2％,29％.说明极端高G环境会对大鼠产生严重的负面作用.

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2021/07/20

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刚地弓形虫VEG株速殖子感染宿主细胞最优接种比的曲线拟合分析

目的 探讨不同浓度梯度的刚地弓形虫速殖子体外感染对侵蚀宿主细胞能力的影响及二者之间的最优接种比.方法 依照耗材规格和建议上液量,将宿主Vero细胞依次铺入96孔、24孔、12孔、6孔细胞板和25T培养瓶后培养12 h;常规纯化和计数VEG株速殖子并倍比稀释出8个梯度,分别用来感染上述细胞,使首个感染量与宿主细胞铺入数相等;继续培养4d后全量收集培养物,经DNA提取和Real-time PCR定量检测,以7种回归模型对所得速殖子数的均值进行拟合分析(n=3),选出最佳函数类型并求极值,以此明确弓形虫感染与宿主细胞间的接种关系.结果 Real-time PCR定量结果显示,VEG株速殖子最初感染量及所用耗材培养规格对弓形虫侵蚀宿主细胞的能力均有影响,并且四次多项武函数为弓形虫感染宿主细胞4d时的最佳拟合曲线方程;经求导和求极值发现,同种耗材培养条件下,弓形虫VEG株速殖子感染数与宿主Vero细胞间存在最优接种比例关系.结论 96孔、24孔、12孔、6孔细胞板和25T培养瓶内弓形虫速殖子与宿主细胞间的接种比例依次为1/7.20、1/5.32、1/4.53、1/4.03和1/43.02.

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2021/07/20

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新生猪缺氧缺血性脑病扩散峰度成像的时间进程变化

目的 分析新生猪缺氧缺血性脑病扩散峰度成像(DKI)相关参数随时间变化规律,并与扩散张量成像(DTI)相关参数对比.材料与方法 选取出生3～5 d内的健康约克种猪20只,分为实验组15只和对照组5只.实验组结扎双侧颈总动脉后放入氧浓度为4％的乏氧箱内,乏氧30 min.对照组仅行分离双侧颈总动脉的假手术.实验组和对照组在模型建立后3、6、9、12、16、24 h分别进行DKI扫描,扫描完成后,实验组和对照组各选3只猪取脑行病理学检查.结果 实验组猪缺氧缺血发生后,病变处DKI相关参数平均扩散峰度(MK)、径向扩散峰度(Kr)、轴向扩散峰度(Ka)较对照组逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);DTI相关参数平均扩散系数(MD)、垂直扩散张量(Dr)、轴向扩散张量(Da)逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05).DKI相关参数值变化率大于DTI相关参数值变化率,且平行于轴突方向的变化率均大于垂直于轴突方向的变化率(Ka、Da、Kr及Dr的平均变化率分别为119.75％、55.54％、93.32％、50.51％).实验组病理结果显示神经元水肿,大量炎症细胞浸润,局部可见坏死.结论 与DTI相关参数相比,DKI能够更敏感地评价缺氧缺血性脑病脑组织微结构的变化.

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2021/07/20

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大小鼠模型命名方法与规则简介

近年来,随着生命科学以及生物医药工程技术的迅猛发展、基因编辑技术的突破,建立了越来越多的大小鼠模型动物,并广泛应用于基础研究中,如肿瘤学、传染病学、免疫等的研究.模型动物资源总量不断增加,模型动物命名不规范统一,给模型动物管理、国际交流和知识产权的保护带来一些困扰.本文以美国JAX实验室命名规则为基础,较详细的介绍了常见的模型动物(如大鼠、小鼠)的命名方法,并对不同类型模型的命名方法进行了举例说明,以期建立符合国际规范、便于国际交流的模型动物命名方法.

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2021/07/20

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