| 中文名称Chinese name
|
环磷酰胺诱导小鼠免疫抑制模型 |
| 编号Model number |
|
| 英文名称English name |
Model of cyclophosphamide induced murine Immunosuppression |
| 物种Species name |
小鼠
|
| 品系Strain name |
C57BL/6J小鼠
|
| 人类疾病Human diseases |
免疫功能抑制 |
| 传染性Infectivity |
无 |
| 微生物Microorganism |
|
| 类别Category |
诱发型动物模型 |
| 造模因素Modeling factors |
化学药物：腹腔注射环磷酰胺 |
| 制作方法Making method |
1 动物分组与模型制备 幼年（3周龄，10 g左右）、青年（8周龄，22 g左右）、老年（14月龄，30 g左右）雄性C57BL/6J小鼠（SPF级）各32只购于北京华阜康生物科技股份有限公司，合格证号SCXK（京）2014-0004。各年龄小鼠分组情况如下：①对照组：12只，②CTX组：20只。CTX组成年鼠、老年鼠腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，分两次隔天给药，50mg/kg/次。幼年鼠环磷酰胺剂量为72mg/kg【同种动物间剂量换算公式：Dose(b)=Dose(a)×(Wb/Wa)2/3,W为体重(Kg)】，分两次隔天给药，36mg/kg/次。对照组腹腔注射等剂量生理盐水。分别于给药后第3天，7天，2周，4周检测各年龄小鼠（每次检测对照组3只，CTX组5只）。 2主要试剂与仪器 NK1.1 ，CD11b， F4/80，CD4，CD25，Foxp3抗体购自eBioscience公司；Foxp3 Buffer Set，CD8a，B220抗体购自BD公司。注射用环磷酰胺购自江苏恒瑞医药股份有限公司（产品批号：14092925）。小鼠ELISA试剂盒购自杭州联科生物技术股份有限公司（产品批号：70-E-EK2742(IgA) 、70-E-EK2712(IgG)、70-E-EK2762(IgM)）。137Csγ射线照射源，加拿大原子能有限公司，GAMMA-CELL40，剂量率0.80Gy/min。流式细胞仪C6（美国BD），全自动血液分析仪MEK-7222K（日本光电），酶标仪MK3（Thermo Multiskan） |
| 生物学特征Biological characteristics |
|
| 医学用途Medical use |
特殊人群安全用药研究。 |
| 临床表现Clinical manifestation |
给药后，对比WBC结果发现，成年鼠白细胞数在第3天降到52%（为了更好地反映不同年龄小鼠损伤及恢复的规律，设各年龄小鼠空白对照数据为100%，以给药组测定值/空白对照组测定值×100%作图，下同），至第7天即可恢复正常水平。幼年鼠变化趋势与成年鼠相似。老年鼠白细胞数在第3天降到27%，下降幅度远大于成年鼠，且4周后只能恢复至42%。 对比中性粒细胞比例发现，成年鼠中性粒细胞比例在第7天升高到130%，2周后可恢复至正常水平。幼年鼠中性粒细胞比例在第7天升高到221%，升高幅度大于成年鼠，2周后亦可恢复至正常水平。老年鼠中性粒细胞比例在第7天下降到59%，趋势与成年鼠相反，4周后未能恢复到正常水平。 对比淋巴细胞比例发现，成年鼠淋巴细胞比例在第7天小幅下降，下降到85%，2周后可恢复到正常水平。幼年鼠变化趋势与成年鼠相似。老年鼠淋巴细胞比例在给药后第3天即上升到119%，至第7天基本维持该水平，2周后可恢复到正常水平。 对比胸腺指数发现：成年鼠胸腺指数在给药后第3天下降至58%，至第28天，只能恢复至77%。幼年鼠损伤及恢复情况与成年鼠相似。老年鼠胸腺指数在给药后第3天未有明显变化，第7天下降至55%，降至最低值时间晚于成年鼠，第14天后可恢复至正常值。 对比脾脏指数发现：成年鼠脾脏指数在第3天下降至73%，第7天略有升高，第14天后可恢复至正常值。幼年鼠在第7天下降至68%，降至最低值时间晚于成年鼠，恢复情况与成年鼠相似。老年鼠在第3天下降至40%，下降程度高于成年鼠，至第7天，基本维持损伤水平，恢复情况与成年鼠相似。 给药后，对比CD4+T细胞比例发现：成年鼠在给药3天后显著降低至36%，7天后可恢复至正常值，但是4周后再次下跌至26%。幼年鼠在给药3天后，CD4+T细胞比例小幅下降至89%，7天后即可恢复至正常值，变化趋势与成年鼠不同。老年鼠损伤、恢复情况与成年鼠类似。 对比CD8+T细胞比例发现：成年鼠在给药3天后，CD8+T细胞比例显著下降至35%，7天后可恢复至正常值，但4周后再次下跌至13%。幼年鼠在给药3天后，CD8+T细胞比例下降至71%，7天后即可恢复至正常值范围，变化趋势与成年鼠不同。老年鼠损伤、恢复情况与成年鼠类似。 对比CD4+CD8+T细胞比例发现：成年鼠在给药3天后，CD4+CD8+T细胞比例显著下降至18%，7天后可恢复至正常值，但4周后再次下降至3%。幼年鼠在给药3天后，CD4+CD8+T细胞比例下降至63%，第7天可恢复至正常值范围，至第28天，再次下降至77%，变化趋势与成年鼠不同。老年鼠损伤、恢复情况与成年鼠类似。 给药后，对比B细胞比例：成年鼠在给药后，B细胞比例持续走低，第14天达最低值43%，4周后可恢复至86%。幼年鼠、老年鼠在给药后，B细胞比例无明显变化，均与成年鼠变化趋势不同。 对比Treg细胞比例发现：成年鼠在给药3天后，Treg细胞比例下降至59%，至第7天下降至最低值4%，4周后可恢复至126%。幼年鼠损伤情况与成年鼠类似，但4周后仅能恢复至66%。老年鼠损伤、恢复情况与成年鼠类似。 给药后，对比NK细胞比例发现：成年鼠在给药7天后NK细胞比例下降至 29%，至第28天，经过小幅反跳后恢复至106%。幼年鼠在给药后第3天，NK细胞比例无明显变化，至第7天，上升至149%，至第28天依然维持该水平，变化趋势与成年鼠不同。老年鼠在给药3天后，NK细胞比例下降至53%，至第28天，依然维持该水平，变化趋势与成年鼠不同。 对比B细胞绝对数发现：成年鼠在给药后第3天，B细胞比例骤降至2%，至第7天，可恢复至45%，第14天反跳至122%，4周后回落到57%。幼年鼠损伤及恢复趋势与成年鼠类似，恢复情况优于成年鼠。老年鼠在给药后第3天，B细胞比例骤降至1%，至第7天，可恢复至25%，至第28天，一直维持该水平，恢复趋势与成年鼠不同，且恢复能力弱于成年鼠。 对比巨噬细胞比例发现：成年鼠在给药3天后，巨噬细胞比例骤降至20%，至第7天反跳至192%，至第28天可恢复至正常值。幼年鼠变化趋势与成年鼠类似。老年鼠：在给药后第3天，巨噬细胞比例骤降至14%，至第7天回升到144%，至第28天回落到56%，变化趋势与成年鼠不同，见图5-C。 对比CD4+T细胞绝对数发现：成年鼠在给药3天后，CD4+T细胞比例骤降至4%，至第7天即可恢复正常值范围。幼年鼠在给药3天后，CD4+T细胞比例下降至30%，至第7天仅能恢复至47%，第14天可恢复正常值范围，恢复能力弱于成年鼠。老年鼠在给药3天后，CD4+T细胞比例骤降至1%，7天后仅能恢复至58%，第14天小幅回升，至第28天跌至63%，恢复情况弱于成年鼠。 对比CD8+T细胞绝对数发现：成年鼠在给药3天后，CD8+T细胞比例骤降至3%，至第7天，可恢复至70%，第14天时小幅回升，至第28天可恢复至正常值。幼年鼠在给药后第3天，CD8+T细胞比例下降至20%，7天可恢复至39%，2周时可恢复至122%，恢复能力弱于成年鼠。老年鼠在给药后第3天，CD8+T细胞比例骤降至3%，至第7天可恢复至83%，此后仍维持该水平，恢复情况弱于成年鼠。 给药后，对比血浆IgA含量发现：成年鼠在给药后第3天，IgA含量下降至7%，至第2周，依然维持在较低水平，至第4周可恢复至83%。幼年鼠在给药后第3天，IgA含量下降至62%且至第4周可完全恢复。损伤恢复情况优于成年鼠。老年鼠变化趋势与成年鼠基本一致。 对比血浆IgG含量发现：成年鼠在给药后第3天，IgG含量骤降至5%，至第7天，依然维持较低水平且4周只能恢复至原来的50%。幼年鼠在给药后第7天，IgG含量下降至38%，至第2周即可完全恢复。老年鼠损伤情况与幼年鼠相似，但恢复缓慢，至第4周只能恢复至75%。 对比血浆IgM含量发现：成年鼠在给药后第3天，IgG含量降至37%，至第4周可完全恢复。幼年鼠、老年鼠变化情况与成年鼠基本一致。 |
| 病理表现Pathology |
|
| 发病天数Days of onset |
4w |
| 发病过程Pathogenesis process |
给药后3d、7d幼年、成年、老年鼠外周血细胞、淋巴细胞、脏器指数明显下降；4周后幼年、成年鼠各项指标恢复甚至反弹，老年鼠恢复慢。 |
| 临床诊断Clinical diagnosis |
给药后袁与成年鼠相比，幼年鼠胸腺 CD8+T 细胞、CD4+CD8+T 细胞、血浆 IgA、IgG 损伤恢复情况更好；脾脏 Treg 细胞恢复情况较差；与成年鼠相比，老年鼠脾脏指数下降更明显，外周血 NK 细胞、B 细胞、中性粒细胞、CD4+ T细胞恢复情况较差；白细胞数下降更明显且预后较差。 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
CTX处理后3d、7d出现免疫细胞功能明显下降。 |
| 保藏单位Preservation unit |
中国医学科学院医学实验动物研究所 |
| 参考文献Reference |
1. 林帅，陈孟毅，刘冰，李程程，李德冠，吴丽贤，孟爱民. 环磷酰胺对不同年龄小鼠免疫细胞损伤及修复作用的影响. 中国医药导报，2016，13（36）：8-13,35 2. 陈孟毅, 林帅, 吴丽贤, 刘冰, 李程程, 李德冠*, 孟爱民*. 不同年龄小鼠造血系统辐射损伤与修复的比较观察 [J] .国际放射医学核医学杂志,2019,43( 5 ): 442-449. |
| 录入/更新时间Date |
2022.1.10 |
| 备注Remarks |
|
当前位置：
