基于网络药理学分析加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑的机制

目的:借助网络药理学分析技术,探讨加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑的作用机制.方法:采用中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP),筛选加味归脾汤的主要化合物成分和药物靶基因;通过GeneCards和人类孟德尔遗传综合数据库(OMIM)建立失眠和焦虑的靶基因集;通过STRING 11.0软件分析交集基因之间的相互作用;采用Cytoscape_3.6.1软件分析和马修斯相关系数(MCC)算法筛选核心基因.基于网络分析结果,将48只SD雌性大鼠随机分配为空白组,模型组,右佐匹克隆片组(0.2 mg·kg-1·d-1),加味归脾汤低、中、高剂量组(0.31,1.25,5 g·kg-1·d-1).采用氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射方法,建立失眠伴焦虑动物模型,并给予相应药物治疗7d;然后进行自主活动实验观察大鼠活动的次数、时间和路程;实时荧光定量聚合酶链式反应检测大鼠海马组织中RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt1),丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3),丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)和白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达.结果:从TCMSP数据库中共筛选出228个化合物活性成分;经与GeneCards和OMIM综合数据库比对,共获取181个疾病与药物的交集基因;STRING软件和MCC算法共获得MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6等9个关键基因.动物实验表明,与模型组比较,加味归脾汤高、中剂量组的活动次数、时间和路程显著减少(P＜0.01),海马组织中MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6 mRNA表达显著降低(P＜0.01),低剂量组差异无统计学意义.结论:加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑作用机制,可能与对MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6基因的调节有关.

2020

2021/07/20

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活性多糖提取纯化及结构解析的研究进展

多糖是来源于植物、动物、微生物中的一类天然大分子化合物,具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖等多种药理活性.多糖来源广泛,安全性高,具有广阔的开发应用前景.但多糖提取、纯化方法重现性差,不易得到高纯度的均一多糖,常用的结构解析方法难以得到确切的结构信息,导致多糖构效关系及作用机制尚不明确,极大地阻碍了多糖类药物的研发.文章将活性多糖的提取、纯化和结构解析的方法和技术进行综述,以期推动专属性更强,效率更高的分离纯化及结构解析方法的建立,为构效关系研究提供依据,并为多糖类药物研发提供参考.

2020

2021/07/20

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纳米铟锡氧化物对大鼠肺损伤及氧化应激的影响

目的 探讨非暴露式气管灌注纳米铟锡氧化物对SD大鼠肺组织的损伤作用.方法 选取6～8周龄SPF级SD雄性大鼠40只,体质量为(200±10)g,随机分为对照组、低剂量组(1.2mg/kg)、中剂量组(3mg/kg)、高剂量组(6 mg/kg).常规饲养1周,给予非暴露式气管灌注染毒,每周2次,间隔3d,连续染毒12周.染毒期间每周称量体质量,观察体质量变化.染毒结束后腹腔注射水合氯醛麻醉处死,留取肺组织、血清和灌洗液.采用试剂盒测定灌洗液中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和血清中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织中的血红素氧合酶-1(HO-1)含量和血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化,采用免疫组化法检测肺组织中TNF-α蛋白表达水平,制作HE染色切片,观察各组肺组织病理变化.结果 染毒期间,大鼠一般情况无明显异常,体质量稳定增长;病理切片显示,大鼠在灌注纳米铟锡氧化物后,各染毒组肺组织都呈现不同程度的损伤,以高剂量组最为明显.与对照组比较,各剂量染毒组肺灌洗液中MDA含量、T-SOD活力均明显上升(P＜0.05),中、高剂量染毒组LDH活力明显上升(P＜0.05),各剂量染毒组大鼠肺组织和血清中TNF-α蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05),各剂量染毒组肺组织中的HO-1含量明显下降(P＜0.05),GSH-Px水平无明显差异(P＞0.05).结论 非暴露式气管灌注纳米铟锡氧化物能导致SD大鼠肺氧化损伤,发生病理损害及功能障碍,破坏了机体氧化/抗氧化的平衡.

2020

2021/07/20

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喜炎平注射液对细菌内毒素脂多糖致热家兔的解热作用

本文主要研究喜炎平注射液对细菌内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的家兔发热的解热作用,并初步探讨机制,为其临床应用提供药理学依据.以LPS为诱导剂建立家兔发热模型,测定直肠温度变化;测定血清中前列腺素E2 (prostaglandin E2,PGE2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin-1β,IL-1β)和磷脂酶A2 (phospholipaseA2,PLA2)水平;测定下丘脑和脑脊液中PGE2、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)和精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)水平.本文中动物福利和实验过程均遵循中国药科大学动物伦理委员会的规定.结果 显示:喜炎平注射液(12.5、25和50 mg·kg-1)可显著降低LPS所致发热家兔的体温,作用持续时间可达5.5～8.5h.在剂量为25和50 mg·kg-1时,喜炎平注射液的退热作用与安乃近注射液(50 mg·kg-1)相当.深入研究发现,喜炎平注射液和安乃近注射液均不同程度地降低发热家兔血清中PGE2、IL-1β、TNF-α和PLA2水平.此外,喜炎平注射液亦显著降低发热家兔下丘脑中PGE2、cAMP、AVP水平和脑脊液中PGE2、cAMP水平,升高脑脊液中AVP水平.本研究发现喜炎平注射液可显著改善LPS所致家兔发热,其机制与调节血清、下丘脑和脑脊液中PGE2、TNF-α、IL-1β、PLA2、cAMP和AVP水平密切相关.

2020

2021/07/20

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人参皂苷Rg1促进移植大鼠的组织工程血管内皮化

目的 包载人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)构建促内皮化的组织工程血管(tissueengineered blood vessels,TEBVs),并移植大鼠颈总动脉以观察其通畅情况和内皮化效果.方法 CCK-8 和流式细胞凋亡检测培养48 h后Rg1对内皮细胞(endothelial cells,ECs)增殖和凋亡的影响,同时确定药物适宜工作浓度;将ECs分为对照组(普通培养基)、Rg1处理组(15.63 μmol/L Rg1培养基)和联合处理组[15.63 μmol/L Rg1 +0.5 μg/mL血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)抑制剂XL184培养基],检测各组细胞培养48 h后增殖和划痕愈合情况;构建壳聚糖包被的Rg1-(2-羟丙基)-γ-环糊精颗粒(Rg1-HGC/CS NPs,以下简称NPs)并修饰至胶原血管内腔面,进行FTIR、DLS和SEM检测;体外条件下,将ECs与脱细胞血管和构建的TEBVs共培养48 h,观察其生物相容性;动物实验分为胶原组(胶原处理的血管)、空白CS组(空白CS处理的胶原组血管)和实验组(NPs处理的胶原组血管),将其移植至SD大鼠的左侧颈总动脉;分别于30、90 d后使用超声和Micro-CT检查血管通畅情况;使用HE、Masson和(CD31+vWF)免疫荧光观察90 d后血管的内皮化效果.结果 Rg1通过VEGFR2对ECs产生促进增殖和迁移的作用(P＜0.05),未见明显的凋亡影响;所构建的NPs粒径约为130 nm,大小均一(PDI＜0.3),并已成功修饰至血管内腔面;共培养实验表明,所构建的TEBVs生物相容性较好,利于细胞贴附生长;移植30、90 d后的影像学检测显示,实验组较其他组通畅度良好;移植90 d后的HE、Masson切片染色显示,胶原组和空白CS组的血管发生形变,失去正常结构,且因血栓和胶原纤维增生而发生阻塞,而实验组血管外形完整且无明显阻塞;CD31和vWF免疫荧光显示,实验组血管内腔面均匀覆有ECs,内皮化效果较其他组良好.结论 所构建的促内皮化TEBVs可促进血管的内皮化进程,维持血管移植后的远期通畅.

2020

2021/07/20

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黄连温胆汤治疗代谢综合征研究进展

代谢综合征(MS)是以中心性肥胖、胰岛素抵抗、高血压和高脂血症为特征的病理状态.随着现代社会不良饮食习惯、生活方式的增加,尤其是久坐少动的不良生活习惯,均导致MS的患病率逐年上升.据相关资料预计,2040年全球MS患者人数将达到25.68亿左右,严重危害人类生命健康.黄连温胆汤作为清热燥湿、理气化痰、和胃利胆的中医名方,已被现代药理学证实具有显著的降脂、降糖、抗炎等药理作用,被广泛用于代谢性疾病、心血管系统疾病等多个系统疾病的治疗.近年来大量研究证明黄连温胆汤治疗MS具有明显疗效,在临床疗效方面,能明显改善MS患者肥胖、血脂紊乱、糖代谢异常及高血压病理状态,同时还可干预机体中的炎症状态、前血栓状态及血管调节异常等潜在危险因素,具有安全性高,副作用少的特点;实验研究方面,能通过干预胰岛素信号转导、减轻炎症反应、抗氧化应激等途径,增强胰岛素的敏感性,改善MS动物模型及细胞模型的胰岛素抵抗程度.笔者通过检索PubMed,中国知网,维普,万方等数据库,从理论基础研究、临床疗效研究和实验机制研究3个方面,将近年来黄连温胆汤治疗MS的报道研究做一详细综述,以期为以后深入阐明黄连温胆汤治疗MS的作用机制和该方的开发及临床推广提供一定的科学参考.

2020

2021/07/20

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醋酸泼尼松和泼尼松在Beagle犬体内的生物利用度比较

本文通过Beagle犬双周期随机交叉灌胃给予醋酸泼尼松(2.0 mg·kg-1)和泼尼松(1.8 mg·kg-1),建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定Beagle犬血浆中的醋酸泼尼松、泼尼松及活性代谢物泼尼松龙的浓度,比较醋酸泼尼松和泼尼松的生物利用度及药代动力学.本实验方案经中国科学院上海药物研究所实验动物伦理委员会批准.采用地塞米松作为内标,血浆样品以乙腈沉淀蛋白后,经HSS T3 (50 mmx2.1 mm,1.8 μm)色谱柱分离,以甲醇-0.1％甲酸的5 mmol·L-1醋酸铵水溶液作为流动相进行梯度洗脱.采用电喷雾离子源,以多反应监测正离子模式检测.用于定量分析的醋酸泼尼松、泼尼松及泼尼松龙的离子对分别为m/z 401.2→295.2、m/z 359.2→313.2和m/z 361.2→325.1,内标的离子对为m/z 393.2→373.0.结果 表明,醋酸泼尼松在血浆中的含量低于分析方法的定量下限1.0 ng·mL-1,说明醋酸泼尼松在体内吸收过程中快速水解;醋酸泼尼松给药后,泼尼松Cmax为(25.1±3.61) ng·mL-1,AUC0-t为(115±27.2)h·ng· mL-1,泼尼松龙Cmax为(207±38.5) ng·mL-1,AUC0-t为(760±218)h·ng·mL-1;泼尼松给药后,泼尼松Cmax为(67.9±22.6) ng·mL-1,AUC0-t为(160±19.3) h·ng·mL-1,泼尼松龙qmax为(582±81.4) ng·mL-1,AUC0-t为(1 310±140)h·ng·mL-1.Beagle犬给予泼尼松后,泼尼松Cmax和AUC0-t分别约为给予醋酸泼尼松的2.6倍和1.4倍;泼尼松龙Cmax和AUC0-t分别约为给予醋酸泼尼松的2.8倍和1.8倍.通过计算泼尼松龙AUC0-t的比值,得到醋酸泼尼松相对于泼尼松的生物利用度仅为57.1％.

2020

2021/07/20

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核苷(酸)类似物在妊娠期乙型肝炎患者中的安全性研究进展

慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是严重危害人类健康的世界性公共卫生问题.母婴传播是HBV感染的主要途径之一,妊娠女性高病毒载量是HBV母婴传播的高危因素,因此,有必要在妊娠期通过有效、安全的抗病毒治疗来降低高病毒载量母体血清HBV DNA水平,降低胎儿感染HBV的风险.本文通过检索国内外文献资料,从临床前的动物试验和人类妊娠期的使用经验两个方面对核苷(酸)类似物(nucleoside/nucleotide analogues,NAs)在妊娠期乙型肝炎患者中的安全性研究进展进行了归纳和总结.目前而言,所有NAs在妊娠期使用仍然存在潜在的风险,基于现有数据,替诺福韦酯、替比夫定和拉米夫定是妊娠期相对风险较低的NAs,但NAs暴露对婴儿发育是否存在远期风险仍需更多临床数据进行评估.

2020

2021/07/20

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沉默HMGB1基因对裸鼠人上皮性卵巢癌移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)基因对裸鼠人上皮性卵巢癌移植瘤生长的影响.方法:选取对数生长期的人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3细胞建立裸鼠人上皮性卵巢癌移植瘤模型,将造模成功的裸鼠随机分成对照组和HMGB1-siRNA组,分别在接种细胞后第7、9、11、14、16天于荷瘤鼠腋下注射等量的生理盐水和HMGB1-siRNA.3周后颈椎脱臼法处死裸鼠、分离肿瘤组织,测量肿瘤的体积并绘制肿瘤生长曲线,以Tunel染色法检测移植瘤细胞的凋亡情况,Western blotting检测移植瘤组织中HMGB1、STAT3、p-STAT3的表达水平,免疫组化染色技术检测移植瘤组织中VEGF-A的表达和微血管形成情况.结果:与对照组相比,HMGB1-siRNA组的肿瘤体积增长速度减缓,第21天起HMGB1-siRNA组的肿瘤体积显著小于对照组(P<0.05);HMGB1-siRNA成功敲降了移植瘤组织细胞中HMGB1 mRNA的表达,移植瘤组织中HMGB1-siRNA组的细胞凋亡率较对照组显著升高[(34±8)％vs(6±2)％,P=0.04],HMGB1和p-STAT3表达显著降低(P<0.05),VEGF-A表达和微血管数均显著低于对照组(均P<0.05).结论:敲降HMGB1基因可能通过抑制HMGB1/STAT3信号通路降低VEGF-A的表达和微血管形成,从而促进肿瘤组织细胞凋亡和减缓移植瘤生长.

2020

2021/07/20

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组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其衍生的多靶点抑制剂在胃肠道肿瘤中的研究进展

胃癌的新发病例排在恶性肿瘤的第5位,而结直肠癌是世界第三大常见的恶性肿瘤和第四大癌症死亡原因.组蛋白乙酰化的动态平衡由组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)两个酶家族共同维持.HDAC能将赖氨酸上的乙酰基去除,从而抑制基因转录,但HDAC异常高表达可诱导正常细胞发生癌变,并参与其发展、增殖、侵袭和转移.靶向抑制HDAC已被证实具有抗肿瘤的效应,组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)能抑制HDAC的表达及活性,并通过影响细胞活性氧水平、阻滞细胞周期、促进损伤DNA修复、抗血管新生、影响细胞信号通路、诱导自噬凋亡及增加细胞对放化疗药物的敏感性发挥强效的抗瘤作用,在胃癌及结直肠癌中HDAC则表达增高,HDACi在胃肠道肿瘤的研究中也呈现出良好的成效,由于Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ类HDAC的催化核心发挥功能均依赖于Zn2+,故多数HDACi均含有Zn2+鳌合基团,异羟肟酸类抑制剂中的SAHA、TSA小剂量单独给药时已具有良好的抗肿瘤的成效,但后期临床研究发现,SAHA由于活性低,在治疗胃癌及结直肠癌的临床试验疗效并不佳,TSA的活性有所提高,但对HDAC选择性仍低,苯甲酰胺类HDACi在选择性上得以改善,但也无法只针对于特定亚型的HDAC,后期的环肽类及新报道的HDACi在HDAC的选择性上逐渐增加,但也仅限在动物及细胞实验阶段,并且上述的HDACi除与Zn2+结合之外还能与其他金属酶结合,从而缺乏绝对的特异性,故大多数的HDACi在很小的剂量下就已引发了副作用,由于肿瘤的发生、发展涉及多环节、多因素,单一靶标常常不能有效杀灭癌细胞,并易产生耐药性,联合多靶标比单一靶标具有更强的抑癌效用,甚至能减轻药物耐药性的产生,但有时联合用药时会因药物间相互影响而带来不良反应,为了避免药物间相互影响,研究者基于药效基团拼接理念,将HDACi活性基团与其他不同作用靶点药物的活性基团进行合理拼接设计合成新的具有多靶点抑制剂,研究证实,多靶点抑制剂既能避免药物间的相互作用,还能提高药物作用,现依次介绍HDACi及HDACi相关的多重抑制剂在胃肠道肿瘤的研究进展.

2020

2021/07/20

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