基于网络药理学的栀子-川芎药对抗抑郁实验研究

目的 基于网络药理学研究栀子-川芎药对抗抑郁物质基础及作用机制,并使用ICR(Institute of Cancer Research)小鼠进行栀子-川芎药对抗抑郁物质基础的初步测试.方法 通过 web of science,CNKI,sciencedirect等数据库,收集栀子-川芎药对治疗抑郁症的活性成分并根据类药性原则进行筛选.使用Swiss Target Prediction database及GeneCards进行栀子-川芎药对抗抑郁作用靶点预测及筛选.通过String数据库对筛选出的靶点进行蛋白相互作用分析,并采用cluego软件对关键抗抑郁作用靶点进行信号通路的富集分析.在此基础上构建栀子-川芎药对抗抑郁活性成分-作用靶点-信号通路网络,并通过Cytoscape 3.7.0软件对其进行拓扑分析.根据分析结果 ,对栀子-川芎抗抑郁靶标网络中筛选出的排名前四位的化合物进行 ICR小鼠抗抑郁活性初步测试.结果 基于Cytoscape 3.7.0软件的分析结果 ,发现栀子-川芎药对抗抑郁的活性成分主要为4-methoxyl-phenethyl-butyl ether,jasminoside J,Gardenal-I和丁基苯酞,主要作用靶点为COMT、HTR1A、DRD2、SLC6A4、SLC6A3、MAOA、GRM5、DRD4、DRD3、HTR2A、HTR3A、GRIA1、APP、HTR1B 和 GRM1 等,主要信号通路为 Serotonergic synapse 和Dopaminergic synapse.动物实验表明,与空白组相比,阳性对照组、丁基苯酞及Gardenal-I中、高剂量组均能显著性减少不动时间,4-methoxyl-phenethyl-butyl ether高剂量组能减少不动时间,进一步验证了丁基苯酞、Gardenal-I,4-methoxyl-phenethyl-butyl ether具有一定的抗抑郁活性,而jasminoside J组未能明显减少不动时间,显示无抗抑郁活性.结论 基于网络药理学预测及动物实验初步验证,栀子-川芎药对抗抑郁的物质基础为丁基苯酞、Gardenal-I,4-methoxyl-phenethyl-butyl ether,此实验为进一步研究栀子-川芎药对抗抑郁的作用机制和筛选抗抑郁新药奠定基础.

2020

2021/07/20

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非洲猪瘟实验室检测方法综述

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染家猪和野猪(如欧亚野猪)引起的一种急性、热性、烈性传染病.该病致死率高达100％.一旦暴发,往往给受灾国家和地区养猪业造成不可估量的损失和影响.世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病,我国将其列为一类动物疫病.自1921年首次报道以来,非洲猪瘟从非洲传播至欧洲、南美洲、亚洲等的多个国家.近一年来,非洲猪瘟病毒传播速度明显加快,呈现愈演愈烈之势.据OIE通报数据显示,2019年1-12月期间,曾暴发或者正在暴发非洲猪瘟疫情的国家有28个,包含欧洲国家13个、亚洲国家12个和非洲国家3个,其中亚洲几个国家的疫情尤为严重.由于至今依然缺乏公认安全有效的疫苗和药物用于预防、控制和治疗非洲猪瘟,早发现、早诊断、早处置、提高生物安全管理水平是目前非洲猪瘟防控的主要措施.其中,准确、可靠的实验室检测方法,对于非洲猪瘟的防控至关重要.

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2021/07/20

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动态工况下SP F级实验兔饲养微环境模拟分析

目的 本研究对SPF级实验动物房动态工况下的大环境与饲养微环境参数的展开对比分析,以探讨饲养微环境对实验动物的影响.方法 建立实验兔等温体表生物传热模型与托盘散湿散氨模型,通过CFD模拟对比分析静态与动态工况下实验动物房的大环境与饲养微环境.结果 加入实验兔之后的实验动物房大环境变化不明显,而笼架处及微环境内的气流流动更加混乱,导致传热传湿及污染物的排出受到影响,部分微环境参数值可能超过标准.结论 得到了静态及动态工况下环境因素的变化情况,控制饲养微环境状态更能保证实验动物的福利及质量.

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2021/07/20

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骨关节炎动物模型的概述

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的关节退行性疾病,患者易致残,严重危害个体健康和社会公共卫生.临床上人类OA的致病原因复杂多样,且缺乏有效的根治疗法.OA的致病机理、防治策略以及药物筛选等相关科学研究依赖于OA动物模型的构建.目前OA动物模型的造模方法主要分为自发性造模、诱发性造模、转基因造模三类.近年来,越来越多的转基因OA模型被用于OA的相关研究中.本文就OA动物模型进行概述,重点对已报道的转基因OA动物模型进行详细讨论,从而为探讨构建更为理想的转基因OA动物模型及OA相关研究提供线索及思路.

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2021/07/20

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卵清蛋白(OVA)致敏联合烟熏法建立咳嗽变异型哮喘豚鼠模型

目的 尝试用卵清蛋白联合烟熏建立相似度更高的豚鼠CVA模型.方法 选取SPF级雌雄各半豚鼠24只,随机分为空白对照组、OVA致敏组与OVA致敏+烟熏组,共3组,每组8只豚鼠.OVA致敏组以卵清蛋白致敏法造模,OVA致敏+烟熏组以卵清蛋白致敏联合烟熏法造模,余方法一致.检测3组受试豚鼠肺顺应性(Cydn)、乙酰甲胆碱激发后气道阻力(RI)、辣椒素激发后咳嗽次数与首次咳嗽时间、肺组织病理及Ashcroft分级表评分指标变化,以评估模型.结果 相较于空白对照组,OVA致敏组与OVA致敏+烟熏组Cydn明显下降、RI明显上升、10 min咳嗽次数明显增加、首次咳嗽时间明显提前、肺组织病理变化明显、Ashcroft分级表评分明显上升,以上表现均符合咳嗽变异型哮喘特征.同时,相较于OVA致敏组,OVA致敏+烟熏组在咳嗽症状及RI变化上有更好表现,更符合咳嗽变异型哮喘特征,这可能与降低OVA致敏浓度避免免疫反应过度、烟熏增加咳嗽敏感性密切相关.结论 用OVA致敏联合烟熏的方法能建立相似度跟高的咳嗽变异型哮喘豚鼠模型.

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2021/07/20

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颞下颌关节强直动物模型中最大张口度与强直严重程度关系研究

目的 研究主、被动最大张口度(AMMO、PMMO)与颞下颌关节强直严重程度的关系.方法 选取28只健康雄性绵羊随机分为实验组和对照组,每组各14只.实验组绵羊双侧颞下颌关节模拟髁突矢状骨折,其中左侧翼外肌被切断以阻断其功能;对照组绵羊未进行手术.于术前及术后12、24周对所有绵羊体重、AMMO、PMMO、颞下颌关节形态学特点进行测量评估.结果 实验组只有右侧保留翼外肌功能的颞下颌关节发生了骨强直.术后12、24周,实验组绵羊AMMO、PMMO、极限距离均显著低于对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).实验组绵羊AMMO和PMMO与骨融合区宽度、长度、面积及钙化程度均呈负相关(均P＜ 0.05),其中骨融合区面积为主要影响因素(术后12、24周相关系数r分别为-0.94、-0.95).结论 颞下颌关节强直动物模型中阻断翼外肌功能可阻止骨强直的发生;对于早期髁突矢状骨折,可通过(牙合)垫或(牙合)板进行张口训练,进而阻断翼外肌功能.当颞下颌关节发生骨强直时,骨融合区面积越大,张口受限越明显.

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2021/07/20

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气虚血瘀证动物模型的研究进展

中医证候模型研究起步较晚,发展迅猛,近年来随着中医病证方药的研究不断加深,为了中医现代化的发展,要求中医证候模型研究更加具体和深入.气虚血瘀证作为一种临床上常见证型,在心脑血管疾病、消化系统疾病、慢性肾病、癌症等疾病中多有出现.随着我国人口老龄化程度的不断加重,因老年人多气虚,多血瘀的体质特点,气虚血瘀证的研究已成为中医学界的热点问题.综合近年来气虚血瘀证动物模型造模方法,将其造模思路概括为病理造模、病因造模、病证结合造模三方面.通过观察实验动物出现符合中医理论的宏观表征、肢体行为学表现,以及血液流变学等指标,评价造模方法,为气虚血瘀证造模方法提供思路与借鉴,针对气虚血瘀证类模型的研究应遵循因-脉-证-治的思路,即病因-夕外在表征-病理机制-辨证论治,将中医证候模型研究同现代科学结合,令造模方法规范化发展,构建相对完善的气虚血瘀动物模型造模方法,为今后探究气虚血瘀证的发病机制及新的治疗思路提供模型支持.

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2021/07/20

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唑来膦酸/白介素-2诱导的中国恒河猴外周血γδT细胞体外扩增

建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法.采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴(rhesus macaque)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用含5％猴自体血清、1 000U·mL-1白介素-2(IL-2)和不同浓度唑来膦酸(1,5,10 μmol·L-1)的OpTmizer细胞培养基进行培养,并使用流式细胞仪进行纯度及表型分析.结果 显示:使用含不同浓度唑来膦酸培养基诱导第8d时,1μmol·L-1和5μ上mol· L-1处理组的猴γδT细胞分别扩增至总细胞的91.4％和93.1％;5μmol·L-1处理组表达CD56、CD69及HLA-DR蛋白的猴γδT细胞占总细胞的比例分别为75.6％、75.5％以及78.0％;5μmol·L-1处理组表达干扰素IFN-γ的猴γδT细胞比例为84.8％.本研究通过优化培养基的组成成分,仅添加猴自体血清和IL-2即能有效诱导猴γδT细胞在体外的大量扩增,且培养得到的猴γδT细胞能够显著表达CD56、CD69、HLA-DR及IFN-γ,并具有较强的免疫激活和细胞杀伤作用.

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2021/07/20

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不同咀嚼负荷对牙周组织炎症状态影响的实验研究

目的:探讨牙周炎状态下不同咀嚼负荷对牙周组织的炎性状态的影响.方法:取18只大鼠利用局部注射脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)+高糖饮食喂养方法建立实验性动物牙周炎模型,36d后停止处置并随机分为两组:LPS组与LPS+soft组各9只,分别用正常饲料与定制软饲料连续喂养7d,另取3只大鼠作为control组.43d后,采集双侧上颌第一磨牙腭侧龈沟液与牙龈组织及磨牙区上颌骨,分别用于ELISA检测、提取总RNA、反转录后进行Real-time PCR和用于Micro-CT扫描、三维重建后脱钙进行H&E染色.结果:相比于control组,LPS+soft组和LPS组腭侧牙槽骨均出现明显吸收,炎细胞浸润,破骨细胞增殖,形成骨吸收陷窝形成,其中LPS组更为明显.LPS组IL-1β、TNF-α在牙龈组织的表达与龈沟液含量中分泌水平均高于control组,差异具有统计学意义(P<0.05);牙龈组织中IL-6在LPS组的表达也显著高于control组,差异具有统计学意义(P<0.05);另外TNF-α在LPS组中的基因表达水平较LPS+soft组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:不同硬度的食物会导致牙周组织的炎症反应程度出现差异,较软食物相对正常食物有减轻其炎性状态的作用.

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2021/07/20

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浙江省野生动物鼬獾和家犬狂犬病病毒L基因序列测定分析

目的 测定浙江省野生动物鼬獾和家犬狂犬病病毒L基因序列,在分子水平分析转录酶大蛋白(LP)的变异特点和遗传进化特征.方法 对实验室检测阳性的狂犬病病毒标本进行L基因编码区核酸序列测定,通过生物分析软件比较L基因核苷酸序列和氨基酸序列,并与GenBank的36个参考序列编码区进行比对分析.结果 测序获得野生动物鼬獾(F02、F04)和家犬(D01、D02)二种宿主来源的狂犬病病毒街毒株L基因核苷酸全长序列并递交GenBank,开放读码框(ORF)均为6 387 bp,编码区均以2个连续的起始密码子ATG起始,编码2 128个氨基酸.在LP保守结构域上的特异功能短序列几乎完全保守,各结构域之间的序列保守性略差,对存在的变异位点绝大多数极性并没有变化,系统进化分析显示浙江省鼬獾、犬街毒株均归属于传统的狂犬病病毒Asian谱系,与我国广泛传播的狂犬病病毒同属一种系.结论 浙江省狂犬病病毒L基因的构成与传统狂犬病病毒一致,所构建进化树的分析作用与N基因相同,鼬獾病毒依然具有本土狂犬病病毒的基因特点,家犬病毒可能与我国多种宿主动物病毒来源相同或者具有新近的相互传播,不同宿主动物狂犬病病毒具有种群多样性的进化特点和地域性流行特征.

2020

2021/07/20

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