| 中文摘要Abstract in Chinese |
目的 探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的最佳干预时间及浓度,并鉴定其向成骨细胞分化的能力.方法 体外分离培养新西兰大白兔BMSCs原代细胞,选用3代细胞用于PDGF-BB干预实验.将筛选好的细胞接种于96孔培养板中,分为空白组:加DMEM完全培养基;对照组:BMSCs+DMEM完全培养基;其余各组采用PDGF-BB干预浓度分别为10、25、50、100 ng/mL.分别于干预的24、72、120、168 h用CCK-8法检测每组浓度对细胞的增殖作用,筛选出PDGF-BB对BMSCs干预的最佳时间及浓度.诱导后的细胞用细胞免疫化学法鉴定骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、Runt相关转录因子2(Runx-2)、Ⅰ型胶原(COL-IA1),免疫荧光鉴定OCN.结果 在不同的时间点PDGF-BB干预BMSCs的吸光度值改变不同,差异有统计学意义(F=441.351,P<0.01),表明不同浓度PDGF-BB干预BMSCs后,细胞增殖是不同的.25 ng/mL PDGF-BB组与其他5组比较差异均有统计学意义(P<0.01),干预72 h增殖率最高.诱导后的细胞免疫化学染色OCN骨钙素、Runx-2、COL-1均为阳性,OCN骨钙素的免疫荧光表达也是阳性,且阳性率>90％.结论 25 ng/mL PDGF-BB组干预BMSCs在72 h是对细胞增殖作用最强,诱导后的细胞可以分化为成熟的成骨细胞,为下一步诱导后细胞移植治疗牵张成骨模型奠定了基础. |
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