应用液氮损伤建立兔动脉粥样硬化易损斑块模型的研究

目的 研究应用液氮温控气体损伤动脉血管内皮并结合高脂饮食的方法 建立兔动脉粥样硬化易损斑块模型的方法 .方法 24只雄性新西兰兔随机均分成3组,每组8只.实验组在手术后给予液氮温控气体损伤兔左颈总动脉内膜,并继续给予高脂饲料喂养3个月;假手术组仅手术操作,术后继续高脂饲料喂养3个月;空白对照组不行任何操作,给与普通饲料喂养3个月.3组动物在处死前均行鲁塞尔蝰蛇毒+组胺药物触发斑块不稳定,动物在处死后,取左颈总动脉行HE染色后观察血管形态变化,并取血分析炎症细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在三组中的血清学表达.结果 3个月后,与假手术组和空白对照组相比,实验组有明显易损斑块形成,且炎症因子IL-2、IL-10、TNF-ɑ表达较假手术组和空白对照组均有明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 液氮温控气体损伤并结合高脂饮食的方法 可成功建立动脉粥样硬化易损斑块模型,且与动脉粥样硬化相关的炎症细胞因子(IL-2、IL-10、TNF-α)表达明显增加.

2020

2021/07/20

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独立通风笼具(IVC)技术指标检测及参数稳定性评价

目的 探讨IVC技术指标的检测方法并评价IVC参数的稳定性.方法 依据GB 14925-2010与DB32/T 972-2006标准规定的方法,对摆放在普通环境和屏障环境的IVC进行检测,分析IVC微环境对外环境技术指标的依赖程度,比较不同换气次数测定方法的差异,并计算各指标的相对偏差和笼盒泄漏率.结果 IVC微环境的温度、湿度与外环境参数正相关;依据GB14925-2010附录方法测定的笼盒内换气次数明显高于流量计法的测定值(t-test,P=0.0001);IVC笼架对角线上5个笼盒的换气次数、噪声、风速的相对偏差较小,但静压差的相对偏差较大;IVC笼盒泄漏率检测结果高达75％.结论 IVC的使用受制于外环境条件,笼架不同位置的笼盒内静压差的稳定性差,与较高的笼盒泄漏率相关,研究结果可为IVC国家或行业准制(修)订提供参考.

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2021/07/20

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草果总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺优化研究

目的:建立草果总黄酮的含量测定方法,并对其大孔吸附树脂纯化工艺进行优化.方法:采用高效液相色谱法测定草果中总黄酮的含量.色谱柱为Eclipse Plus C18,流动相为乙腈-1％醋酸水溶液(15:85,V/V),柱温为40℃,流速为0.8 mL/min,检测波长为256 nm,进样量为10μL.以吸附、解吸性能为考察指标,采用静态吸附和解吸试验对6种大孔吸附树脂进行筛选,采用静态吸附和解吸动力学试验考察吸附和解吸时间.在单因素试验的基础上,以总黄酮含量(以芦丁计)为评价指标,以上样液质量浓度、上样液pH、乙醇体积分数及洗脱用量为考察因素,采用正交设计优化草果总黄酮的纯化工艺并进行验证试验.结果:芦丁检测质量浓度的线性范围为0.028～0.281 mg/mL(r=0.9999);定量限为437.5 ng/mL,检测限为109.4 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2％,加样回收率为96.24％～99.75％(RSD<2％,n=6).HPD450型大孔吸附树脂对草果总黄酮的静态吸附和解吸综合能力最适中,最佳静态吸附与解吸时间均为12 h.最优纯化工艺为上样质量浓度1.8544 mg/mL,上样液pH 7,乙醇体积分数60％,乙醇洗脱用量8倍柱体积.验证试验显示,按最优工艺纯化后的草果总黄酮含量由纯化前的22.5567 mg/g上升至57.7282 mg/g,纯化倍数为2.56(n=3).结论:所建含量测定方法灵敏度高、稳定性好,优化的纯化工艺稳定、可行,可用于草果总黄酮的纯化.

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2021/07/20

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5-羟基-1-甲基海因对百草枯中毒所致肺损伤保护作用的代谢组学研究

目的 探讨5-羟基-1-甲基海因(HMH)对百草枯(PQ)中毒所致肺损伤的保护作用及其机制.方法 采用随机数字法将30只SPF级小鼠分为生理盐水(NS)组、PQ组和HMH组,每组10只.取各组小鼠肺组织行代谢组学分析;切片并行HE染色,观察肺组织形态学改变;检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;用Western blotting检测肺组织血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达情况.结果 光镜下,PQ组肺组织可见大量炎症细胞浸润,出血明显,肺泡腔透明膜形成;HMH组肺泡结构轻度损坏,少量炎症细胞渗出及出血.与NS组相比,PQ组和HMH组肺组织的MDA含量显著升高,SOD活性显著下降,PQ组HO-1蛋白表达增高;与PQ组相比,HMH组SOD活性及HO-1蛋白表达增高,MDA含量降低.与PQ组比较,HMH组N-乙酰天冬氨酸、谷氨酸、天冬氨酸等氨基酸含量增加;腺苷5'-磷酸、甲基丙二酸、胞嘧啶核苷、甲基富马酸升高;亚牛磺酸、苯甲酰S-二氧化物、磷酸乙酸含量升高;皮质甾酮、前列腺素G、4-吡哆酸、柠檬酸、黄嘌呤含量降低.结论 HMH能提升PQ中毒损伤肺组织的SOD活性,降低MDA水平,增加HO-1蛋白表达,并能纠正PQ导致的三羧酸循环紊乱,改善脂质过氧化,影响嘌呤、嘧啶和氨基酸的代谢.

2020

2021/07/20

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犬咬伤后罕见病原菌致伤口感染1例

犬咬伤可导致软组织损伤,由于犬口腔内细菌含量较高,咬伤后易引起伤口化脓性感染,形成蜂窝织炎,致皮下、筋膜下和肌间等处的疏松结缔组织的弥漫性化脓性炎症,严重者可危及生命[1].本院微生物实验室于2019年2月6日从犬咬伤患者伤口分泌物中同时分离出动物溃疡伯杰菌、羊链球菌和口腔巴斯德菌3种临床罕见菌株,并对目前国内外以上3种菌株感染案例报道进行汇总,以提高对3种菌株及其感染特征的认识,为临床诊断及治疗提供参考.

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2021/07/20

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慢性胃炎"炎癌转化"病证结合大鼠模型建立中的难点问题及应对策略

慢性胃炎"炎癌转化"是胃癌发生的主要途径,在此阶段进行积极应对,对于降低胃癌发生率具有重要意义.然而由于目前在造模方法、模型评价、模型构建思路、模型证候判定等方面存在诸多瓶颈问题,制约了该领域基础及应用研究的开展.就此,基于本团队近5年的研究成果,结合国内外研究进展,围绕慢性胃炎"炎癌转化"病证结合动物模型建立中的难点,逐一进行分析并提出应对策略;同时模拟临床多因素致病的特点,提供了2种以N-甲基-N'-硝基-亚硝基胍(MNNG)为主要造模因素的大鼠模型制备方案,相较于现有模型,具有符合临床特征、成模率高、稳定性好等优势,是该领域动物实验研究的有力工具.

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2021/07/20

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重症甲型H1N1流感病毒感染诱导小鼠胸腺凋亡萎缩

目的:探讨重症流感病毒感染介导的胸腺萎缩及其作用机制.方法:4～6周龄SPF级BALB/c小鼠滴鼻给予50μl TCID50甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(1×106个/ml),构建重症流感病毒感染小鼠模型;检测各感染时间小鼠体质量、胸腺大小及重量;HE染色检测胸腺组织病理变化;流式细胞术检测胸腺内不同发育阶段T细胞数量及凋亡;原位TUNEL法检测胸腺细胞凋亡;细胞凋亡相关基因芯片和荧光定量PCR检测验证促凋亡和抗凋亡相关基因变化.结果:成功建立小鼠重症甲型H1 N1流感病毒感染模型.感染2～3 d后小鼠胸腺萎缩变小,以胸腺皮质区萎缩为主,感染5～7 d皮质区完全消失.主要存在于皮质区的双阳性T细胞(CD4+CD8+),随感染过程进展逐渐减少直至消失.细胞凋亡,尤其是皮质区细胞凋亡增多是胸腺萎缩的重要原因.促凋亡相关基因表达增加,尤其Fas介导的细胞凋亡可能是胸腺皮质区细胞凋亡的重要机制.结论:重症流感病毒感染可诱导胸腺(尤其是皮质区)萎缩,FasL-Fas介导的细胞凋亡是胸腺萎缩的重要原因.

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2021/07/20

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苦楝提取物对捻转血矛线虫卵和幼虫活性的影响

为初步探讨苦楝对捻转血矛线虫的作用,本试验通过观察苦楝提取物对虫卵和幼虫活性及形态变化的影响,评估其对捻转血矛线虫的驱虫活性,以期为家畜捻转血矛线虫病的防控及植物驱虫药物的研发奠定基础.试验对苦楝水提取物和乙醇提取物设置5个浓度(25、12.5、6.25、3.125、1.562 mg/mL)进行虫卵孵化试验和幼虫活性试验,对不同浓度药物处理的虫卵及幼虫进行计数,并观察药物作用后虫卵和幼虫的孵化状态及形态变化.结果 显示,正常孵育的虫卵和幼虫活力良好,苦楝提取物作用48 h后,虫卵呈未孵化、半孵化状态,发育至桑葚期、蝌蚪期及幼虫期死亡,并且各浓度苦楝水提物和醇提物对虫卵均具有抑制作用,其中苦楝皮醇提物对虫卵孵化的抑制效果最佳,在浓度25 mg/mL时,对虫卵孵化的抑制率高达98.2％,在12.5 mg/mL时,苦楝子醇提物对虫卵的抑制率极显著高于苦楝皮醇提取物(P＜0.01).苦楝子提取物对感染性三期幼虫的致死效果较差,在50 mg/mL时对幼虫有较高致死率(82.6％).苦楝皮水提取物在浓度为50 mg/mL时对幼虫的致死效果尤为突出,幼虫死亡率为97.0％,死亡的幼虫呈“直线型”或“弓型”.经方差分析,在12.5～50 mg/mL浓度范围内,相同浓度苦楝水提取物之间的致死率存在显著或极显著差异(P＜0.05;P＜0.01),同浓度苦楝醇提取物对幼虫的致死率存在极显著性差异(P＜0.01).综上所述,苦楝提取物对体外的捻转血矛线虫卵和感染性三期幼虫的活性均有抑制作用,其中25 mg/mL苦楝皮醇提物对虫卵孵化的抑制效果最佳,50 mg/mL苦楝皮水提物对感染性三期幼虫的致死作用最好.

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2021/07/20

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鹅不食草中抗肺癌活性成分筛选及异戊酸心菊内酯单体的体外作用研究

目的 在32个鹅不食草单体化合物中筛选具有抗肺癌活性的有效成分,并探究其单体异戊酸心菊内酯的体外抗肺癌作用.方法 MTT比色法检测化合物对5种人肺癌细胞系的增殖抑制作用,筛选出活性较好的化合物,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测p-ERK、ERK、p-AKT、AKT、NF-κB表达.结果 有10种(31.3％)成分在20 μmol/L浓度下能使H460、A549细胞的增殖活性抑制15％以上.阿里二醇、6-氧-当归酰多梗白菜菊素、异戊酸心菊内酯在2.5 ～ 20μmol/L浓度范围内对肺癌细胞具有较明显的抑制作用,随着化合物浓度的升高,细胞增殖抑制作用增强,诱导肺癌细胞凋亡的作用也增强(P＜0.01).Western blot结果显示,与对照组比较异戊酸心菊内酯能以浓度依赖性的方式活化caspase-3、caspase-8,使其活化片段表达增高(P＜0.01),而caspase-3底物PARP被降解,同时显著抑制了H1975细胞增殖相关蛋白p-ERK、p-AKT及核转录因子NF-κB的表达(P＜0.05).结论 鹅不食草含有多种具有抗肺癌活性的成分,能显著抑制肺癌细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制p-ERK、p-AKT及NF-κB的表达有关.

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2021/07/20

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布-加综合征模型的构建及进展

布-加综合征是由肝静脉或其开口以上的下腔静脉阻塞引起的门静脉高压伴或不伴有下腔静脉高压的临床综合征,中国人群主要以下腔静脉隔膜形成和(或)阶段性合并肝静脉梗阻为特征.目前人们对布-加综合征的病因和发病机制所知甚少,所做研究多为诊治策略方面的临床研究,针对其发病机制的实验探索相对稀缺,而稳定模型往往是疾病机制研究的必要条件.就目前布-加综合征模型的构建方法 、各种模型的特点和研究进展作一综述和分析,以便为该病病因和发病机制的探索提供可靠的实验基础.

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2021/07/20

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