枸杞多糖干预膝骨关节炎模型兔关节软骨组织CD151和基质金属蛋白酶3的表达

背景:有研究表明枸杞多糖具有抗老化、保护神经、抗疲劳、控制血糖、抗氧化及抗肿瘤等作用,其对于膝关节的骨性关节炎可能具有一定的保护作用,但目前还鲜有学者报道,CD151和基质金属蛋白酶3是评价膝关节骨性关节炎常用的因子.目的:观察枸杞多糖对CD151和基质金属蛋白酶3在兔骨性关节炎中表达的影响.方法:健康6月龄大耳白兔64只随机分等为4组:空白组、模型组、枸杞多糖组及生理盐水组.除了空白组外,其他3组均采用Hulth法复制膝骨关节炎模型兔,枸杞多糖组及生理盐水组以常规剂量枸杞多糖及生理盐水灌胃饲养4周.造模后12周取各组患侧关节软骨组织,应用苏木精-伊红染色观察各组关节软骨形态学变化,应用免疫组织化学染色及Western blot法观察CD151和基质金属蛋白酶3在各组关节软骨中的表达水平及空间分布.实验于2014年1月经宁夏人民医院动物伦理委员会批准(批准号:2014-30817).结果 与结论:①免疫组织化学染色和Western blot检测显示,枸杞多糖组关节软骨组织中CD151和基质金属蛋白酶3吸光度值及蛋白表达均低于生理盐水组与模型组(P＜0.05);②上述结果证实,在骨性关节炎关节软骨组织中CD151和基质金属蛋白酶3表达增高,枸杞多糖可抑制骨性关节炎中CD151和基质金属蛋白酶3的高表达,从而减缓骨性关节炎的发生.

2020

2021/07/20

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数字减影血管造影技术在犬下肢动脉造影中的应用

背景:目前对下肢血管疾病的研究趋于热门,在以大型动物为研究平台的实验中,需要对动物下肢血管进行形态及密度的检测,以研究和验证干预措施的有效性,且这种检测方法需要较高的可行性及可重复性.目的:探讨数字减影血管造影技术应用于犬类动物模型下肢动脉造影中的可行性、影响因素及应用价值.方法:6只比格犬经麻醉后固定于工作床,于犬大腿上段股动脉搏动明显处,采用留置针进行经皮股动脉顺行穿刺,人工推注对比剂,采用数字减影血管造影步进技术采集造影图像,对图像效果及影响因素进行分析.结果与结论:①所有6只比格犬双后肢最终动脉造影图像显示清晰,能分辨细小血管分支,无伪影;②其中第1只犬在初次造影时因对比剂刺激导致肢体抖动,图像效果欠佳,经固定肢体及稀释对比剂后再次造影得到了清晰图像;③提示采用数字减影血管造影技术进行犬类动物模型动脉造影可以清晰显示血管形态及密度,操作简单、重复性好,对模拟肢体缺血的动物模型研究具有重要意义.

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2021/07/20

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电镜技术在骨质疏松研究中的应用

骨质疏松症是一种以骨量减低、骨微结构破坏为主的隐匿性疾病,已成为严重影响中老年人群健康的慢病之一.电子显微镜(electron microscopy,EM)以其高精密度优势逐渐应用于医学科研及临床诊断.本文对近年来电镜技术在骨质疏松科研领域的应用与进展进行综述,介绍EM技术在骨质疏松研究领域中的应用,包括动物模型、细胞模型、临床研究、生物材料研究以及免疫电镜的应用.展望EM技术在骨质疏松研究领域的应用拓展及普及.

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2021/07/20

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神经营养因子-3基因修饰的骨髓间充质干细胞和水凝胶联合应用对脊髓损伤模型大鼠的治疗作用研究

目的 研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)、神经营养因子-3(neurotrophic factor-3,NT-3)、水凝胶(hydrogels)对脊髓损伤的联合治疗作用.方法 首先,培养大鼠BMSC基因修饰,使其过表达NT-3,制作水凝胶并搭载细胞.然后,建立大鼠急性不完全性脊髓损伤模型并植入相应治疗.最后,术后通过运动行为学(Basso Beatlie Bresnahan,BBB评分)和病理学检测其对脊髓损伤的治疗作用.结果 各个联合治疗组大鼠BBB评分均有不同程度增加,BMSC+NT-3+hydrogels组治疗作用最为明显.免疫组织化学检测显示各个联合治疗组神经元、神经纤维数目均有不同程度增加,星形胶质细胞数目较少.治疗组中,BMSC+NT-3+hydrogels组大鼠神经元、神经纤维数目最多,星形胶质细胞数目最少.所有结果组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 细胞(BMSC)、因子(NT-3)和支架(hydrogels)在治疗脊髓损伤中相互促进,联合移植于急性不完全性脊髓损伤模型大鼠,可提升模型大鼠后肢运用行为能力;促进损伤后神经元和神经纤维再生与修复并抑制损伤节段胶质瘢痕形成.本研究提示,制备更完美、可注射的细胞+因子+支架的复合材料,可对脊髓损伤神经修复再生的治疗提供新的思路.

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2021/07/20

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改良型富血小板纤维蛋白膜包裹颗粒软骨移植的长期组织学改变

背景:已有学者研究并制备了改良型富血小板纤维蛋白,并通过动物实验证实了改良型富血小板纤维蛋白可以促进自体软硬组织的再生与修复.目的:制备改良型富血小板纤维蛋白膜,观察改良型富血小板纤维蛋白膜及自体筋膜包裹颗粒软骨移植术后移植物的组织学改变.方法:新西兰雄兔12只,均进行以下相同手术流程:制备改良型富血小板纤维蛋白膜,取兔左耳软骨组织及右后肢自体筋膜组织,制备成3种移植物:颗粒软骨;自体筋膜包裹颗粒软骨;改良型富血小板纤维蛋白膜包裹颗粒软骨.将移植物分别回植于兔背部皮下,术后4个月取出移植物,进行一般形态观察和组织病理学检测.结果 与结论:①自体筋膜和改良型富血小板纤维蛋白膜包裹颗粒软骨移植物厚度较颗粒软骨移植物厚,移植物外形较圆润,表面较平整;②改良型富血小板纤维蛋白膜包裹颗粒软骨移植物软骨细胞存活率和再生潜力明显优于另外2种移植物(P＜0.05);其他组织学参数各组之间无显著差异;③结果说明:改良型富血小板纤维蛋白膜包裹颗粒软骨移植能够提高颗粒软骨存活率和移植物塑形效果,减少移植后软骨再吸收.

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2021/07/20

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巴马小型猪心脏移植模型及供心保护策略

目的 总结和探讨本中心建立巴马小型猪心脏移植模型的经验及供心保护策略.方法 选用25～35 kg的广西巴马小型猪各11头,分别作为供、受体.供体全麻下取胸部正中切口,主动脉根部4℃St.Thomas液灌停心脏,心脏离体后予UW液再次灌注并保存.受体采取全麻下正中切口,常规建立体外循环,采用双线对点交叉缝合的方式进行心房及大血管吻合.结果 有8头移植心脏成功复跳,3头开放后出现室颤未能恢复自主心率,最初5头吻合口有活动性出血.结论 巴马小型猪解剖结构有其特殊性,其心脏移植模型成功建立的关键在于合适的手术方式、合理的围手术期处理和恰当的心脏保存及心肌保护,本实验可为心脏移植的进一步基础和临床研究提供经验积累.

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2021/07/20

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被动训练促进失神经肌萎缩模型大鼠骨骼肌结构和功能的恢复

背景:炎症细胞或炎性因子参与失神经损伤后骨骼肌肌卫星细胞的增殖和分化,在失神经骨骼肌肌组织病理过程中起着重要的作用.目的:研究被动康复训练对失神经萎缩大鼠骨骼肌结构、功能以及肌动蛋白和炎症因子表达的影响.方法:将30只SD大鼠平均分为假手术组、模型组和训练组,模型组及训练组大鼠暴露坐骨神经并剪断,假手术组只暴露而不剪断坐骨神经.造模后2个月始用自制滚筒对训练组大鼠进行被动康复训练2个月,用肌肉湿质量比和BBB评分评估肌肉萎缩的程度及运动功能,苏木精-伊红染色观察肌纤维微细结构及横截面积,免疫组化染色检测各组腓肠肌肌动蛋白及肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及白细胞介素1β表达.实验经沈阳医学院实验动物福利伦理委员会的审批,批准文号为SYYXY2015010601.结果与结论:①训练组BBB评分高于模型组;②训练组腓肠肌湿质量高于模型组但肌纤维的横截面积却低于模型组(P<0.001,P<0.05),训练组腓肠肌肌动蛋白表达高于模型组(P<0.001);③训练组炎症因子肿瘤坏死因子 α、白细胞介素6及白细胞介素1β 的表达水平低于模型组(P<0.001或P<0.05);④结果说明,被动训练有助于失神经萎缩肌肉结构和功能的恢复,降低炎症因子的水平防止肌肉的进一步萎缩,提高骨骼肌的肌力.

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2021/07/20

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急性缺血性卒中后基质金属蛋白酶-9活性的MRI/NIRF双功能显像

目的 MRI/近红外荧光成像(NIRF)利用分子影像探针,于活体无创地评价缺血性脑卒中(AIS)的动脉粥样硬化斑块特征.本研究探讨AIS后MMP-9活性的MRI/NIRF双功能显像特点.材料与方法15只ApoE-/-小鼠按高脂饮食(0.5％胆酸钠、10％脂肪、2％胆固醇)喂养20周,建立缺血性卒中动物模型.随机选取其中5只按体重经尾静脉注入抗MMP-9抗体NIR797 1 mg/kg(实验组);随机选取5只注射非特异性IgG-NIR 797 1 mg/kg(对照组);剩余5只ApoE-/-小鼠注射磷酸盐缓冲液1 mg/kg(空白组).所有注射剂量均同实验组.24 h后对所有实验小鼠行MRI/NIRF双功能显像.显像完毕后进行颈动脉斑块内MMP-9免疫荧光分布检测与常规病理染色;采用Western blot检测小鼠脑组织MMP-9的表达.结果 所有小鼠缺血性卒中模型建立2h时即可检测到MMP-9表达,模型建立24 h时达到高峰.所有小鼠注入荧光探针后均存活良好,实验组与对照组注射24 h后小鼠颅脑见强荧光信号,主要聚集于斑块好发部位;实验组、对照组与空白组信噪比分别为456.39±24.19、19.48±3.19和4.19±0.89,差异有统计学意义(P＜0.05).实验组小鼠颈动脉NIRF阳性面积与脂肪阳性面积呈线性相关(r=0.738,P＜0.05);免疫荧光检测斑块内MMP-9的表达与巨噬细胞的分布一致,荧光信号主要聚集于斑块纤维帽.HE染色也证实颈动脉粥样斑块形成.结论 AIS后MMP-9活性的MRI/NIRF双功能显像可作为颈动脉斑块危险分层与诊断的新方法,对评估急性期缺血性卒中病情程度具有一定的价值.

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2021/07/20

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揿针联合中医五行音乐改善晚期肿瘤相关抑郁状态随机对照临床研究

目的 观察揿针联合中医五行音乐改善晚期肿瘤相关抑郁状态临床疗效.方法 针对肝郁气滞型抑郁,将综合焦虑/抑郁情绪测定表评分大于7分且小于15分的70例肿瘤患者,按照1∶1比例随机分配到干预组(35例)和对照组(35例),干预组采用揿针联合中医五行音乐干预,对照组单纯聆听中医五行音乐,为期4周,观察治疗前后综合医院焦虑/抑郁(HADS)情绪测定表评分变化.结果 各组组内比较,无论试验组还是对照组,治疗前后各组组内不同疗程HADA中的抑郁水平差异有统计学意义(P＜0.05);两组组间比较,试验组对HADA中的焦虑变化差异有统计学意义(P＜0.05).结论 揿针联合中医五行音乐疗法能够很好的改善晚期肿瘤患者的抑郁状态,为中医各型抑郁非药物干预研究奠定基础.

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2021/07/20

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丙泊酚对转化生长因子-β1诱导肝星状细胞激活的影响及其机制

目的:观察丙泊酚对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞系HSC2-T6细胞激活的影响并探讨其可能的作用机制.方法:实验分为对照组、TGF-β1组、丙泊酚组、TGF-β1+丙泊酚组、雷帕霉素组、TGF-β1+丙泊酚+雷帕霉素组.先用含雷帕霉素(5μmol/L)DMEM培养液培养1 h,用丙泊酚(100μmol/L)处理1 h,然后再加入TGF-β1(5 ng/ml)继续共同培养24 h.细胞的增殖水平通过MTT法测量,细胞培养液上清中透明质酸(HA)、IV型胶原(IV-C)和层粘连蛋白(LN)的浓度采用ELISA法测量,细胞的超微结构采用透射电镜观测,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)及自噬相关基因Beclin 1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和p62的表达通过Western blot测量.结果:与对照组比较,TGF-β1组细胞增殖、α-SMA蛋白的表达、培养液上清中HA、IV-C和LN的浓度、自噬体数量、Beclin-1和LC3-Ⅱ的蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著性增加(P均<0.05),p-mTOR蛋白的表达和p-mTOR/mTOR比值及p62的蛋白表达显著性降低(P均<0.05).与TGF-β1组比较,丙泊酚+TGF-β1组细胞增殖、α-SMA蛋白的表达、培养液上清中HA、IV-C和LN的浓度、自噬体数量、Beclin-1和LC3-Ⅱ的蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均显著性降低(P均<0.05),p-mTOR蛋白表达和p-mTOR/TOR比值及p62的蛋白表达均显著性增加(P均<0.05).mTOR抑制剂雷帕霉素部分逆转丙泊酚的作用.结论:丙泊酚抑制TGFβ1诱导的肝星状细胞激活,其机制涉及mTOR-自噬途径.

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2021/07/20

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