一种小鼠无创气管插管的方法及其应用

无创气管插管是临床常用技术手段,但对实验小鼠进行无创气管插管具有一定难度.特别是对同一小鼠进行反复气管插管极易对小鼠咽喉部造成损伤.本研究提供了一种便捷可靠的小鼠气管插管方法,可针对同一实验动物进行反复无创操作,进而可用于各类药理学及其他实验.本实验所有动物实验均通过中国医学科学院药物研究所伦理审查委员会审查.应用此种方法同时配合小鼠肺功能检测仪,本课题组绘制了小鼠肺功能发育曲线,发现小鼠在8周龄或18～20g时肺功能发育成熟.同时应用此方法,本课题组成功制备了多次博莱霉素所致慢性肺纤维化模型.因此,该小鼠无创气管插管方法是安全可靠的药理学实验手段.

2020

2021/07/20

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赤苍藤对高尿酸血症大鼠血管内皮功能的影响

目的:探讨赤苍藤醇提物对高尿酸血症模型大鼠血管内皮保护作用与机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、苯溴马隆组、赤苍藤醇提物中剂量组和低剂组,共5个组.以腺嘌呤和盐酸乙胺丁醇灌胃法建立大鼠高尿酸血症模型,正常组和模型组给予生理盐水,其余各组分别给予赤苍藤醇提物中、低剂量,苯溴马隆,连续给药28 d.末次给药后取血,检测大鼠血清尿酸(SUA)、黄腺嘌呤氧化酶(XOD)、肌酐、血管内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)含量.结果:与正常组相比较,模型组大鼠血清SUA、XOD、肌酐、ET-l含量显著升高(P<0.05),NO含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,赤苍藤醇提物中、低剂量组的血清UA、肌酐、XOD、ET-1含量均显著降低(P<0.05),NO含量均显著升高(P<0.05).结论:赤苍藤能够抑制XOD的活性,降低高尿酸血症大鼠血清尿酸含量,对实验动物血管内皮舒缩功能有保护作用.

2020

2021/07/20

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生物被膜形成相关基因对鼠伤寒沙门菌耐药性的影响

目的 检测鼠伤寒沙门菌S025△rpoN、△rpoS、△csgA和△bcsA缺失株生物被膜形成能力和对药物敏感性的差异,研究生物被膜及其成分对细菌耐药性的影响. 方法 运用试管法检测生物被膜,药敏试验、最小抑菌浓度(MIC)法和最小杀菌浓度(MBC)法检测细菌对药物的敏感性. 结果 与野生株相比,△rpoN缺失株生物被膜形成能力增强,但对抗生素的敏感性没有发生改变,△rpoS和△csgA缺失株丧失生物被膜形成能力,△bcsA缺失株生物被膜形成能力下降,△rpoS、△csgA和△bcsA缺失株对头孢噻肟、美福仙、四环素、强力霉素和庆大霉素的敏感性提高,且△csgA缺失株抑菌圈直径大于△bcsA缺失株,表明生物被膜形成提高了细菌的耐药性.庆大霉素MBC结果显示,野生株和△rpoN为6.25 μg/ml,而△rpoS、△csgA和△bcsA分别为1.56 μg/ml、1.56 μg/ml和3.125 μg/ml,表明生物被膜形成提高抗生素的杀菌浓度. 结论 沙门菌形成生物被膜能提高细菌的耐药性,且卷曲菌毛的作用更为重要.

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2021/07/20

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单纯疱疹病毒Ⅰ型最新研究进展——病原学、防控及应用

单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus 1,HSV-1)感染可引起广泛的临床症状,包括口腔感染造成的组织损伤,以及严重的中枢神经系统感染造成的脑炎.HSV-1的研究每年都有突破性进展,其病原学、感染引致慢性炎症、抗病毒制剂,以及作为微生物工具用于治疗肿瘤的研究,引起了业界同行的广泛兴趣.本文对HSV-1近几年的研究进展进行综述,为进一步了解该病毒致病机理及应用价值提供参考.

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2021/07/20

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2018年湖北省猪源沙门菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解规模化猪场沙门菌的流行和耐药情况,本研究于2018年10-12月采集湖北武汉、钟祥、大冶、囊阳、黄冈地区5个规模化猪场各年龄段猪的肛门拭子进行沙门菌的分离鉴定,并对所分离的菌株进行耐药表型分析和耐药基因检测.采用沙门菌选择性培养基进行细菌的分离培养,并通过生化试验和PCR扩增invA基因确定所分离的细菌为沙门菌;采用玻片凝集法对所分离的沙门菌进行血清分型;采用微量肉汤稀释法进行6种抗菌药物的耐药表型检测,并采用PCR方法对相关的15种耐药基因的携带情况进行检测.结果 显示,从采集的640份肛门拭子分离鉴定出39株沙门菌,分离率为6.09％,其中来源于保育猪的样品中沙门菌的分离率最高,为16.25％;所分离沙门菌的血清型主要为鼠伤寒沙门菌(69.23％),其次是德比沙门菌(15.38％),其他血清型所占比例为15.38％.药敏试验发现所分离的沙门菌至少对1种抗生素耐药,其中94.87％的分离株对氨苄西林表现出耐药性,对氯霉素和卡那霉素表现出耐药性的分离株所占的比例分别为58.97％和53.84％％,仅有20.51％的分离株对阿奇霉素表现出耐药性;此外,53.84％的菌株对3种以上的受试抗生素同时表现出抗性,其中20.51％的分离株同时对5种受试抗生素表现出耐药性.用PCR方法共检测出12种耐药基因,其中blaCMY(79.49％)、aph (3')-Ⅱ(76.92％)、catA1 (76.92％)的检出率较高.研究结果为湖北地区猪场制定沙门菌病的综合防控措施提供参考.

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2021/07/20

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不同途径感染后5型腺病毒在C57BL/6J小鼠体内的分布

目的 通过4种途径感染后检测5型腺病毒(Ad5)在C57BL/6J体内的分布.方法 112只C57BL/6J小鼠分为4组,以滴鼻、灌胃、尾静脉及腹腔注射方式每只小鼠给予1×109 pfu/mL的Ad5溶液100 μL,分别在感染后1d、2d、3d、4d、5d、6d和7d每组处死雌雄小鼠各2只,取淋巴结、睾丸、附睾、子宫、卵巢、脾脏、肾脏、肝脏、肺、心脏、脑、血液和骨髓组织进行荧光定量PCR检测.结果 滴鼻组在肺和脊髓组织中检测到Ad5,肺组织中Ad5在感染后4d下降比较多;灌胃组在所有组织中均没有检测到Ad5;尾静脉注射组在肝脏和脾脏中检测到Ad5,且下降速度比较慢;腹腔注射组在脊髓、脾脏、附睾和睾丸中检测出Ad5.腹腔注射组脊髓中Ad5的含量比滴鼻组约高10倍,脾脏中Ad5的含量与尾静脉注射组脾脏中的含量相当,附睾和睾丸中Ad5含量只有其他阳性组织中检测出含量的1％～10％.结论 Ad5的肺部感染实验,可每3d滴鼻一次;肝脏感染实验,可以用尾静脉注射方法;脾脏感染实验,可以采用尾静脉注射或腹腔注射方法;脊髓感染实验,可以采用腹腔注射方法.

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2021/07/20

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假病毒技术在新突发病毒性传染病防控产品评价中的应用

新发烈性病毒性传染病病原体的实验操作往往需要在高等级的生物安全实验室中进行,活病毒在实验室内操作和实验室间转移均具有较高的安全风险,导致采用活病毒进行疫苗、抗体药物的体外效力评价、筛选等受到影响.随着生物技术的提高,假病毒技术通过模拟病毒的膜结构或者模拟病毒核酸状态,前者模拟病毒感染的受体结合、细胞进入、抗体识别等过程,可替代活病毒进行体外细胞实验和动物体内实验,后者代替活病毒,用于核酸检测的质控品.本文将对假病毒技术在疫苗、抗体、诊断试剂等生物技术产品评价中的应用情况进行综述,以期为假病毒技术在SARS-CoV-2防控产品研究和评价中的应用提供借鉴.

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牛种布鲁菌sRNA的预测与鉴定

为了对牛种布鲁菌2308株基因组中的sRNA进行预测和鉴定,提取牛种布鲁菌2308株的总RNA,进行RNA-Seq高通量测序,基于测序结果采用sRNA-Detect算法进行sRNA的预测,并采用反转录PCR对sRNA进行验证.结果 显示,共预测筛选出3 523条候选的sRNA,采用反转录PCR验证出14个sRNA可以表达,其中13个sRNA的正常表达与Hfq伴侣蛋白密切相关.本研究在牛种布鲁菌中预测出3 523条sRNA,Hfq蛋白可以调控部分sRNA的正常表达.

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2021/07/20

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薄荷-荆芥不同配伍组分对流感病毒的影响

目的:通过观察薄荷-荆芥不同配伍组分抗流感病毒的药效学差异,探讨薄荷-荆芥最佳配伍组分.方法:SPF级ICR小鼠228只,雌雄各半.随机分为19组,每组12只.各组分别按照薄荷、荆芥黄酮与挥发油组分配比.用乙醚麻醉ICR小鼠,用甲型流感病毒A/PR/8/34(H 1N1) 10倍半数致死量(LD50)50 μL滴鼻感染,制备病毒感染动物模型.正常组以等量生理盐水滴鼻对照.小鼠病毒感染后当天开始灌胃给药,正常组、模型组灌服等量蒸馏水,阳性药组灌胃给予达菲和复方金银花颗粒.每天1次,连续给药7d.研究薄荷-荆芥不同配伍组分对流感感染小鼠肺指数的影响,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肺病理组织学变化,免疫组化观察薄荷-荆芥不同配伍组分对甲型流感病毒感染小鼠白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.结果:采用甲型流感病毒A/PR8/34(H 1N1)感染小鼠制备肺感染损伤,与正常组比较,模型组实验末肺质量增大,肺指数显著升高(P＜0.01);与模型组比较,达菲组、复方金银花颗粒组、挥发油1-挥发油2组、挥发油1组、挥发油2组给药后实验末肺质量明显降低(P＜0.05);与模型组比较达菲组、挥发油1组肺指数显著降低(P＜0.01);与模型组比较,复方金银花颗粒组、挥发油1-挥发油2组、挥发油2-黄酮1-黄酮2组、挥发油1-挥发油2-黄酮1组、挥发油1-挥发油2-黄酮2组、挥发油1-挥发油2-黄酮1-黄酮2组、挥发油2组肺指数明显降低(P＜0.05);与模型组比较,挥发油1-黄酮1组、挥发油1-黄酮2组、挥发油1-挥发油2组、挥发油1-挥发油2-黄酮1组、挥发油1-挥发油2-黄酮2组、挥发油2组、黄酮2组对IL-6,IL-1β,TNF-α表达显著下降(P＜0.01).结论:不同比例配伍的组分以薄荷挥发油-荆芥挥发油-荆芥黄酮组、薄荷挥发油-荆芥挥发油组、荆芥挥发油组、薄荷挥发油组抗流感病毒效果较好.

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2021/07/20

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pH敏感多西紫杉醇纳米胶束的制备及其增强小鼠的抑瘤活性研究

抗肿瘤药物的非特异性释药是化疗药物对正常组织产生毒副作用的主要原因.利用纳米技术实现抗肿瘤药物的特异性与响应性递药是提高药物治疗效果、减少毒副反应的重要途径之一.本研究合成了pH敏感聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-聚-β-氨基酯[poly(methoxy-ethylene glycol)-poly(lactic acid)-poly-(β-amino ester),PBAE]三嵌段共聚物,并制备胶束负载多西紫杉醇(DTX),以提高DTX抗肿瘤活性.通过开环聚合及Michael加成合成共聚物,核磁共振波谱法表征其结构和分子量,酸碱滴定法测定碱解离常数(pKb),荧光法测定临界胶束浓度(CMC).采用薄膜水化法制备载DTX纳米胶束,激光粒度仪测定粒径和分布及稳定性,HPLC测定载药量、包封率及累积药物释放量.载药胶束粒径为10～100 nm,粒径分布较窄;制备的2种载药胶束PBAE1-DTX和PBAE2-DTX中DTX的载药量分别为(5.3±0.10)％和(4.9±0.05)％,包封率分别为(93.8±1.70)％和(87.2±4.10)％.建立小鼠Lewis肺癌模型,利用尾静脉注射给药方式分别考察游离药物(DTX)、非pH敏感载药胶束聚乙二醇-聚乳酸-DTX (PELA-DTX)和pH敏感载药胶束(PBAE1-DTX)的抑瘤效果.所有动物实验均符合动物伦理学标准,并获得中国中医科学院中药研究所动物伦理委员会批准(批准号2017090110).体内抑瘤实验表明,在给药剂量为10和20 mg·kg-时,纳米药物对小鼠肺腺癌移植瘤均显示出较好的抗肿瘤活性.比较各组小鼠肿瘤体积增长速率:PBAE1-DTX 20 mg·kg-1＜PBAE 1-DTX10 mg·kg-1＜ PELA-DTX 10 mg·kg-1＜DTX 10 mg·kg-1＜生理盐水,其中PBAE1-DTX组的疗效更为显著.本研究制备的pH敏感DTX纳米胶束值得进一步研究,以促进DTX在抗肿瘤领域的应用.

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2021/07/20

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