小檗碱对地塞米松所致C57小鼠糖脂代谢紊乱的改善作用

本文旨在探讨小檗碱(berberine,BBR)对地塞米松(dexamethasone,Dex)引起的糖脂代谢紊乱的改善作用及其机制.采用Dex诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,给予BBR (2.5、5和10μmol·L-1)处理,油红O染色检测细胞脂质沉积.动物实验方案由中国医学科学院药物研究所伦理委员会审核并批准.雄性C57BL/6N小鼠随机分为3组,BBR治疗组小鼠皮下植入Dex渗透泵,同时灌胃给予BBR (100 mg·kg-1·day-1)治疗4周;模型组同期植入Dex渗透泵;对照组植入内容物为生理盐水的渗透泵.每周测量小鼠食物摄入量和体重.小动物核磁成像检测小鼠皮下脂肪及内脏脂肪含量.实验结束时测定小鼠血浆中总胆固醇(cholestrol,CHO)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-c)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-c)和葡萄糖(glucose,Glu)水平.检测小鼠肌肉质量.采用RT-PCR和Western blot技术检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)和腺苷酸活化蛋白激酶α(AMP-activated protein kinaseα,AMPKα)在3T3-L1细胞及小鼠附睾脂肪组织中的表达.实验结果表明,BBR可剂量依赖性地抑制Dex诱导的3T3-L1前脂肪细胞分化,抑制率分别为11.5％、16.6％和22.5％.在C57BL/6N小鼠中,小檗碱能减轻Dex引起的高脂血症和高血糖,减少小鼠内脏脂肪堆积.RT-PCR和Western blot分析结果显示,BBR可降低3T3-L1细胞和小鼠脂肪组织中PPARγ的表达,促进AMPKα的磷酸化.综上所述,BBR可通过调节PPARγ和AMPK减轻Dex诱导的代谢紊乱.

2020

2021/07/20

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大鼠肠系膜动脉的立式包埋及内皮损伤的评估方法

目的 建立一种新的小血管立式包埋方法 ,并通过对内皮损伤的定量分析来评估血管的功能.方法 ①肠系膜动脉的分离:首先游离大肠小肠部分至体外,暴露出肠系膜动脉,随后用剪刀游离出带有少量组织的肠系膜动脉,最后在镜下剔除黏连组织;②肠系膜动脉的立式包埋;③HE染色、免疫荧光染色观察肠系膜动脉的结构和内皮损伤程度.结果 大鼠肠系膜动脉立式包埋及血管内皮评估方法,能够快速、有效地得到良好形态的大鼠肠系膜动脉切片,并给出小血管病变的病理学研究方法.结论 本方法能够降低病理切片的制作难度,为血管病变的研究提供了可借鉴的研究方法,可以进一步推广至其它动物或临床病人的小血管研究.

2020

2021/07/20

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基质重塑相关7(MXRA7)基因:一个非亲缘家族的一员

本世纪初,有学者对1 375份人类cDNA文库内的所有基因进行共表达分析,发现有8个转录本总是与基质重塑相关的基因(如胶原、基质金属蛋白酶、骨成型蛋白等)共表达,将它们命名为matrix-remodeling associated 1～8(MXRA1～8,暂译“基质重塑相关1～8”基因),但它们彼此之间并无序列同源性.随后的研究确定了该家族中除MXRA7外其他7个成员的生物学功能,其中部分成员在研究中以其他别名出现,比如MXRA4即CD93或C1qRP.国内学者首先在关于角膜新生血管和角膜感染的研究中报道MXRA7表达的变化,继而在化学诱导的肝损伤模型、免疫介导的银屑病模型以及骨髓间充质干细胞向成骨细胞、成脂细胞分化模型中证实MXRA7的重要作用.基因组文库数据显示MXRA7在脊椎动物中保守存在,且在人和小鼠等模型生物中均可以产生多种蛋白异构体.大量公共数据库(比如GEO)中都包含MXRA7在不同实验体系中的表达水平和变化信息,众多基于高通量分析的文献也常在数据流水账中对MXRA7一笔带过.对这些资源进行汇总分析,提示MXRA7基因产物可分布于胞外基质、胞浆中甚至细胞核内,可参与胚胎发育、细胞分化、细胞代谢等多种生理过程,或参与神经系统、心血管系统、骨骼系统的病理过程,或参与肿瘤、白血病、免疫性疾病、感染等疾病的发病机制.本文对现有文献和公共数据进行综述,以期激发学界对MXRA7的关注.

2020

2021/07/20

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冠状病毒相关研究工具进展

冠状病毒宿主范围广,可跨越动物宿主屏障感染人类,甚至造成人际传播.2019年12月新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)在中国武汉引发肺炎疫情,引起全世界的关注.截至2020年2月10日,中国实验室确诊病例40 235例,死亡909例,病死率2.3％;重症6 484例,重症率16.1％;全球已有25个国家和地区有确诊病例.至此,2019-nCoV成为继出现在中国内地的严重急性呼吸综合征冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)、出现在中东沙特的中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)之后,第三种可引起人类致死的冠状病毒.对于2019-nCoV的来源、中间宿主、传播方式、致病机制、防控措施等一系列问题,丞待科学家去研究探索.了解新病原的研究工具,借鉴SARS-CoV和MERS-CoV的研究经验,在基因合成技术提升的背景下,仅需新病原基因组序列就可开发基础研究工具,进行减毒疫苗株、筛选药物和致病机制等的研究探讨.因此,本文就目前冠状病毒基础研究工具做一综述.

2020

2021/07/20

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妊娠期玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子药物的安全性研究进展

尽管视网膜疾病治疗进入抗血管内皮生长因子(VEGF)时代,但是对于妊娠合并糖尿病视网膜病变、视网膜静脉阻塞及黄斑水肿等抗VEGF药物治疗的安全性仍有疑虑.目前有限的临床病例报道暂未发现玻璃体腔注射抗VEGF药物对妊娠期母亲及胎儿的严重不良影响.但动物实验发现在妊娠早期及中期玻璃体腔注射抗VEGF药物,可导致胎鼠发育迟缓及畸形.妊娠期玻璃体腔注射抗VEGF药物的安全性仍不能确定,需要进一步研究.根据现有的临床报道,无意中在妊娠期玻璃体腔注射抗VEGF药物,一般不会导致严重后果,但需严密观察.目前仍不建议在妊娠期玻璃体腔注射抗VEGF药物.

2020

2021/07/20

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Toll样受体3基因rs3775291位点突变在糖尿病大鼠急慢性心肌缺血中的损伤机制研究

目的 探讨Toll样受体3(TLR3)基因rs3775291位点突变在糖尿病大鼠急慢性心肌缺血中的损伤机制.方法 选取2019年1～4月由南昌大学实验动物中心提供的80只基因敲除SD大鼠作为研究对象,采用随机数字表法将其分为野生型组(40只)和突变型组(40只).野生型组仅丝线穿过冠状动脉,但左室支不结扎,通过尾静脉注射生理盐水.突变型组选取TLR3基因敲除大鼠制作模型.比较两组的TLR3、核因子κB(NF-κB)蛋白表达以及趋化因子10(IP-10)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果 突变型组的TLR3和NF-κB蛋白表达均高于野生型组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组的IP-10、IL-8、TNF-α水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 糖尿病大鼠急慢性心肌缺血模型中,TLR3的基因和蛋白表达水平明显升高,炎症指标水平也升高,TLR3基因rs3775291位点突变与损伤机制有密切的联系.

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2021/07/20

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苜蓿素生物活性研究进展

苜蓿素为天然黄酮类化合物,广泛存在许多天然可食性植物中,其生物活性主要有抗炎、抗氧化应激、抗过敏、抗肿瘤、抑制微生物生长(巨细胞病毒、利什曼虫和胃肠道线虫)、降血糖和降血脂等作用,且安全性好,可成为新药开发的方向.本文综述近些年国内外文献,对苜蓿素的生物学活性及其作用机制的研究现状作一总结,为新药开发提供理论依据.

2020

2021/07/20

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体外嗜碱性粒细胞激活试验法的建立

目的 建立基于流式细胞仪检测的体外嗜碱性粒细胞激活试验(human basophil activation test, h-BAT)方法,并探索该方法用于Ⅰ型变态反应检查的可行性.方法 利用人源白血病嗜碱性粒细胞KU812在Ⅰ型变态反应过程中经阳性剂激活后,细胞特异性表面抗原CD63和CD203表达特异性增强的原理建立体外Ⅰ型变态反应模型,并同步用人组胺酶联免疫法进行验证.结果 确定以终浓度为2 μg·mL-1的N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸为阳性剂,孵育2h作为流式方法检测嗜碱性粒细胞激活的阳性成立条件,细胞相对组胺释放百分比增高结果进一步确认了阳性成立条件.结论 h-BAT法有测试简便、评价客观等优点,是一种较好的过敏反应细胞模型,可以用于现有豚鼠试验的替代.

2020

2021/07/20

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新疆南疆部分地区蜱种鉴定及斑点热群立克次体流行病学调查

为了解新疆南疆部分地区不同蜱种携带斑点热群立克次体(spotted fever group Rickettsia,SFGR)情况,采用PCR技术扩增16S rDNA基因和SFGR外膜蛋白A(OmpA)基因,进行蜱种鉴定及SFGR检测.对测序阳性样本进行BLAST序列分析,应用DNAStar和Mega 6.0软件构建遗传进化树.结果 显示:从新疆南疆9个县市共采集蜱1 340只,其种类包括3属4种,分别为图兰扇头蜱、边缘革蜱、银盾革蜱、亚洲璃眼蜱;在随机挑选的90份蜱DNA样本中共检测出57份SFGR阳性样本,其中阿拉尔市十一团、七连地区的阳性样本均来自犬体表寄生蜱,其余地区的阳性样本均来自绵羊体表寄生蜱.序列分析及遗传进化树显示,此次检测的亚洲璃眼蜱、边缘革蜱携带的SFGR与GenBank公布的SFGR疆内株CandidatusR.barbariae(登录号为MG668832.1)亲缘关系最近,处于同一分支;图兰扇头蜱携带的SFGR也同疆内株R.massiliae、R.conorii、Candidatus R.barbariae(MG668831.1、KP214024.1、MG668832.1)亲缘关系最近,处于同一分支;而银盾革蜱携带的SFGR与国外株R.raoultii (KT805295.1)亲缘关系最近,处于同一分支,并首次于新疆南疆绵羊寄生银盾革蜱中检出饶氏立克次体.本试验为该地区蜱传立克次体病的研究及防控提供重要依据.

2020

2021/07/20

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分子排阻色谱法测定德谷胰岛素高分子蛋白含量

目的 建立德谷胰岛素高分子蛋白质的定量分析测定方法 .方法 采用Insulin HMWP色谱柱(7.8 mmx300 mm,10μm),以冰醋酸-异丙醇-水(4 ∶3 ∶10)为流动相,流速为0.5mL.min-1,检测波长为280nm,利用分子排阻色谱法分离德谷胰岛素单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行定量分析.结果 该方法 的检测限和定量限分别为0.18和0.47 μg;仪器精密度RSD为0.51％,德谷胰岛素在0.125～4.0 mg·mL-1内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=20.864 1X-0.125 9,R2=1.000 0;德谷胰岛素主峰与高分子蛋白质峰的分离度＞2.0.结论 建立的方法 操作简便,灵敏度高,可有效地对德谷胰岛素高分子蛋白质进行定量分析.

2020

2021/07/20

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