基于1H NMR血清和肝脏代谢组学的黄芩叶抗衰老作用研究

本实验采用D-半乳糖致衰老大鼠模型结合1H NMR血清和肝脏代谢组学,探究黄芩叶醇提物的抗衰老作用以及潜在抗衰老代谢调节机制.所有动物实验均通过山西大学科学研究伦理审查委员会审查.结果 表明,黄芩叶醇提物具有抗衰老作用,能够改善衰老大鼠外在表征、自主活动能力和脂质过氧化、糖基化等衰老损伤,并可通过调节血清中谷氨酸、谷氨酰胺等12种差异代谢物和D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等11个代谢通路,调节肝脏中α-葡萄糖、β-葡萄糖等5种差异代谢物和糖酵解或糖异生、淀粉和蔗糖代谢通路,改善衰老大鼠血清和肝脏代谢异常.

2020

2021/07/20

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依达拉奉通过Nrf2信号分子调节氧化应激减轻脑缺血再灌注诱导的神经损伤

本研究旨在探讨依达拉奉(edaravone,ED)在脑缺血再灌注损伤中发挥神经元保护作用与Nrf2信号分子间的关系.体内实验利用脑内脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion model,MCAO)建立SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型,体外实验采用过氧化氢(H2O2)损伤PC12细胞建立氧化应激模型.通过TTC染色、HE染色、Nissl染色来检测大脑的病理状态.测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,来反映氧化应激水平.此外,通过Hoechst 33342染色和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MTP)测定,探究细胞水平的损伤.采用免疫组织化学和蛋白质印记测定Nrf2的表达.构建Nrf2敲除的PC12细胞系,证实Nrf2信号分子抑制氧化应激损伤的作用.结果 提示,经依达拉奉给药后,在动物体内水平,TTC染色证实,脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠的脑组织梗死体积减小(P＜0.001),ROS和MDA水平下降(P＜0.01),SOD活性上升(P＜0.01);在细胞水平,凋亡细胞减少(P＜0.05),MTP上升(P＜0.01),ROS和MDA水平下降,SOD活性上升(P＜0.01);在分子水平,免疫组化和Western印迹结果均提示,Nrf2蛋白质含量较正常组增加.H2O2诱导Nrf2基因敲除的PC12细胞损伤加重,且依达拉奉的治疗效果明显削弱.综上所述,Nrf2在依达拉奉减轻脑缺血再灌注诱导的氧化应激损伤中发挥关键作用.

2020

2021/07/20

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外周5-羟色胺系统与糖尿病及其并发症防治关系的研究进展

糖尿病及相关并发症严重威胁人类的健康,但由于其发病机制未被阐明,阻碍了抗糖尿病药物的开发与推广.临床和动物实验结果表明5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和糖尿病的发生、发展有紧密的关联,随着研究的不断深入,外周5-HT系统显示出作为治愈糖尿病重要靶点的潜力.本文首先对外周5-HT在糖尿病及其并发症发生和发展过程中的作用进行阐述,接着对5-HT调节糖尿病的机制进行探讨,随后对与糖尿病并发症相关的5-HT受体进行系统的总结,最后对如何利用药物通过5-HT系统防治糖尿病提出展望.

2020

2021/07/20

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环索奈德体外抑制寨卡病毒复制

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是一种新发蚊媒传播病毒,与胎儿严重先天性小脑畸形和成人格林-巴利综合征相关,至今尚无批准用于治疗ZIKV感染的药物或预防性疫苗.本文通过噬斑和细胞毒性实验发现环索奈德(ciclesonide)体外具有较好的抗ZIKV活性,其对ZIKV亚洲株SZ01和非洲株MR766的半数有效浓度(50％effective concentration,EC50)分别为(0.40 ±0.22)和(1.59 ±1.08)μmol·L-1,对Vero细胞的半数致死浓度(50％cytotoxic concentration,CC50)为(64.70 ±7.33)μmol·L-1;病毒产量降低实验和蛋白印迹实验显示环索奈德能够抑制ZIKV复制.此外,环索奈德还能够抑制A549细胞中ZIKV的复制;分时给药实验结果表明环索奈德主要作用于ZIKVRNA的合成阶段;进一步研究显示环索奈德还可抑制ZIKV的内化.本研究结果表明环索奈德是一种潜在的抗ZIKV药物.

2020

2021/07/20

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碳点的研究进展及其在鹿茸研究中应用前景分析

碳点是一种具有优异荧光性质的新兴纳米材料.相比于传统的有机染料和半导体量子点,碳点具有毒性低和生物相容性好等优点.目前,碳点在分析检测、荧光成像、药物运载等诸多领域有着广泛的应用.鹿茸是一味具有多种药效的传统名贵中药,也是罕见的具备再生能力的哺乳动物器官.鹿茸的生物学特性和药效与其化学成分有着密切联系.简要综述了碳点在荧光检测、荧光成像以及光诊疗方面的应用进展,对碳点应用于鹿茸生物学特性及其化学成分分析研究的可行性进行了探讨.

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2021/07/20

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具有镇静催眠作用中药有效成分及作用机制研究进展

目的 文章归纳和分析了具有镇静催眠作用中药的有效成分及作用机制特点,为临床治疗失眠症提供参考.方法 基于文献计量学理论,对中国期刊全文数据库(CNKI)和Pubmedplus课题辅助分析与智能选刊投稿系统等数据库进行具有镇静催眠作用中药有效成分及作用机制研究的文献进行检索,检索时限为数据库建库起至2019年1月.同时,结合国内外最近研究,对44种具有镇静催眠作用的单味中药,分别从实验动物、给药途径、药理作用、有效成分、作用机制等方面进行了归纳总结.结果 通过文献资料整理,共检索到相关文献257篇,其中有效文献92篇.调查结果表明,与化学合成药物相比,中药具有多成分、多靶点、毒副作用小、疗效好等特点,是镇静催眠先导化合物和新药发现的重要来源.结论 目前实验研究仍存在实验方法单一,体现中医药特色的模型少,中药有效成分不明确以及作用机制研究分散等问题.该文为系统深入开展中药镇静催眠作用的新药研究提供理论依据.

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2021/07/20

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没食子酸对MPTP所致帕金森病多巴胺能神经元损伤的保护作用

目的 研究没食子酸对帕金森病(PD)动物模型的神经保护作用及相关机制.方法 36只小鼠随机分为对照组、1-甲基-4-苯基,1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)组和没食子酸组,MPTP组和没食子酸组小鼠每天给予30 mg· kg-1 MPTP腹腔注射,连续注射7d,对照组小鼠同时给予等量生理盐水,没食子酸组小鼠从第1天开始每天给予200 mg·kg-1没食子酸连续灌胃14 d,MPTP组和对照组小鼠均给予等量生理盐水.给药结束后7d用爬杆实验和悬挂实验分析行为学功能,采用免疫组化检测黑质纹状体酪氨酸羟化酶(TH)表达情况,TUNEL法检测黑质神经细胞凋亡,qRT-PCR分析SIRT3 mRNA水平,Western blot检测蛋白表达情况.结果 与对照组比较,MPTP组小鼠运动协调能力减弱,黑质和纹状体TH表达减少,黑质神经细胞凋亡明显增多,黑质SIRT3 mRNA和蛋白表达水平明显降低、超氧化物歧化酶2(SOD2)蛋白表达减少,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).没食子酸组小鼠经药物干预后,运动协调能力增强,黑质和纹状体TH表达增多、黑质神经细胞凋亡受到抑制,SIRT3 mRNA和蛋白表达水平升高,SOD2蛋白表达上调,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 没食子酸可改善PD模型小鼠行为学功能障碍,抑制多巴胺能神经元损伤,作用机制可能与其上调SIRT3基因表达有关.

2020

2021/07/20

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淫羊藿苷对大鼠椎间盘退变的影响

[目的]研究淫羊藿苷(ICA)对大鼠尾椎椎间盘退变(IDD)的影响.[方法]体内实验部分,SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、空白对照组(IDD组)和3个淫羊藿苷处理组(ICAL、ICAM、ICAH).制备椎间盘退变模型,给予相应处理,并行MIR和细胞因子检测.体内实验部分,自假手术与IDD动物椎间盘髓核分离细胞,体外培养,并给予淫羊藿苷处理(ICAL、ICAM、ICAH),检测细胞和上清的细胞因子等.[结果]体内实验表明,术后2周,与IDD组比较,ICAM组椎间盘T2加权信号强度高;术后6周,IDD组信号消失,ICAM组则无明显改变;ICAM组MRI的Pfirrmann评级均明显低于IDD组(P＜0.05).与Sham组比较,IDD组的IL-1β、IL-6蛋白表达显著增高(P＜0.05);与IDD组比较,ICA组的IL-1β、IL-6蛋白表达显著降低(P＜0.05).体外实验显示:IDD组NP细胞增殖率明显降低(P＜0.05);而ICA组的NP细胞增殖率明显升高(P＜0.05).与Sham组相比,IDD组NP细胞IL-1β、IL-6表达显著上调(P＜0.05);与IDD组比较,ICA各组NP细胞IL-1β、IL-6表达显著下调(P＜0.05).与正常对照组相比,IDD组NP细胞Aggrecan和Collagen ⅡmRNA及蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);与IDD组相比,ICA各组Aggrecan和Collagen ⅡmRNA及蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).[结论]淫羊藿苷可促进退变髓核细胞增殖、蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白合成,减少IL-1β及IL-6表达,延缓椎间盘退变.

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2021/07/20

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豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)的多抗制备、组织分布及活性研究

目的 研究豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂(Cpserpin)的组织分布及其对丝氨酸蛋白酶的抑制效果. 方法 利用原核表达的重组Cpserpin(rCpserpin)免疫家兔,采用间接ELISA检测免疫后血清的效价,取免疫兔血清,制备抗体并纯化后,采用Western blotting对多克隆抗体进行特异性分析,通过免疫组化试验分别观察rCpserpin在豆状带绦虫成虫和幼虫中的组织分布.构建重组质粒pPIC9K-Cpserpin,线性化后转化至毕赤酵母KM71感受态细胞,用G418筛选的高拷贝菌株进行诱导表达并纯化rCpserpin,采用发色底物法检测不同浓度(6、9、18、21 μg/ml)rCpserpin对0.5 μg/ml α-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶等3种丝氨酸蛋白酶活性的抑制效果. 结果 间接ELISA检测结果显示,免疫血清多抗IgG抗体的效价达1∶51 200.Western blotting分析结果显示,纯化后的多克隆抗体可与rCpserpin和兔豆状囊尾蚴虫体可溶性抗原产生特异性反应.免疫组化试验结果显不,Cpserpin在囊尾蚴阶段表达量很低,但在成节和孕节中高度表达,广泛分布于虫体体壁和虫卵中.酵母表达的rCpserpin随浓度增加对α-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶的抑制效果分别增强,在21 μg/ml浓度时,对3种丝氨酸蛋白酶的抑制率最高,分别为(50.5±2.5)％、 (71.5±1.5)％和(77.4±1.5)％(均P＜0.05).结论 rCpserpin多克隆抗体具有特异性,在豆状囊尾蚴成节和孕节中高表达,且其对α-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶有较强的抑制作用.

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2021/07/20

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肉鸡屠宰环节金黄色葡萄球菌污染定量评估研究

目的 解析某大型肉鸡屠宰场中金黄色葡萄球菌的风险和关键防控点,为肉鸡屠宰过程金黄色葡萄球菌污染的科学防控提供指导.方法 通过某大型肉鸡屠宰场金黄色葡萄球菌的监测和调研,应用@RISK 7软件建立金黄色葡萄球菌污染的定量评估模型,对肉鸡屠宰四个环节(烫洗煺毛、净膛、清洗预冷和分割传送)进行定量评估.结果 初步探明了鸡肉中金黄色葡萄球菌在屠宰加工过程中的消长变化规律,清洗预冷环节和分割传送环节是金黄色葡萄球菌污染的主要风险环节,预冷池水中金黄色葡萄球菌浓度和工人手部带菌程度是肉鸡屠宰加工过程中金黄色葡萄球菌的关键风险点(相关系数分别为0.62和0.50).结论 对肉鸡屠宰环节的金黄色葡萄球菌进行关键控制点识别和精准采取控制措施,可有效保障终端鸡肉产品的卫生安全.

2020

2021/07/20

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