| 中文名称Chinese name
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手足口病柯萨奇病毒A10型腹腔感染小鼠模型 |
| 编号Model number |
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| 英文名称English name |
Coxsackievirus A10 infected mice model |
| 物种Species name |
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| 品系Strain name |
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| 人类疾病Human diseases |
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| 传染性Infectivity |
是 |
| 微生物Microorganism |
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| 类别Category |
病原感染性动物模型 |
| 造模因素Modeling factors |
CA10病毒 |
| 制作方法Making method |
1. 病毒准备：CA10病毒(GenBank: MF688814.1)，由医院咽拭子分离得到，在人横纹肌瘤细胞（RD）中培养、扩增，并采用反复冻融法释放病毒，离心富集病毒。具体操作如下：
RD细胞经常规传代培养接种到T75细胞培养瓶，感染前弃去原培养基，细胞用含2%双抗的PBS 洗2遍，吸出PBS后加入无血清DMEM培养基。接种适量的CA10病毒后，置37℃ 5% CO2培养箱孵育1-2h；加入完全培养基继续培养。接种病毒后2-3d病变CPE达到+++～++++，将T75细胞瓶置封口袋中，-80℃超低温冰箱冻化3次。然后将培养液转移至50mL离心管中，4℃，2000rpm离心20min，沉淀细胞碎片。吸取病毒上清，分装后冻存，并测定病毒滴度TICD50。
2. 实验动物：采用SPF级7日龄ICR小鼠乳鼠，母鼠自然哺乳，在ABSL-2实验室独立饲养。CA10动物模型建立实验通过IACUC审核，符合动物实验要求。
3. 病毒感染：根据预实验确定的感染剂量，即104 TCID50 CA10病毒，将病毒经腹腔注射感染小鼠，注射剂量为100μl。对照组注射同等量的RD细胞上清。 |
| 生物学特征Biological characteristics |
小鼠感染CA10病毒后表现出典型的症状，即出现后肢单肢或双肢瘫痪，直至死亡；在感染动物血液和肌肉组织中可检测到高病毒载量的CA10病毒，表明病毒在血液和组织中大量扩增.
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| 医学用途Medical use |
用于CA10病毒感染、发病机制研究，以及病毒疫苗研制和抗病毒药物的药效学研究 |
| 临床表现Clinical manifestation |
7日龄ICR小鼠感染CA10病毒4天后，出现不同程度的临床症状，症状由轻到重包括：驼背或炸毛，后肢无力，单后肢瘫痪，双后肢瘫痪，严重的直至死亡。感染后第5天，感染小鼠临床症状评分超过4分；感染后第7天，感染小鼠全部死亡。相对于正常组小鼠，感染小鼠体重增加减缓，从感染第1天的5.57g增加到第6天的7.33g，而正常小鼠从5.64g增加到8.03g。感染后第1天血液和肌肉组织中病毒载量都低于检测阈值，到第3天血液中病毒载量超过1.5X106 copies/μl，第5天病毒载量超过3X104 copies/μl。后肢肌肉病毒载量在感染后第3天为1.2X107 copies/mg-5.8X107 copies/mg，第5天为1.8X107 copies/mg-1.3X108 copies/mg。 |
| 病理表现Pathology |
动物经腹腔注射感染CA10病毒后，病毒进入血液并进行复制，再经血液进入后肢肌肉组织，大量扩增从而引发临床症状，相应的临床症状由轻到重包括：驼背或炸毛，后肢无力，单后肢瘫痪，双后肢瘫痪，严重的直至死亡。 |
| 发病天数Days of onset |
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| 发病过程Pathogenesis process |
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| 临床诊断Clinical diagnosis |
病毒感染后，每天测量动物体重、观察动物临床症状、记录死亡率；并于感染后第1天、第3天、第5天采集血液样本和肌肉样本，用于检测病毒载量和病理情况。临床评分标准：驼背或炸毛（1分），后肢无力（2分），单后肢瘫痪（3分），双后肢瘫痪（4分），严重的直至死亡（5分）。血液和肌肉组织样本提取RNA后利用特异性引物进行荧光定量PCR检测，根据标准品得到的标准曲线测定其中的病毒载量。 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
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| 保藏单位Preservation unit |
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| 参考文献Reference |
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| 录入/更新时间Date |
12-03-20 |
| 备注Remarks |
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当前位置：
