南昌地区HIV/AIDS病人合并弓形虫感染血清学调查

弓形虫病占艾滋病(AIDS)各种机会感染的10％～30％,是最常见的机会性感染疾病,也是引起中枢神经系统局灶性占位症状最常见的原因[1].为了解南昌地区艾滋病病毒(HIV)感染者/AIDS病人(简称HIV/AIDS病人)合并感染弓形虫现状,特进行调查,结果报告如下.

2020

2021/07/20

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低剂量双酚A通过调控PPARγ 致小鼠糖脂代谢 紊乱的研究

目的:探讨双酚A(BPA)在低剂量条件下单独或联合高脂饮食(HFD)对小鼠糖脂代谢的影响及机制.方法:60只C57BL/6J小鼠随机分为5组,建立不同浓度[1、10、100、1000μg/(kg·d)]BPA暴露的动物模型.确定最佳剂量后将另外60只C57BL/6J小鼠随机分为5组:对照组、HFD组、BPA组、BPA联合HFD组、BPA联合人参皂苷Rh1(Rh1)组.通过检测肝脏甘油三酯(TG)含量及葡萄糖耐量等指标评价小鼠糖脂代谢功能.结果:形态学实验及生化测定结果显示,小鼠在10μg/(kg·d)BPA暴露下肝脏脂质积累程度最高.与对照组相比,BPA暴露导致小鼠肝脏TG含量升高,葡萄糖耐量降低(P均<0.05).与单纯HFD饲养小鼠相比,HFD饲养的BPA暴露小鼠肝脏TG含量升高,葡萄糖耐量降低(P均<0.05).脂肪生成相关调控因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP1)、脂肪酸合酶(FASN)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD-1)的表达水平显著升高(P均<0.05).使用Rh1处理BPA暴露小鼠,与单纯BPA暴露组相比,肝脏TG含量显著降低(P<0.05).结论:BPA暴露能够诱导小鼠糖脂代谢紊乱,并加重HFD诱导的糖脂代谢紊乱.BPA调控一系列脂质代谢相关基因诱导脂质积累,引起糖脂代谢紊乱的发生.使用Rh1抑制PPARγ的表达可减轻BPA诱导的糖脂代谢紊乱.因此PPARγ转录水平的表达上调可能是BPA诱导的糖脂代谢紊乱的重要原因.

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2021/07/20

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基于网络药理学的"蒲公英-夏枯草"药对治疗乳腺癌作用机制研究

目的:基于网络药理学方法,探讨"蒲公英-夏枯草"药对治疗乳腺癌作用机制.方法:利用中药系统药理学数据库和分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)筛选出"蒲公英-夏枯草"药对的主要化学成分及作用靶点,建立"成分-靶点"蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络.利用比较毒理基因组学数据库(comparative toxicogenomics database,CTD)检索与乳腺癌相关的基因,采用Cytoscape 3.6.1软件构建"疾病-靶点"PPI网络.基于Cytoscape 3.6.1软件的Merge功能,合并"成分-靶点"和"疾病-靶点"的PPI网络,筛选出主要核心网络,借助David数据库、Reactome数据库及Omicshare平台,进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析.通过动物实验,验证"蒲公英-夏枯草"药对的抗肿瘤作用机制.结果:筛选得到含383个节点、594条连接的"蒲公英-夏枯草"药对"成分-靶点"PPI网络,含500个靶点的乳腺癌"疾病-靶点"PPI网络.利用网络合并,最终建立了含61个核心靶点的"成分-靶点-疾病"网络.基因GO功能分析结果主要与生物过程和分子功能有关;基因KEGG通路富集分析结果与免疫系统、性激素分泌以及肿瘤细胞增殖与凋亡有关.动物实验结果显示,"蒲公英-夏枯草"药对能提高乳腺癌模型小鼠白细胞介素6水平,抑制乳腺癌细胞增殖,促进乳腺癌细胞凋亡.结论:"蒲公英-夏枯草"药对治疗乳腺癌的可能机制与调节免疫系统、性激素分泌以及肿瘤细胞增殖与凋亡有关.

2020

2021/07/20

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表达HIV-1 CRF01_AE亚型结构基因小鼠模型的建立和鉴定

目的:构建并鉴定表达HIV-1 CRF01_AE亚型结构基因的小鼠模型.方法:使用哺乳动物密码子优化的HIV-1 CRF01_AE gp160基因,通过慢病毒包装系统构建重组慢病毒LV-GFP-AE gp160,将上述重组慢病毒感染小鼠肺上皮细胞TC-1,经嘌呤霉素抗性筛选获得稳定表达gp160基因的TC-1细胞.采用RT-PCR、流式细胞术检测gp160基因在细胞内的表达稳定性,将稳定表达Gp160蛋白的TC-1-HIV AE gp160细胞接种小鼠,用免疫组化方法检测小鼠体内细胞团块中HIV Gp160蛋白的表达.结果:菌落PCR、酶切鉴定和测序表明重组质粒pLVX-AE gp160构建正确,RT-PCR、GFP荧光及流式细胞术结果均显示gp160基因能在细胞TC-1中稳定表达,免疫组化结果也表明小鼠体内接种的细胞可以稳定表达HIV Gp160蛋白.结论:建立了稳定表达HIV-1 CRF01_AE亚型Gp160蛋白的TC-1细胞及小鼠模型,为HIV-1 CRF01_AE亚型HIV疫苗的临床前研究提供了可靠的体外、体内免疫原性评价工具,为该疫苗的进一步开发奠定了坚实的实验基础.

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2021/07/20

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刚地弓形虫抗肿瘤作用及其机制研究进展

刚地弓形虫是一种重要的机会致病性原虫,严重威胁着人类健康,但弓形虫虫体、培养上清/排泄分泌抗原、裂解抗原、分泌蛋白均被证实具有显著的抗肿瘤作用.其中,诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤组织新生血管生成以及增强宿主自身免疫细胞功能的机制在弓形虫抗肿瘤过程中发挥着关键作用.本文综述了弓形虫抗肿瘤作用的研究进展,以及虫体及其相关组分抗肿瘤作用的相关机制.

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2021/07/20

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小鼠颅脑爆震伤早期评估预测研究

目的 探讨小鼠颅脑爆震伤的早期评估指标.方法 将20只小鼠平均分为正常对照组和创伤性脑损伤(bTBI)模型组,每组各10只.建立爆震伤动物模型后15 d内,观察小鼠脑部经冲击波暴露后意识丧失持续时间、创伤后记忆缺失持续时间等表现;采用HE染色、蛋白质印迹法等方法对小鼠脑组织病理改变进行分析,观察两组小鼠脑组织中的S-100β、髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)指标变化及mRNA的表达情况.结果 建模后,bTBI模型组小鼠无死亡.建模3 h内,小鼠均清醒,行动较迟缓,4 h小鼠进食、水,活动速度有所增加,但与正常对照组相比较,活动较迟缓.建模后7、14 d,bTBI模型组小鼠进入平台的次数均明显少于正常对照组,两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05).建模后7、14 d,正常对照组小鼠找到平台位置的时间均明显短于bTBI模型组,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).小鼠的活动轨迹显示,正常对照组小鼠围绕平台的活动轨迹较规律,bTBI模型组的活动轨迹相对较分散.解剖后,bTBI模型组小鼠的脑组织边缘较钝,组织边缘棱角不清晰,有明显的水肿表现;正常对照组脑组织体积明显缩小,组织边缘清晰,可见明显的血管及组织结构.正常对照组小鼠海马区神经元细胞排列规则,无损伤;实验小鼠的脑组织中海马区神经元发生了变性,同时锥体细胞发生肿胀且不规则排列.bTBI模型组小鼠脑组织氧化应激指标s100β、NSE和MBP的表达量均显著高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 bTBI可降低小鼠的认知能力、损伤小鼠的海马区神经元等.通过建立bTBI早期筛选评估模型可知,检测大脑标志物s100β、NSE和MBP的表达变化,有助于对早期bTBI进行快速筛选识别.

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2021/07/20

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麻杏二三汤对COPD大鼠气道黏液高分泌MUC5AC、MUC5B表达的影响

目的 观察麻杏二三汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道黏液高分泌的影响.方法 36只SD大鼠随机分为正常组,模型组,阿奇霉素组,麻杏二三汤低、中、高剂量组,各6只.采用烟熏加气管内脂多糖滴入制备COPD模型.分别予以阿奇霉素及低、中、高剂量麻杏二三汤连续14 d灌胃干预,模型组予以等量0.9％氯化钠注射液.观察大鼠一般行为学表现;小动物肺功能仪检测大鼠肺功能指标;HE染色观察肺组织病理;酚红排痰实验检测气道黏液分泌;RT-PCR检测黏蛋白MUC5AC、MUC5B基因表达;Western blotting检测黏蛋白MUC5AC、MUC5B蛋白相对含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠肺组织HE染色符合COPD病理改变,肺阻力明显增加、肺顺应性明显下降(P<0.05),气道酚红排泌量及肺组织MUC5AC、MUC5B基因与蛋白明显增多(P<0.05).与模型组比较,阿奇霉素组及麻杏二三汤中、高剂量组大鼠肺阻力明显减低(P<0.05),气道酚红排泌量及肺组织MUC5AC、MUC5B基因与蛋白明显减少(P<0.05).结论 下调MUC5AC、MUC5B基因与蛋白表达可能是麻杏二三汤治疗COPD气道黏液高分泌的作用机制之一.

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2021/07/20

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不同剂量博来霉素滴鼻诱导C57BL/6小鼠肺纤维化模型的研究

目的 探讨以鼻腔滴注博来霉素(BLM)的方式诱导C57BL/6小鼠肺纤维化模型的最佳方法 .方法 7～8周龄雄性小鼠30只,分为0.10 u BLM组、0.25 u BLM组、0.40 u BLM组,每组8只,麻醉后分别一次性滴鼻0.10、0.25及0.40 u BLM;对照组6只,给予等体积的磷酸盐缓冲液.观察并记录小鼠体重变化与生存率,实验结束后处死小鼠.用甲醛固定肺组织,苏木精-伊红染色评价肺组织炎症变化;Masson染色评价肺纤维化变化.结果 给药后小鼠体重逐渐下降,并在第8和9天再次上升,第14天逐渐趋近于对照组,第28天BLM组所有小鼠肺部组织产生纤维化.各组肺纤维化评分比较,差异无统计学意义(P>0.05).但给药0.25与0.40 u BLM的小鼠死亡率高,个体间差异较大,不利于实验样本的收集与数据的统计分析.结论 0.10 u BLM滴鼻给药是复制C57BL/6小鼠肺纤维化模型便捷、理想的实验方法.

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2021/07/20

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白热斯丸对氢醌致C57BL/6小鼠白癜风模型的治作用及机制研究

目的 探讨白热斯丸对皮肤外涂氢醌建立脱色C57BL/6小鼠白癜风模型的治疗作用,为白热斯丸的临床前研究提供实验支持.方法 采川氢醌软膏外涂皮肤复制C57BL/6小鼠白癜风模型:C57BL/6小鼠,SPF级,32只,雌雄各半,检疫合格后用2.5％氢醌软膏外涂皮肤连续造模20 di.造模动物皮肤均出现白斑,根据随机数字表按皮肤白斑大小分组,分为空白对照组、模型对照组、白癜风胶囊组、白热斯丸治疗组,每组8只,雌雄各半.空白对照组与模型对照组按20 ml/kg给予等体积溶媒,其他各组给予相应药液,1次/d,连续30 d.隔天肉眼观察毛发脱色及脱色面积并拍照.治疗结束后摘眼球取血,分离血清采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定酪氨酸酶含量.取皮肤进行苏木精-伊红(HE)染色法对含黑色素的毛囊进行计数.结果 四组有黑色素的毛囊数所占比例、毛发脱色评分、血清酪氨酸酶含量比较,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05);与空白对照组比较,模型对照组有黑色素的毛囊数所占比例、血清酪氨酸酶含量降低,毛发脱色评分增大,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01);与空白对照组比较,白癜风胶囊组和白热斯丸治疗组有黑色素毛囊数所占比例减小,毛发脱色评分增大,差异均有高度有统计学意义(均P＜ 0.01),但两组血清酪氨酸酶含量与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);与模型对照组比较,白癜风胶囊组和白热斯丸治疗组有黑色素的毛囊数所占比例、血清酪氨酸酶含量增大,毛发脱色评分减小,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜ 0.01).白热斯丸治疗组有黑色素毛囊数所占比例、毛发脱色评分、血清酪氨酸酶含量与白癜风胶囊组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 白热斯丸能够促进酪氨酸酶含量增加,促进有活性的黑素细胞增生,从而促进黑素的生成,毛发脱色评分也明显降低,对C57BL/6小鼠白癜风模型有较好的治疗作用,并可能与白癜风胶囊有同样的治疗作用.

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2021/07/20

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子宫内膜缺血预处理在EMs细胞凋亡中的抑制作用

目的 研究子宫内膜缺血预处理对子宫内膜异位症(EMs)模型小鼠异位内膜细胞的凋亡抑制作用机制.方法 2018年9月至2019年6月于巴中市中医院动物实验室展开研究,构建子宫内膜缺血预处理和缺血小鼠模型,按照处理方式的不同,将受体鼠分为A组(未处理,作为对照)、B组(缺血预处理)、C组(缺血处理)、D组(缺血预处理+缺血处理)、E组(给予Akt抑制剂处理的缺血预处理+缺血处理),每组各16只.比较各组造模成功率及内膜存活率、各组小鼠移植内膜细胞凋亡率、各组小鼠移植内膜组织中Bax、Bcl-2、Akt蛋白及mRNA表达.结果 五组小鼠造模成功率及移植内膜存活率的比较差异均有统计学意义(χ2值分别为27.96、113.81,均P<0.05).C组移植内膜细胞凋亡率明显高于B组(t=27.51,P<0.05);D组移植内膜细胞凋亡率明显低于C组(t=8.33,P<0.05);E组移植内膜细胞凋亡率明显高于D组(t=9.14,P<0.05).五组小鼠Bax、Bcl-2及Akt蛋白表达水平比较差异均有统计学意义(F值分别为22.08、15.58、19.79,均P<0.05).五组小鼠Bax m RN A、Bcl-2 m RN A及Akt mRNA相对表达量比较差异均有统计学意义(F值分别为14.07、20.74、17.95,均P<0.05).结论 子宫内膜缺血预处理可起到有效阻滞EMs异位移植内膜细胞凋亡的作用,且这一抑制作用机制可能与PI3K-Akt信号通路磷酸化及影响Bax、Bcl-2等下游靶蛋白表达密切相关.

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2021/07/20

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