槲皮素通过TGF β1/Smad3信号通路改善慢性心衰大鼠心肌纤维化

目的 观察槲皮素对慢性心力衰竭大鼠心功能的改善作用,探讨TGF β1/Smad3信号通路在其中的作用机制.方法 SD大鼠45只,采用随机数字表法将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、心力衰竭模型组(CHF组)和槲皮素干预组(Qu组);采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷型慢性心力衰竭大鼠模型,Qu组予以槲皮素100mg/kg灌胃,余组予以等量生理盐水,连续给药8w,超声心动图观察各组大鼠心脏结构参数,HE染色、Masson染色观察各组大鼠心脏组织病理学变化,Western blot、qPCR法检测心脏组织中TGF β1/Smad3信号通路相关因子collagen Ⅰ、collagenⅢ、TGF-β1、smad3、p-smad3表达情况.结果 槲皮素可以改善心衰大鼠心功能,大鼠LVDD、LVDS明显降低,LVEF、LVFS明显升高,Qu组大鼠心肌细胞肿胀明显改善,排列较规则,结构较完整,仅见少量炎性细胞浸润及胶原纤维蛋白沉积,纤维化程度明显减轻.同时,槲皮素可下调心衰大鼠心脏心脏组织中TGF-β1、Smad3、p-smad3、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ表达水平.结论 槲皮素明显改善慢性心力衰竭大鼠的心功能,减轻大鼠心室重构及心肌细胞损伤,与调控TGF β1/Smad3信号通路相关.

2020

2021/07/20

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应用PCR-RFLP方法鉴定梅花鹿茸与马鹿茸

目的 建立一种应用限制性片段长度多态性技术鉴别梅花鹿茸与马鹿茸的方法.方法 提取各种鹿茸样品的基因组DNA,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对正品鹿茸的特异性片段进行扩增,鉴别鹿茸的真伪,然后对正品鹿茸利用动物通用引物进行PCR扩增,并通过限制性片段长度多态性分析进一步对正品鹿茸的种属来源进行确证.结果 通过对特异性片段的PCR扩增,可将梅花鹿茸及马鹿茸与驯鹿、麋鹿、新西兰鹿等伪品鹿茸加以区分,通过对限制性内切酶Msp I进行酶切后的片段长度进行分析,可进一步区分梅花鹿茸与马鹿茸.结论 本实验建立了一种基于限制性片段长度多态性技术快速、准确的鉴别鹿茸真伪及种属鉴定的方法,为解决中药易混品种难以鉴定的问题提供了又一个新方法.

2020

2021/07/20

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载紫杉醇的聚乙二醇聚丙交酯-乙交酯聚赖氨酸纳米粒制备及其对耐药卵巢癌细胞的作用

目的 制备聚乙二醇聚丙交酯-乙交酯聚赖氨酸(mPEG-PLGA-PLL)包载紫杉醇(PTX)的纳米粒(PTX NPs),探讨其在体内外对耐药卵巢癌细胞的作用.方法 以包封率和粒径为综合评价指标,筛选PTX NPs的最佳制备方法,并采用正交实验优化该制备方法的工艺参数.通过粒度仪和透射电镜对PTX NPs进行表征分析.采用高效液相色谱法分析定量检测PTX的包封率,透析法评估PTX NPs中PTX的释放率.荧光倒置显微镜观察PTX NPs的摄取情况,CCK-8法检测NPs及PTX NPs对耐药卵巢癌细胞生长影响,采用动物成像仪观察PTX NPs在体内的生物学分布.结果 PTX NPs粒径为(103.0±0.9)nm,包封率为(84.1±1.3)％,具有一定缓释作用.细胞摄取实验结果显示PTX NPs相比游离药物更容易被卵巢癌A2780细胞紫杉醇耐药株(A2780TR)细胞摄取.空载mPEG-PLGA-PLL纳米粒无明显细胞毒性,游离PTX在A2780和A2780TR细胞中的IC50分别为(0.010 2±0.000 3)μg·mL-1和(4.55±0.44)μg·mL-1,而PTX NPs的IC50分别为(0.003 1±0.000 6)μg·mL-1和(1.05±0.13) μg·mL-1.体内生物学分布结果显示PTX NPs能够靶向肿瘤部位发挥作用.结论 本研究制备的PTX NPs粒径适宜、包封率高、具有药物缓释作用,易被细胞摄取,相比游离PTX对卵巢癌耐药细胞的作用更强,且具有体内靶向作用,在卵巢癌治疗中具有一定的应用前景.

2020

2021/07/20

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预包装食品中钠、碘含量及相关性

目的 探讨市场上销售的预包装食品钠与碘含量的现状以及相关性分析.方法 对实体超市与网络超市中224种预包装食品进行采样,根据不同标准分类,用电感耦合等离子体质谱仪检测其中的钠与碘含量,并对钠含量与碘含量做相关性分析,计算预包装食品碘盐使用率.结果 在各类预包装食品中,鱼禽肉蛋类制品钠含量(M=884 mg/100 g)、碘含量(M=40.5 μg/100 g),腌制类食品钠含量(M=940mg/100 g)、碘含量(M=40.5 μg/100 g),动物性食品钠含量(M=786 mg/100 g)、碘含量(M=34.9 μg/100 g)均较高.主食及速食食品(动物性r=0.730,P＜0.01;植物性r=0.777,P＜0.01)、腌制类食品(动物性r=0.518,P＜0.01;植物性r=0.973,P＜0.01)中钠、碘含量相关性较强;剔除烘焙、烘烤类等容易造成碘损失的样品后,预包装食品碘盐使用率约为88.46％.结论 市场上不同类别的预包装食品钠、碘含量存在差异.

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2021/07/20

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模拟高原间断缺氧暴露对雌性大鼠动情周期的影响

目的 探讨模拟高原间断低氧暴露对雌性大鼠动情周期的影响.方法 健康雌性SD大鼠适应性喂养5d后随机分为两组,每组11只,分别为(1)正常对照组:在标准温湿度条件下饲养;(2)低氧暴露组:每天于低压舱进行8h模拟高度为6 000 m的低氧暴露.实验周期为4周,实验期间动物自由摄食饮水,每天记录摄食量,每周称量2次体质量,计算低氧暴露对雌性大鼠体质量及摄食量的影响;采取脏器质量/体质量计算低氧暴露对雌性大鼠重要脏器系数的影响;阴道脱落细胞形态变化(2次/d)观察大鼠动情周期的变化情况;放免法(radioimmunoassay,RIA)检测血清性激素水平;分别采用二硫代二硝基苯甲酸(dithiobisnitrobenzoicacid,DTNB)法、羟胺法和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测血清谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性以及血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量.结果 与正常对照组相比,低氧暴露7d内大鼠摄食量显著降低,低氧暴露10 d内大鼠体质量显著降低;脏器系数结果表明低氧暴露可导致雌性大鼠肾脏、肝脏、脾脏系数显著升高,但对雌性大鼠子宫、卵巢系数无显著影响;阴道脱落细胞形态分析结果显示低氧暴露显著导致雌性大鼠动情期和动情后期的延长以及动情间期的缩短;血清性激素结果显示低氧暴露导致雌性大鼠血清孕酮(progesterone,P)和促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平显著降低;血清氧化抗氧化指标结果显示,与正常对照组相比,低氧暴露组血清GSH-Px、SOD活性显著降低,MDA含量显著升高.结论 低氧暴露可显著导致雌性大鼠动情周期紊乱,这可能与机体氧化和抗氧化能力失衡有关.

2020

2021/07/20

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α-突触核蛋白A30P突变对小鼠海马齿状回神经发生的影响

α-突触核蛋白(α-synuclein,SNCA) A30P点突变是帕金森病(Parkinson disease,PD)的主要标志之一.已知PD的发生发展与大脑海马齿状回(dentate gyrus,DG)的神经紊乱有密切关系,但尚不清楚该突变对成体DG神经发生有何直接影响.本研究以C57BL/6正常小鼠(C57BL)、内源性SNCA敲除鼠(SNCA-/-)、SNCA-/-+人SNCAA30P突变基因敲入鼠(A30P SNCA-/-)为实验动物(每组4只),经灌流固定、冰冻切片和免疫荧光组织化学染色,观察分析其DG形态学变化及磷酸化组蛋白3(PH3,增殖标记)、双皮质素(Dcx,神经母细胞标记)、Sox2(干细胞标记)阳性细胞数.结果 显示,各组小鼠DG的形态、大小及细胞密度等无明显差异;与C57BL小鼠相比,SNCA-/-和A30P SNCA-/-组小鼠DG中PH3+和Dcx+细胞数量显著减少,而Sox2+细胞数无明显差异.以上结果表明,内源性SNCA的正常表达是DG神经发生所必需的,SNCA-/-和A30P SNCA-/-均能显著减弱或抑制小鼠DG细胞增殖、分化等神经发生活动,但有关其详细分子机制仍需后续进一步研究.

2020

2021/07/20

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治疗急性肺损伤的莪术油和莪术醇粉雾剂的比较研究

本文制备了莪术油粉雾剂(zedoary turmeric oil dry powder inhalers,ZDPIs)及其有效化合物莪术醇粉雾剂(curcumol dry powder inhalers,CDPIs),经大鼠气管给药后,比较两者对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的治疗作用.分别制备莪术油和莪术醇纳米乳,加入5％甘露醇,冻干后得到ZDPIs和CDPIs.两者均为疏松白色粉末,空气动力学粒径(aerodynamic diameter,Da)分别为3.02和2.67 μm,均适合肺吸入给药.所有动物实验经军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所伦理委员会批准且实验均按照相关指导原则和规定进行.大鼠气管喷入5 mg·mL-1 LPS溶液0.2 mL,建立ALI模型.分别将ZDPIs(含莪术油0.5 mg)和CDPIs(含莪术醇0.5 mg)经气管给药.两者均能减少ALI大鼠肺组织出血,并且显著降低肺组织中炎症因子(肿瘤坏死因子α、白介素-6和总蛋白)的含量(P＜0.001),说明两者对ALI均有明显治疗作用,并且无显著性差异,原因可能是莪术油中非莪术醇成分同时有治疗作用.因此,ZDPIs和CDPIs有望用于ALI的肺吸入治疗,为天然产物中有效成分和有效化合物的比较研究提供借鉴.

2020

2021/07/20

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人呼吸道合胞病毒F蛋白在大肠杆菌中的表达与免疫效果研究

人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,hRSV)是婴幼儿和老年人发生严重呼吸道疾病的主要病因,自上世纪50年代hRSV被发现以来,科学家对hRSV疫苗进行了大量的实验探索,但至今没有上市的疫苗.本研究应用pET32a质粒在大肠杆菌BL21中表达并纯化了hRSVF蛋白(RBF),透射电镜下RBF以三聚体的形式存在(长约20 nm的棒状结构),与5C4抗体(识别抗原表位Φ)亲和常数为1.26×10-9.混合铝佐剂肌肉注射免疫BALB/c小鼠,不同剂量(2.5μg、5μg和10μg)的RBF蛋白免疫效果无显著差异(P＞0.05),均能诱导小鼠产生高滴度的中和抗体(滴度可达2 7),并且可以显著降低肺脏病毒滴度,减少肺脏的病理损伤(P＜0.001).与福尔马林灭活疫苗(FI-RSV)相比,RBF诱导产生偏向Th1类的细胞和体液免疫应答.RBF在动物实验中显示出良好的保护效果,同时原核表达系统具有产量和成本上的优势,因此可以作为预防人感染hRSV的潜在候选疫苗.

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2021/07/20

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抗HER2靶点抗体偶联药物大鼠单次给药毒性研究

目的 开展注射用重组抗HER2人源化单克隆抗体偶联美登素I(HS630)和细胞毒素美登素I(DM1)的大鼠单次给药毒性研究.方法 大鼠随机分成9组,包括空白对照组,溶媒对照组,对照药(60 mg· kg-1,Kadcyla(R))组,HS630低(6 mg·kg-1)、中(20 mg·kg-1)、高(60 mg·kg-)剂量组和DM1低(0.10 mg·kg-1)、中(0.20mg·kg-1)、高(0.40 mg·kg-1)剂量组,每组20只,雌雄各半.采用尾静脉注射给药,给药1次.每天观察各组大鼠的行为活动、外观被毛、粪便等临床症状,每周2～3次称动物体重和摄食量,分别在给药后第2天和第21天解剖动物进行大体观察、称主要脏器质量、HE染色进行病理学检查.结果 大鼠给予HS630后出现一定程度的毒性反应,60 mg· kg-1剂量导致1/20只大鼠死亡.大鼠对HS630最大耐受量为20 mg·kg-1,相当于DM1给药量0.34 mg· kg-1.给予高剂量60 mg· kg-1的HS630会引起大鼠体重下降,摄食减少;肝、肾、脾、肺质量增加,睾丸、附睾质量减少;肝、脾、肺(含支气管)、胸腺、胰腺、肾、肠系膜淋巴结、肠、精囊腺、前列腺、睾丸、附睾、肾上腺、甲状腺、垂体、眼球、舌、胸骨(骨髓)、骨、皮肤、注射部位出现病理学改变.这些毒性表现与对照药Kadcyla(R)组相似.大鼠给予中剂量20 mg· kg-1的HS630,临床症状未见异常,对体重和摄食量无影响,肾和肺质量增加,肝、脾、胸腺、胰腺、肺(含支气管)、肾、肠系膜淋巴结、十二指肠、肾上腺、垂体、皮肤出现病理学改变.大鼠在给予DM1后出现强烈的毒性反应,0.40 mg·kg-剂量导致2/20只大鼠死亡,大鼠对DM1最大耐受量为0.20 mg·kg-.给予高剂量0.40 mg·kg-1的DM1会引起大鼠体重下降,摄食减少;肝、脾、肾上腺质量增加,胸腺质量减少.肝、脾、胸腺、肾、肠系膜淋巴结、十二指肠、空肠、直肠、精囊腺、肾上腺、垂体、眼球、舌、胸骨(骨髓)、骨、皮肤出现病理学改变.结论 大鼠尾静脉分别单次给予HS630和DM1两种受试物,从耐受性、毒性症状、脏器质量、组织病理学检查等方面对实验结果进行比较分析,发现抗体偶联药物HS630的毒性表现与对照药Kadcyla(R)相同;当给予HS630与DM1相近剂量时,HS630比小分子DM1有更好的体内耐受性和更宽的临床用药安全窗.

2020

2021/07/20

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IL-38对胶原诱导性关节炎大鼠Th17/Treg失衡的调节作用

目的 探讨IL-38对胶原诱导性关节炎Th17/Treg失衡的调节作用.方法 SPF级SD大鼠30只,随机分为3组,即正常对照组(CON)、胶原诱导性关节炎大鼠(collagen-induced arthritis rats,CIA)、CIA+IL-38(5ng/g)组;CIA组、IL-38组采用大鼠尾根部皮下注射牛Ⅱ型胶原乳剂建立CIA大鼠模型;IL-38组于初次免疫后第24天起每天注射IL-38(20-152)5 ng/g,连续给药10d;观察大鼠后足及关节情况,HE染色观察大鼠滑膜组织病理变化,流式检测Th17/Treg细胞变化,ELISA、qRT-PCR检测Th17/Treg相关基因的表达情况.结果 IL-38明显改善胶原诱导性关节炎大鼠的症状、滑膜组织病理情况、调节Th17/Treg细胞的表达水平以及Th 17/Treg相关基因的表达水平.结论 IL-38通过调节Th17/Treg失衡对胶原诱导性关节炎大鼠具有保护作用.

2020

2021/07/20

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