酵母双杂交筛选与星状病毒衣壳蛋白ORF2互作的宿主蛋白

文献名称Document name	酵母双杂交筛选与星状病毒衣壳蛋白ORF2互作的宿主蛋白
编号Document number
PMIDPMID number
作者Author	李香雨,于漫,聂梓陶,等.
中文摘要Abstract in Chinese	目的筛选人星状病毒?(HAstV)?衣壳蛋白ORF2与宿主细胞互作的蛋白质.方法构建HAstV?ORF2蛋白的重组载体pGBKT77-ORF2,以其作为诱饵质粒,采用酵母双杂交方法,从人结肠癌细胞Caco-2?cDNA文库中筛选与ORF2蛋白互作的蛋白.以HAstV-1病毒株的衣壳蛋白为模板,通过PCR扩增定向克隆构建诱饵载体pGBKT7-ORF2.通过菌落PCR和测序验证质粒在酵母细胞Y2H中正确表达.明确ORF2蛋白对酵母细胞无毒性,无自激活活性.将含有pGBKT7-ORF2的酵母菌株与靶标Caco-2?cDNA文库进行杂交、筛选、验证及测序.结果获得15个与ORF2互作的宿主蛋白,分别为FN1、COMMD1、RASAL2、BMP4、RPL11、RBM8A、SUMO1、WWC2、NGDN、HINFP、RPS7、IMMT、UBE2I、EEF1A1和FTL.结论成功筛选出15个与HAstV?ORF2互作的蛋白,为研究星状病毒与宿主相互作用、ORF2蛋白功能及病毒的致病机制奠定了基础.
英文摘要Abstract in English
关键词Key word	星状病毒, 酵母双杂交, ORF2蛋白, 蛋白互作, cDNA文库筛选
发表杂志Journal	中国医科大学学报,Journal of China Medical University,2021,50(6)
发表年份Year	2021
录入/更新时间Date	2021/07/20