两种方法制备脱细胞血管材料在动物体内免疫反应的比较

背景:去垢剂作为目前较成熟的脱细胞方法,具有操作简便、破坏小、实验条件容易控制等优点,有研究将不同的去垢剂联合应用于脱细胞中取得了不错的效果.目的:对比两种去垢剂联合方案脱细胞的效果,以及两种脱细胞血管材料植入动物皮下后的免疫反应.方法:采用两种方案对猪颈动脉进行脱细胞处理,一组置于1％十二烷基硫酸钠与1％脱氧胆酸钠混合溶液内处理72 h(SDS+SDC组),另一组置于1％十二烷基硫酸钠与1％Triton Ⅹ-100混合溶液内处理72 h(SDS+Triton Ⅹ-100组),脱细胞后分别进行组织学分析、扫描电镜分析、力学分析与DNA含量检测.将两组脱细胞血管材料分别植入SD大鼠背部皮下,术后1,2,4,8周取出移植血管材料,进行苏木精-伊红染色与免疫荧光染色.实验己通过江南大学实验动物伦理委员会批准.结果 与结论:①组织学分析显示,SDS+SDC组方案有效去除了细胞成分,较完整的保留了细胞外基质结构,脱细胞效果优于SDS+Triton Ⅹ-100组;②SDS+SDC组DNA含量明显低于SDS+Triton Ⅹ-100组(P＜0.05),两组爆裂强度与缝合耐受强度比较差异无显著性意义(P＞0.05);③扫描电镜显示,SDS+Triton Ⅹ-100组细胞外基质破坏程度大于较SDS+SDC组:④皮下植入实验中,术后1周时两组颈动脉材料周围均可见大量炎性细胞浸润,术后8周时SDS+SDC组脱细胞材料周围已无炎性细胞浸润,SDS+Triton Ⅹ-100组脱细胞材料周围仍可见明显的淋巴细胞浸润;SDS+Triton Ⅹ-100组脱细胞材料主要诱导巨噬细胞向M1型分化,SDS+SDC组脱细胞材料主要诱导巨噬细胞向M2型分化;⑤结果表明相对比1％十二烷基硫酸钠联合1％Triton Ⅹ-100脱细胞处理方案,1％十二烷基硫酸钠联合1％脱氧胆酸钠脱是较有前景的脱细胞细胞处理方案.

2020

2021/07/20

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慢性肾衰竭病证结合动物模型的研究与思考

慢性肾衰竭病证结合动物模型的构建是探求中医药对慢性肾衰竭疗效及作用机制的实验基础.从慢性肾衰竭病证结合动物模型造模思路、研究现状及评价机制三方面进行阐述,对病证独立、复制性差、评价方式缺乏客观化等多个问题进行深入分析思考,并提出一些发展建议.同时,从自发性慢性肾衰竭动物模型培育、代谢组学等方面提出构建更准确、重复性更高、可靠性更好的病证结合动物模型的解决方案,为慢性肾衰竭中医基础研究提供更多病证结合模型的构建思路.

2020

2021/07/20

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新型冠状病毒动物实验存在暴露风险时的实验室生物安全要求

解读了GB 19489—2008《实验室 生物安全通用要求》标准中关于生物安全实验室的分级和分类,阐明了缓冲间和气锁的定义,重点分析了4.4.3类型实验室关于准入和退出,气压、压差和气密性及送排风高效空气过滤器等技术性条款.指出了4.4.3类型实验室开展不传染人的非洲猪瘟病毒实验活动和可传染人的新型冠状病毒实验活动时关于个体防护用品选择及其处置中存在的问题,以及风险评估应重点考虑的要素,建议组织国家病原微生物实验室生物安全专家委员会对新型冠状病毒进行论证,明确新型冠状病毒动物实验存在暴露风险时的实验室生物安全要求.

2020

2021/07/20

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防风解热合剂对胃液分泌、胃排空及肠蠕动影响的实验研究

目的 探讨防风解热合剂健胃消食的药理作用,为扩大该药临床应用提供实验依据.方法 采用胃液离心常规方法测定大鼠胃液量;采用滴定法测定大鼠胃液游离酸、总酸度;采用胃蛋白酶试剂盒测定大鼠胃液上清中胃蛋白酶活性;测定墨汁推进率以观察小鼠肠蠕动能力;采用比色法测定甲基橙残留率以观察小鼠胃排空能力.结果 与对照组比较,防风解热合剂高剂量组可显著升高大鼠胃中总酸水平、胃蛋白酶活性(P＜0.01),对胃液量、游离酸的作用不明显(P＞0.05);显著增加小鼠墨汁推进率(P＜0.01);显著降低小鼠胃甲基橙残留率(P＜0.01).防风解热合剂中、低剂量组可显著升高小鼠墨汁推进率(P＜0.05),对大鼠胃液量、游离酸、总酸、胃蛋白酶活性及小鼠胃甲基橙残留率的作用均不明显(P＞0.05).结论 防风解热合剂能够促进消化和胃排空,具有一定的健胃消食的作用,为临床防治支气管炎并发消化不良症提供实验依据.

2020

2021/07/20

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艾灸对类风湿关节炎模型动物血清细胞因子干预作用的系统评价与Meta分析

目的:系统评价艾灸对类风湿关节炎模型动物血清细胞因子的干预作用.方法:检索PubMed、Embase、Web of Science、The Cochrane Library、OVID、中国知网、维普、万方和CBM数据库,筛选艾灸干预类风湿关节炎的动物实验研究,提取资料并采用Rev Man 5.3软件对结局指标包括血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和转化生长因子β(TGF-β)及病变关节肿胀度进行Meta分析.结果:共纳入18篇研究,检测方法包括放射免疫法和ELISA法,实验动物种属包括大鼠和兔,有关血清TNF-α和病变关节肿胀度的研究存在发表偏倚.Meta分析结果显示,艾灸组可降低模型动物血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、VEGF、IL-17、RANKL,可升高模型动物血清TGF-β、IFN-γ,降低病变关节肿胀度.结论:艾灸能有效调节类风湿关节炎模型动物血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6含量,从而减轻炎性反应,缓解病变关节肿胀.

2020

2021/07/20

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阿尔茨海默病和轻度认知障碍常用实验动物模型的初步评价

阿尔茨海默病(AD)是一种典型的以进行性认知障碍和行为损害为特征的中枢神经退行性疾病,病理表现主要有细胞外淀粉样蛋白沉积、细胞内神经纤维缠结以及神经元丢失等.轻度认知障碍(MCI)是介于正常认知和AD之间的一种认知缺损状态,MCI具有转化为AD的高度危险性.以往大多通过建立具有临床AD特征的动物模型进行机制研究、药物筛选以及新药研发等,近年来,有研究者尝试建立具有临床MCI特征的动物模型,试图从MCI阶段进行早期干预,从而有效预防AD的发生.AD实验动物模型有多种类型,MCI研究模型应区别于AD模型.该文在对AD和MCI的特点进行较系统介绍的基础上,从模型建立的角度对常用AD和MCI实验动物模型进行了总结和初步评价,尝试为开展AD和MCI的研究提供建议.

2020

2021/07/20

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某GLP实验动物设施空调及通风系统设计研究

本文以某GLP动物实验室作为研究对象,对其空调系统的冷热源、送排风系统、气流组织及自控系统的设计进行了简单介绍和分析.通过计算流体动力学(CFD)模拟技术对动物实验室的气流组织进行优化,结果表明采用上送下排辅助顶排风的方式有助于降低室内氨气浓度.本文还基于动物实验室的需求对变风量控制模式进行了重点介绍,体现了该控制模式的节能性,并对今后动物实验室的空调系统设计关注点提出了展望.

2020

2021/07/20

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99Tcm-3PRGD2 SPECT显像用于胰腺癌荷瘤裸鼠动物实验及临床转化研究

本工作探讨了新型示踪剂99 Tcm-HYNIC-3PEG4-E[c(RGDfK)]2(99 Tcm-3PRGD2)用于胰腺癌的诊断价值及临床转化可行性.用免疫组化实验测定PA NC-1胰腺癌细胞以及肿瘤组织中的整合素αvβ3的表达.将PANC-1胰腺癌细胞种植于BALB/c裸鼠肩部,建立合格的动物模型.以联肼尼克酰胺(HYNIC)作为双功能连接剂,采用无亚锡一步法制备99 Tcm-3PRGD2.在0.5～6.0 h,每隔0.5 h行一次荷瘤鼠99 Tcm-3PRGD2全身平面显像,观察全身分布情况,于肿瘤及健侧勾画感兴趣区(ROI,region of interest),计算肿瘤与本底(T/NT)的比值.对6例胰腺肿瘤患者行99Tcm-3PRGD2单光子发射的计算机断层显像(SPECT),评估对胰腺癌的检出率.结果表明:PANC-1胰腺癌细胞以及肿瘤组织中高表达整合素αvβ3.99 Tcm-3PRGD2标记率大于99％.荷瘤鼠显像显示肿瘤对示踪剂摄取好,0.5 h时即可见肿瘤显影,1.5 h时T/NT达最大值,6.0 h时肿瘤仍可清晰显示.99 Tcm-3PRGD2 SPECT显像可检出6例患者的胰腺肿瘤原发灶和肝转移灶,检出率为100％.99 Tcm-3PRGD2是一种安全有效的示踪剂,特异性结合整合素αvβ3,99 Tcm-3PRGD2 SPECT对胰腺癌的临床诊断具有潜在的应用前景.

2020

2021/07/20

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低频强声驱散样机对静音室内实验动物的损伤效应观察

目的 为了解低频强声驱散样机(75～85 Hz)在不同声强(108～141.5 dB)情况下的安全性和有效性,以及低频强声对不同实验动物损伤效应特点,为低频强声驱散样机的定型与使用安全,也为制定该类伤员的诊断、救治、防护措施提供依据.方法 通过用不同声强(108～141.5 dB)作用于放于静音室的不同类实验动物(山羊6只、巴马小香猪4只和SD大鼠40只)30 min.采用大体与病理解剖、心电、听觉脑干诱发电位、行为学等手段评估不同声强的低频驱散样机在静音室内对实验动物的生物损伤效应.结果 不同强度的低频强声作用于放于静音室内的实验动物30 min后,最高声强(141.5 dB)作用后可引起部分动物脏器(心、肺、肝)的点状出血(轻微损伤),但未发现听阈、功能及行为学异常;≤130 dB声强作用后均未发现动物听阈、解剖、功能及行为学异常.结论 该低频强声驱散样机在声强141.5 dB时可引起部分大动物(山羊和巴马小香猪)的轻微损伤;低频强声主要引起大动物的内脏损伤,对听觉器官损伤不明显;该低频强声驱散样机在现有频率和强度下仅会引起实验动物主要脏器的点状出血,无不可逆性损伤,具有安全性且具有潜在的驱散能力.

2020

2021/07/20

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轮状病毒动物感染模型研究进展

建立动物模型对于疾病致病机理、疫苗研制、药物筛选都具有重要意义.疾病动物模型的建立不仅与病原体的特性有关,还涉及到动物的种类.至今,用于轮状病毒感染的动物模型尚且不多,具有敏感性又适用于大多数毒株的,能完全模拟人的致病过程的实验动物还不确定,给轮状病毒疫苗及治疗药物的研发带来了很大的不便.为推进寻求理想的轮状病毒实验动物模型,查阅近几年国内外关于轮状病毒感染动物模型种类、利用轮状病毒感染动物模型进行的相关实验研究进展以及相关的文献报道,并对其进行了总结分析,为将来可能的优化、选择轮状病毒感染动物模型提供理论参考依据.

2020

2021/07/20

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