白藜芦醇对1型糖尿病小鼠骨组织代谢的影响

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol,RESV)对初发1型糖尿病骨损害的影响,为临床上治疗1型糖尿病继发骨损害提供有价值的思路和启示.方法 将NOD小鼠分为正常(N)组、糖尿病( DM)组、胰岛素(INS)组、白藜芦醇(RESV)组. N组、DM组用生理盐水灌胃,INS组用0. 2～0. 4 U/(kg·d)甘精胰岛素注射液进行皮下注射,RESV组用200 mg/( kg·d)白藜芦醇进行灌胃治疗,治疗8周后取右侧股骨应用Micro-CT进行微观结构观察,并用左侧股骨进行碱性磷酸酶染色.同时检测骨组织相关基因OCN、Runx2、PPARr、TRAP的表达水平.结果 ( 1) Micro-CT结果显示,与正常组相比,糖尿病组骨密度降低( P=0. 015),骨体积百分比降低(P=0. 049);与糖尿病组相比,白藜芦醇治疗组骨密度升高(P=0. 008),骨体积百分比升高(P=0. 014)、骨表面密度增加(P=0. 016),结构模型指数升高(P=0. 029);与胰岛素治疗组相比,白藜芦醇治疗组骨小梁数目明显增加(P=0. 018). (2)骨组织切片碱性磷酸酶染色显示,糖尿病骨小梁变细、减少,成骨细胞数目明显减少;与糖病组相比,胰岛素组及白藜芦醇组成骨细胞明显增多. (3)实时荧光定量PCR结果显示,与正常组相比,糖尿病组TRAP、PPARr表达量增加;与糖尿病组相比,胰岛素治疗组和白藜芦醇治疗组TRAP、PPARr表达量降低,Runx2表达量增加.结论 白藜芦醇通过减少骨吸收并促进骨形成改善1型糖尿病鼠的骨质破坏.

2020

2021/07/20

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软式内窥镜在腹部创伤中诊治作用的实验研究

目的 通过对腹部刀刺伤动物模型治疗的对照研究,探索软式内窥镜对腹部创伤的诊治作用.方法 16只比格犬随机分为内镜组(n=8)和开腹组(n=8);在软式内镜的视野下,用统一大小匕首刺中实验犬肝、脾、肠管、肠系膜血管制作动物创伤模型.造模成功30 min后对实验犬行救治,内镜组采用软式内窥镜经腹壁皮肤创口直接进入腹腔进行诊断和治疗,开腹组取腹部正中切口开腹进行诊治.比较2组实验犬的呼吸频率、心率、血压、血氧饱和度、创伤及手术情况、总手术时间、腹腔探查时间、病灶治疗时间,术后观察实验犬进食及饮水量、恢复正常进食量的时间、对外界刺激反应及体重变化情况.2周后处死并解剖,评估2组术中有无漏诊,观察并比较2组腹腔内有无感染灶、黏连等术后并发症.结果 内镜组仅通过体表创口进入腹腔治疗,其中有1只实验犬因视野受到出血的影响,无法诊断出血部位外,中转开腹,余均成功完成内窥镜下诊断和治疗,且2周后解剖诊断均证实术中诊断无误.2组在呼吸频率、心率、血压、血氧饱和度、手术成功率及术后存活率方面上差异均无统计学意义(P>0.05).内镜组与开腹组的总手术时间分别为(35.67±6.67)min与(19.72±1.55)min(Z=-3.240,P=0.001),腹腔探查时间分别为(15.50±3.28)min与(4.33±1.00)min(Z=-3.240,P=0.001),病灶治疗时间分别为(10.13±5.15)min与(5.43±0.52)min(Z=-2.606,P=0.009).除开腹组1只实验犬死亡外,其余存活的实验犬饮食、活动度、对外界刺激反应良好,体重无明显下降,内镜组24 h内恢复正常进食量比例85.71％(6/7)优于开腹组25.00％(2/8)(P=0.041),腹腔黏连发生率14.29％明显少于开腹组100％(P=0.001).结论 软式内窥镜治疗腹部创伤具有一定的诊治能力,具有二次创伤小、恢复快、并发症少等优点.临床上还需进一步评估其安全性及有效性.

2020

2021/07/20

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一起炭疽疫情病原的实验室检测

目的 通过对新龙县炭疽疫情进行病原学检测,分离鉴定病原菌,以期为疫情的处置和防控提供科学依据.方法 根据WS-283-2008炭疽诊断标准,采集此次疫情的患者的皮肤渗出液,病死牛和处死牛组织、及土壤标本进行炭疽芽孢杆菌的分离培养,对疑似的菌落进行革兰染色镜检,噬菌体裂解实验及青霉素抑制实验进行进一步鉴定.结果 从三号牛(击毙)的鼻腔组织、四号牛(击毙)的耳朵组织、二号(病死牛)的耳朵组织及自然死亡小牛的耳朵组织标本中,各分离到四株炭疽芽孢杆菌.之前当地疾控中心,也采集了疑似皮肤炭疽患者的疱疹液送检,进行了培养和涂片革兰氏染色都未检测出疑似菌.结论 突发皮肤炭疽中,采集宰杀的或病死动物标本,比采集疑似皮肤炭疽患者的标本更容易分离到炭疽芽孢杆菌;采取肉眼加显微镜下找原始平板中可疑的菌落做标记,按标记挑选可疑菌落进行进一步鉴定试验,比以往只在肉眼下挑可疑菌落,能快速分离到炭疽芽孢杆菌.

2020

2021/07/20

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体外实验用人工皮肤模型的研究简介

体外试验是研究经皮药物制剂、化妆品等活性成分的渗透动力学,从而预测活性成分经过人体皮肤渗透特性的重要手段.体外试验研究过程中,渗透介质的选择是人工皮肤膜扩散试验恰当反应活性成分经皮渗透特性的关键.国内外研究报道的渗透介质有动物皮肤、离体人体皮肤和人工皮肤膜型.本文对目前体外试验研究的渗透介质的使用情况,及活性成分体外实验研究与经皮特性的相关性进行了介绍,对介质的组成和特性进行了对比,并对未来人工皮肤模型的设计与发展进行了展望.

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2021/07/20

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电针“曲池”-“阳陵泉”缓解脑卒中大鼠痉挛状态脑突触结构可塑性的实验研究

目的:通过动物实验观察电针治疗对脑卒中痉挛状态下SD大鼠的神经损伤与肌张力情况,皮质运动区突触超微形态变化及大脑皮质内突触可塑性相关蛋白(synaptophysin,SYN;GABA transporter, GAT-1;post-synaptic density-95,PSD-95)表达的影响,揭示电针“曲池”-“阳陵泉”缓解痉挛的疗效及其作用机制.方法:将77只SD大鼠经两次随机分组分为电针组、假手术组、模型组、空白对照组,采用改良Zea-Longa线栓法+内囊注射NMDA受体法制备脑卒中肢体痉挛大鼠模型,行为学评分确认模型成功后,开始在双侧曲池、阳陵泉行电针治疗,每次30min,每日1次,持续5d.行为学检测神经功能与肌张力,电镜观察各组皮质突触的超微结构变化,采用逆转录-聚合酶链反应检测皮质中SYN、GAT-1、PSD-95相应mRNA的表达,采用蛋白质印迹法检测皮质中SYN、GAT-1、PSD-95相应蛋白的表达.结果:①Zea-longa神经功能评分与改良Ashworth肌张力评分结果显示,模型组评分增高(P＜0.01);与模型组相比,电针组评分降低(P＜0.05).②电镜图像观察,模型组较空白组、假手术组突触数量减少明显,囊泡数量减少密度不均,前后膜及间隙发生融合界限模糊,突触后细胞终末胞质变性溶解显著,突触后致密带的密度也下降;电针组较模型组的突触数量明显增多也相对密集,囊泡数量增多,新生的凹形突触增加,突触后致密物增厚,间隙变得规则紧致.未进行统计学分析.③同模型组比较,电针组SYN、GAT-1、PSD95蛋白与受体基因的表达均有升高(P＜0.01);而与空白对照组、假手术组比较,模型组SYN、GAT-1、PSD95蛋白与受体基因的表达均降低(P＜0.05).结论:电针“曲池”-“阳陵泉”能够改善了脑卒中后痉挛状态,其作用机制可能是调节大脑皮质内突触可塑性相关蛋白与基因的表达,促进了皮质突触的重塑,从而改善中枢神经系统的运动功能.

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2021/07/20

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复方蒲公英制剂幼龄大鼠重复给药毒性研究

目的 依据国内外药品监管部门关于儿科用药非临床安全性评价技术指导原则要求,考察幼龄大鼠重复给予复方蒲公英制剂后的毒性反应,为儿童临床试验提供参考.方法 144只幼龄(27日龄,Postnatal Day(PND)27)SD大鼠,随机分为溶媒对照组、低、中和高剂量组,每组36只,雌雄各半,分别每天灌胃(ig)给予纯水、复方蒲公英制剂1.2、3.8、12 g/kg,给药体积均为1 mL/100 g,每天2次,连续给药4周(28 d),恢复观察4周;于给药结束、恢复期结束检查时每组雌雄分别剖检10/18只、8/18只的动物.检测指标包括:常规毒性指标、生长发育、骨骼发育、行为学、性激素、免疫系统发育等.结果 高剂量(12 g/kg)组大鼠出现流涎,雄性体重及顶臀长增长减缓、摄食量降低,以及红细胞系部分指标异常(红细胞、血红蛋白降低,网织红细胞升高等),血清生化学部分脂代谢、糖代谢相关指标异常(总胆固醇、甘油三酯、血糖下降),部分尿液指标异常(酮体、蛋白质、白细胞、比重、pH值、微白蛋白升高),脾重量及系数升高,雄鼠IgG升高;脾、肝轻微/轻度髓外造血以及骨髓红系造血细胞轻度增生等,上述现象均在给药结束4周后恢复正常;对性征发育、骨骼系统发育、生长激素、行为记忆、眼科、性激素、骨髓细胞形态学等指标均未见明显毒性影响;中、低剂量组未见明显毒性影响.结论 在本剂量条件下,复方蒲公英制剂对幼龄大鼠(PND27～PND54)未观察到不良作用剂量(NOAEL)为3.8 g/kg;高剂量(12 g/kg)有一定的可逆性的毒性影响,主要毒性靶组织为血液红细胞.

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2021/07/20

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山茱萸新苷Ⅰ对成骨细胞的增殖及成骨分化的影响

目的 基于Wnt信号通路及内质网应激研究山茱萸新苷Ⅰ对大鼠原代成骨细胞的增殖及成骨分化的影响.方法 提取原代成骨细胞,CKK8实验检测在药物浓度下山茱萸新苷Ⅰ对成骨细胞增殖的影响;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测不同浓度山茱萸新苷Ⅰ干预下成骨细胞ALP 的活性情况;Real-time PCR检测 Wnt2、β-catenin、BMP2、OPG、NOX4、PERK基因mRNA的表达;Western blot检测Wnt2、β-catenin、PDI、CHOP和BIP蛋白表达量.结果 CKK8实验及ALP染色表明山茱萸新苷Ⅰ对成骨细胞增殖及分化有一定影响,不同浓度山茱萸新苷Ⅰ干预下成骨细胞出现不同程度的增殖;与空白对照组相比,山茱萸新苷Ⅰ组的Wnt2、BMP2、β-catenin、OPG、NOX4的mRNA表达水平显著升高( P＜0. 01),而PERK明显降低(P＜0. 01).与空白对照组相比,山茱萸新苷Ⅰ组的成骨细胞Wnt2、β-catenin、PDI蛋白表达量显著升高(P＜0. 01),CHOP表达亦有轻微上升,但不明显(P＞0. 05),而BIP的蛋白表达水平明显降低( P＜0. 01).结论 山茱萸新苷Ⅰ浓度为1 mmol/mL时在促进成骨细胞的增殖分化的作用上表现最佳,其能显著升高成骨细胞Wnt2、BMP2、β-catenin、OPG和NOX4的mRNA表达水平,而降低PERK的mRNA表达水平,升高Wnt2、β-catenin、PDI的蛋白表达量,降低BIP的表达量,在山茱萸新苷Ⅰ的干预下,Wnt信号通路及内质网应激途径对成骨活动的发生发展起着重要作用.

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2021/07/20

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不同强度跑步运动与二甲双胍联用对2型糖尿病并发骨质疏松大鼠的骨密度、骨吸收、胰岛素敏感性的影响效果研究

目的 讨论不同运动强度跑步与二甲双胍联用对2型糖尿病并发骨质疏松(diabetic osteoporosis,DOP)模型大鼠骨密度、骨吸收、胰岛素敏感性的影响效果,为在运动处方与药物处方联用方案中药物使用和运动强度的合理制定提供依据.方法 对120只SD大鼠购回后进行15 d适应性饲养.选取100只大鼠建立DOP动物模型,剩余20只大鼠正常饲养.检验DOP动物模型情况,建模成功的大鼠随机分为模型对照组(DM组)、二甲双胍组(metformin,MF组)、低强度跑步+二甲双胍组(LM组)、中强度跑步+二甲双胍组(MM组)、高强度跑步+二甲双胍组(HM组),正常饲养的20只大鼠为对照组(C组).全部大鼠进行前测,内容包括骨密度(bone mineral density,BMD)、空腹血糖浓度(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素水平(fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesteroll,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesteroll,HDL-C)、抗酒石酸盐酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)、尿脱氧吡啶喏啉(deoxypyridinoline,DPD)、生物力学性能等指标.前测结束后,各组大鼠按计划进行为期12周的干预,干预结束后进行后测.结果 大鼠体质量方面,在干预的第4、8、12周C组大鼠体质量显著高于DM组、LM组、MM组、HM组、MF组(P<0.05),LM组大鼠体质量显著低于DM组(P<0.05).骨密度方面,LM组、MM组、HM组、MF组大鼠后测骨密度显著高于前测和DM组后测结果,但仍然明显低于C组(P<0.05).在骨代谢方面,LM组、MM组、HM组、MF组大鼠后测尿羟脯氨酸、尿DPD、血浆TRACP值显著高低于前测和DM组后测结果,但仍然明显高于C组(P<0.05).在糖代谢方面,LM组、MM组、HM组、MF组大鼠FPG、FINS后测值显著低于本组前测值、DM组和HM组后测结果,但明显高于C组(P<0.05).在胰岛素抵抗方面,MM组、HM组、MF组大鼠HOMA-IR后测值显著高低于本组前测值、MF组和HM组后测结果,但明显高于LM和MM组(P<0.05).在脂代谢方面,LM组、MM组、HM组、MF组大鼠甘油三酯(triglyceride,TG)、TC、LDL-C后测值显著低于本组前测值、DM组后测结果,但明显高于C组(P<0.05).LM组TG、TC、LDL-C指标后测值显著低于HM组、MF组(P<0.05).LM组、MM组、HM组、MF组大鼠HDL-C指标后测值显著高于本组前测值、DM组后测结果,但明显低于C组(P<0.05).结论 二甲双胍搭配跑步的干预方案能够保持大鼠体重,降低血脂、血糖,缓解胰岛素抵抗,增加骨密度,减少骨吸收.其中二甲双胍搭配中低强度跑步方案在体重控制、降低血脂血糖、缓解胰岛素抵抗方面优于二甲双胍搭配高强度跑步方案.二甲双胍搭配高强度跑步方案对于2型糖尿病并发骨质疏松大鼠骨密度改善效果与二甲双胍搭配中低强度跑步方案相比具有优势.

2020

2021/07/20

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抽动障碍动物模型的研究进展及在中医药研究中的应用

抽动障碍(TD)是以一种或多种运动和/或发声性抽动为主要症状的神经发育障碍性疾病,给患儿在学习、生活上带来了诸多不便,对患儿性格塑造的影响尤为深远.TD的发病机制至今尚未完全明确,主要与神经递质释放紊乱、神经免疫、遗传、微量元素失衡、饮食等因素有关.西药治疗TD效果虽然明显但都有严重的副作用,相比之下,中医药治疗TD具有副作用小、疗效确切且持久的优势,得到了患儿及家长的广泛认可.为探明TD的发病机制以及中药复方治疗TD的具体作用机制,众多学者进行了大量深入的动物实验研究,取得了一定的成果,但也暴露出一些缺陷,例如造模法方法单一,未能考虑到TD的其他发病机制,也未能结合中医的具体证型进行针对性的造模,没有体现出中医辨证论治的特点.该文综述常见动物模型的建模方法以及优缺点的的比较,并回顾总结中药复方对TD动物模型干预前后行为学、相关指标的变化,为今后进行动物实验研究时有针对性的选择动物模型提供参考.

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2021/07/20

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荧光定量PCR对两种不同动物皮膜血吸虫尾蚴检测结果的比较

目的 比较两种不同动物皮膜获取血吸虫尾蚴效果,为动物皮膜优选提供参考.方法 分别制作添加苯甲酸钠(A膜)与未添加苯甲酸钠(B膜)两种动物皮膜,将尾蚴设置成1～10条、11～99条、≥100条3个浓度组,采用荧光定量PCR法,对两种动物皮膜获取尾蚴效果进行综合比较.结果 实验室测试结果显示,尾数1～10条组,A膜和B膜的血吸虫尾蚴检出率均为77.78％,其余两个组检出率均为100％,总检出率均为90.48％.A膜和B膜的血吸虫尾蚴检出率比较差异无统计学意义(P＞0.05).对模拟现场的A膜和B膜的血吸虫尾蚴的检出率均为5.00％,两者比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 添加与未添加苯甲酸钠动物皮膜获取尾蚴效果一致,但因苯甲酸钠具有防腐剂作用,可用于动物皮膜的长时间保存,因此推荐含有苯甲酸钠的仿生膜用于现场连续使用.

2020

2021/07/20

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