柯萨奇病毒A组16型的研究进展

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A group 16 strain,CA16)感染在中国很常见,CA16在流行过程中不断发生变异,其致病性与肠道病毒71型有明显差异.CA16可诱导产生多种微小核糖核酸,影响炎性信号通路的传导,导致病理损害的发生.目前已成功建立了小鼠、树鼩、猕猴CA16感染模型,可用于评估抗CA16药物和疫苗效果.检测方面,多重实时逆转录聚合酶链反应可针对手足口病进行高灵敏度检测和快速分型,胶体金免疫层析法可用于现场的快速诊断.多种单价、多价的CA16疫苗在动物实验中诱导出有效的免疫.

2020

2021/07/20

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猪枪弹伤模型创伤失血休克后1 h内凝血功能变化分析

目的 探讨创伤失血性休克后1 h内凝血系统的阶段性变化情况及相关因素,为创伤性凝血病的临床时效救治提供理论依据.方法 成年健康长白猪麻醉后建立枪弹伤失血性休克模型,分别于射击前15 min、休克点及休克后10 min、30 min、1 h记录血流动力学指标,检测动脉血气指标、常规凝血指标及血栓弹力图指标,并测定出血量.结果 最终16只长白猪纳入实验,总出血量为(1444.22±205.50)ml,1 h存活率为68.75％(11/16).实验动物血流动力学及动脉血气指标均呈阶段性变化.常规凝血指标分析显示,R值、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)呈阶段性下降,MA值在伤后至休克后10 min明显下降(P<0.05),LY30在休克后10 min至休克后1 h明显下降(P=0.038).Pearson相关性分析显示,APTT值与心率、舒张压(DBP)、收缩压(SBP)、平均动脉压(MAP)明显相关(P<0.05);R值与心率、每搏量指数(SVI)、SBP、MAP明显相关(P<0.05);MA值与碱剩余(BE)值、乳酸(LAC)值、K+浓度、pH值、Ca2+浓度、SVI明显相关(P<0.05).结论 在创伤失血性休克后1 h内,凝血系统处于高凝状态但血栓强度下降,且与血流动力学指标及血气指标明显相关;从休克后10 min开始,纤溶系统受到抑制并出现纤溶关闭状态,可能进一步加重高凝状态.

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2021/07/20

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肉苁蓉多糖通过S hh通路缓解EA E小鼠的临床症状

目的 探讨音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)通路在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental auto-immune encephalomyelitis,EAE)小鼠发病过程中的作用,及肉苁蓉多糖(cistanche deserticola polysaccharide,CDPS)能否通过该通路缓解EAE小鼠临床症状.方法 给予C57BL/6小鼠皮下注射髓鞘少突细胞糖蛋白35-55多肽(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG35-55)抗原制备EAE动物模型.将60只小鼠随机分为正常对照组、EAE模型组、CDPS治疗组以及CDPS+Smo受体阻断剂环王巴明(cyc)治疗组(以下简称CDPS+cyc治疗组)4组,每组各15只.观察各组小鼠免疫注射后0～26 d的临床症状评分,采用勒克斯光蓝染色(Luxol Fast Blue,LFB)检测各组小鼠脊髓组织内髓鞘脱失情况,Western blot法检测脊髓组织内Shh、碎片蛋白-1(Patched-1,Ptc-1)蛋白表达,采用RT-PCR检测脊髓组织内平滑蛋白(Smoothened,Smo)mRNA、神经胶质瘤相关癌基因1(Glioma-associated oncogene-1,Gli1)mRNA表达.结果 自CDPS治疗第9天开始,CDPS治疗组小鼠临床症状评分低于EAE模型组(P<0.05),而CDPS+cyc治疗组临床症状评分高于CDPS组(P<0.05).CDPS治疗组小鼠脊髓LFB评分较EAE模型组降低(t=9.64,P<0.01),而CDPS+cyc治疗组其LFB评分与EAE模型组比较差异无统计学意义(P>0.05).EAE模型组小鼠脊髓组织内Shh、Ptc-1蛋白以及Smo mRNA、Gli1 mRNA表达水平较正常组升高(均P<0.01),经CDPS治疗后,上述因子表达进一步升高(均P<0.01),而经cyc干预后,上述因子表达较CDPS治疗组降低(均P<0.01).结论 CDPS对EAE小鼠临床症状有改善作用,其作用途径可能与Shh信号通路有关.

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4种方法制备小鼠乳腺癌移植瘤模型的比较研究

目的:比较4种方法制备的小鼠乳腺癌移植瘤模型肿瘤进展与转归情况.方法:雌性BALB/c小鼠,随机分为5组,分别为①空白对照组(n=10).②皮下接种组(n=10).③乳垫接种组(n=12).④尾静脉接种组(n=10).⑤心内接种组(n=10).根据分组情况将小鼠乳腺癌4T1-Luc细胞接种于小鼠相应部位,动态观察小鼠一般状态,瘤体积;小动物活体成像系统分别于造模后1,2,3和4周对模型小鼠肿瘤生长情况进行动态分析;记录小鼠死亡时间.结果:2,4和5组成模率100％,3组成模率为83.3％;接种后2周5组小鼠体重低于1组,与1组比较差异具有统计学意义;3组各小鼠瘤体积大小差异较2组小;活体成像动态监测显示,皮下接种组肿瘤局限于接种部位,无转移,乳垫接种组,随着时间延长,除接种部位瘤组织增大外,出现肺部转移;尾静脉接种组,瘤细胞主要集中于肺部,心内接种组瘤细胞呈现全身播散;2,3,4和5组中位生存期分别为41.5,52,17和11.5 d.结论:小鼠乳垫接种制备的移植瘤模型,操作简便,与临床病理过程相近,适合乳腺癌的基础与药理研究;尾静脉接种适合进行乳腺癌肺转移的研究;皮下接种与临床病理过程存在差异,不适合进行乳腺癌的深入研究;心内注射因疾病进展迅速,不适合进行药效学评价.

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2021/07/20

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蛇床子提取物蛇床子素防治原发性骨质疏松症的研究概况

骨质疏松症是常见的全身代谢性骨骼疾病,随着社会老龄化问题日渐突出,其发病率日渐上升,已成为我国第3大慢性疾病.近年来关于中医药防治骨质疏松症研究不断深入,发现蛇床子提取物蛇床子素具有明显的抗骨质疏松作用,能够有效地改善成骨细胞及破骨细胞的代谢水平,改善骨结构.本文总结蛇床子素在细胞、动物实验中对骨代谢的影响及相关作用信号通路研究进展,同时对含有蛇床子的中药复方进行总结,概述目前研究现状及不足,旨在为该药材深入研究及开发为新的靶向治疗药物提供借鉴.

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大脑皮质类器官培养及其在中枢神经系统疾病中的应用

背景:大脑组织是人体发育最复杂的结构,许多人类大脑疾病难以在动物体内重现,因此建立大脑发育的体外模型具有非常重要的研究价值.最近几年随着干细胞领域的飞速发展,出现了一种人工组织培养技术,即通过体外三维培养的方式,将干细胞从单个细胞生成一种复杂的、类似活体组织的结构,这种结构称为类器官.目的:文章从大脑类器官的培养现状、发生机制、组织学特征及在神经系统疾病中的应用等多个方面综述了近年来大脑类器官的研究进展,并分析了目前大脑类器官的研究缺陷,旨在为相关领域的研究提供参考.方法:由第一作者检索1998年1月至2019年6月中国知网、万方、PubMed数据库相关文献,检索词为"类器官、大脑类器官、胚胎干细胞、诱导性多能干细胞、神经发生、大脑皮质、发育、神经退行性疾病""organoids,cerebral organoids,embryonic stem cel s,induced pluripotent stem cel s,neurogenesis,cerebral cortex,development,neurological diseases,self-organization",纳入45篇文献进行综述.结果与结论:利用多能干细胞自我重组的特性及添加神经诱导因子的方法,在体外可以有效产生大脑皮质类器官.作为一种全新的生物培养技术,大脑类器官在研究活体组织的发育、疾病形成的机制、组织替代疗法以及药物实验等方面都有很大的研究和应用价值.

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人甲壳质酶蛋白40通过PI3K/Akt信号通路调控膝骨性关节炎兔软骨细胞的凋亡

背景:由于PI3K/Akt信号通路与骨组织生理代谢之间存在着密切的联系,而人甲壳质酶蛋白40(YKL-40)对乳腺癌发病机制中的PI3K/Akt信号通路具有一定调控作用,由此推测YKL-40可能通过PI3K/Akt信号通路对膝骨性关节炎软骨细胞凋亡进行调控.目的:研究YKL-40通过PI3K/Akt信号通路调控膝骨性关节炎兔软骨细胞凋亡的作用机制.方法:①将新西兰大白兔随机分为2组,膝骨性关节炎模型组采用前交叉韧带离断术制作右后膝骨性关节炎动物模型,正常对照组仅切开右后膝关节囊,造模后第6周取材并分离软骨细胞,予以软骨组织苏木精-伊红染色及Mankin组织学评分,同时免疫组化染色检测软骨细胞Ⅱ型胶原表达;②正常对照组兔第2代软骨细胞为正常对照组;将膝骨性关节炎模型组兔第2代软骨细胞分为4组,模型组仅予以含体积分数10％胎牛血清的高糖DMEM培养基培养,模型+YKL组培养基中加入100μg/L YKL-40干预,模型+LY组培养基中加入50μmol/L PI3K通路抑制剂LY294002干预,模型+YKL+LY组:培养基中加入100μg/L YKL-40和50μmol/L LY294002干预,采用免疫印迹法检测各组软骨细胞Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶13、Akt、p-Akt、P53、Bcl-2蛋白表达水平.结果与结论:①经软骨组织苏木精-伊红染色、Mankin组织学评分及软骨细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色证实,膝骨性关节炎动物模型构建和软骨细胞培养均获得成功;②模型组Ⅱ型胶原、Bcl-2、p-Akt蛋白表达明显低于正常对照组(P<0.05),基质金属蛋白酶13、P53蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.05);与模型组比较,模型+YKL组上述指标得到明显改善(P<0.05),而模型+LY组上述指标则进一步恶化(P<0.05),模型+YKL+LY组上述指标与模型组比较无显著性差异(P>0.05),但与模型+YKL组和模型+LY组比较有显著性差异(P<0.05);各组Akt蛋白表达水平比较无显著性差异(P>0.05).提示:YKL-40可通过激活活化PI3K/Akt信号通路,起到抑制兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡,加快软骨损伤修复和延缓软骨退行性改变的作用,可作为临床治疗膝骨性关节炎的新作用靶点.

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2021/07/20

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鼠心房颤动模型现状及小鼠转录调控心房颤动模型的运用

目前小动物心房颤动(简称房颤)模型主要以心房快速起搏、药物诱导以及基因修饰为主要方式.鼠具有体积小、妊娠期短、成熟快等优势,是房颤模型的潜在实验动物.在基因表达过程中,转录调控可以直接干预蛋白合成表达,而成为近年来构建基因修饰模型的关键步骤.通过基因工程技术,针对转录调控过程中环磷酸腺苷(cAMP)反应元件调节器、微小核糖核酸(miRNAs)、Jun二聚蛋白2(JDP2)、核孔蛋白155(NUP155)、转录相关增强因子-1(RTEF-1)等环节构建小鼠房颤模型具有应用前景.

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细粒棘球蚴线粒体nad1基因的克隆与序列分析

目的 为完善细粒棘球蚴(Echinococcus granulasus)的分子分类学体系,提供更优化的种间和种内遗传标记基因.方法 在内蒙古地区采集患羊肝脏细粒棘球蚴和肝包虫病患者棘球蚴.采用提取虫体DNA的方法,扩增线粒体NADH脱氢酶1(nad1)基因并进行测序,运用DNAstar5.0软件构建系统发育树并采用MEGA4.0软件进行自居检验.结果 细粒棘球蚴DNA扩增出的羊株、人株nad1基因序列片段长度为895 bp.羊株、人株细粒棘球蚴nad1序列与加拿大棘球绦虫的同源性最高,相似性为86.5％;羊株、人株细粒棘球蚴nad1序列与加拿大棘球绦虫位于同一分支,自展值(Boostrap)最高,为100％.羊株、人株细粒棘球蚴nad1序列所属分支与裂头目、裂头科Diplogonoporus balaenopterae所属分支相隔最远.结论 had1基因有较高保守性,同时也存在种间差异,可广泛应用于研究细粒棘球绦虫的种间和种内遗传变异.

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膝关节退行性骨关节炎动物模型研究进展

骨关节炎(OA)是当今世界上最常见的关节炎之一[1],由于对人类OA的直接研究存在很大的困难,因此动物实验是探讨OA发病机制、药物治疗效果等一系列骨关节炎研究的重要途径之一[2].研究OA动物模型的目的是为了临床上更好地控制OA,建立与人类关节炎一致的OA模型对治疗OA具有重要的意义,理想的OA动物模型应该在关节大小、结构、软骨损伤的产生和发病进展等方面与人类相似.目前OA造模的主要方法包括非手术方式和手术方式,非手术方式包括药物注射、关节固定术、关节冲击等[3].手术方法是通过各种手段导致关节不稳或者力线改变诱导OA[4],主要包括半月板部分或全部切除、内侧或外侧副韧带剥离、前交叉韧带或后交叉韧带(ACL或PCL)横切、内翻和外翻截骨、肌切除术、髌骨切除术等[5].

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