| 文献名称Document name |
SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法测定猴免疫缺陷病毒(SIV)前病毒DNA拷贝数方法的建立 |
| 编号Document number
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| PMIDPMID number
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| 作者Author |
丛喆, 涂新明, 李兆忠, 许琰, 蒋虹, 佟巍, 卢圣栋, 魏强 |
| 中文摘要Abstract in Chinese |
目的 建立SYBR Green Ⅰ荧光染料实时定量PCR方法,测定猴免疫缺陷病毒(SIV)前病毒DNA.方法 巢式RT-PCR扩增SIVmac251病毒RNA gag基因上1360-1837之间的长度为477 bp的片段,将该片段克隆到pGEM T载体上,构建pGEM-SIVgag477质粒.该质粒经大量扩增纯化后定量,10倍系列稀释后,做出标准曲线,作为SIV前病毒DNA荧光定量检测的外标准品.结果 应用Roche公司FastStart DNA Master SYBR Green Ⅰ Kit,该标准品可精确定量到10 copies/μL.结论 制备的pGEM-SIVgag477质粒外标准品纯度高,SYBR Green Ⅰ荧光染料实时定量PCR法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)前病毒DNA载量. |
| 英文摘要Abstract in English
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| 关键词Key word |
猴免疫缺陷病毒, 前病毒DNA, 实时荧光定量PCR, SYBR Green Ⅰ |
| 发表杂志Journal |
中国比较医学杂志 |
| 发表年份Year
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2006 |
| 录入/更新时间Date |
2021.7.1 |