马齿苋调节人肝癌细胞肺转移裸鼠的血液代谢组学分析

目的 观察马齿苋对实验性人肝癌细胞肺转移裸鼠模型的血液组织代谢的影响.方法 通过构建人肝癌细胞裸鼠的肺转移瘤模型,观察马齿苋对转移性肝癌裸鼠的抑瘤效果及血液代谢组学的影响.结果 马齿苋能够抑制实验性人肝癌细胞裸鼠的肺内转移瘤生长,其发挥作用的机制与调节血液组织的氨基酸类、脂肪酸类、有机酸类代谢产物的表达有关.结论 马齿苋可以通过调节肝癌动物血液氨基酸类、脂肪酸类、有机酸物质相关的体内代谢发挥抑制肝癌转移的作用.

2020

2021/07/20

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PBM修复高糖诱导的细胞氧化应激损伤的研究进展

细胞的正常生长要求保持氧化与抗氧化平衡,而高糖环境会破坏这种平衡,使细胞倾向于氧化,产生大量的氧化中间产物,对细胞造成氧化应激(OS)损伤,从而导致炎性因子分泌,细胞增殖缓慢,生长受到抑制.光生物调节作用(PBM)成为康复治疗中不可缺少的一种方法,其一方面可以提高抗氧化物酶的活性,调节抗氧化体系的平衡,加速胶原合成,另一方面可促进细胞因子、生长因子的分泌,减少炎性反应,维持氧化与抗氧化平衡,促进细胞增殖.大量的细胞试验、动物试验和临床研究对PBM的具体作用机制和疗效做了深入的研究与探讨.为更好地促进PBM在临床及生命科学领域的运用,本文对现有的研究成果进行了回顾与梳理,主要从高糖环境下的细胞损伤变化、PBM修复损伤的机制、PBM的研究进展及展望等方面进行了综述,阐述了PBM对高糖诱导的细胞OS损伤修复的机制,更好地推进了光学在生物医学领域的应用.

2020

2021/07/20

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微小隐孢子虫假定棒状体蛋白CpPRP1 sushi结构域片段的生物信息学分析

目的 预测微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)假定棒状体蛋白1(putative rhoptry protein-1,CpPRP1)中Sushi结构域(CpSushi)蛋白片段的结构、理化性质、翻译后修饰位点及抗原表位等信息. 方法 利用在线软件Protparam分析CpSushi蛋白片段的等电点、消光系数、分子质量等理化性质;利用Protscale软件分析蛋白片段的亲/疏水性;利用SignalP软件预测其信号肽;利用TargetP软件预测其亚细胞结构;利用KinasePhos、NetPhos以及NetO-Glyc、NetNGlyc、NetCGlyc软件分别预测其翻译后激酶磷酸化、磷酸化及O/N/C-GlcNAc糖基化位点;利用SOPMA、COILS、Bcepred软件分别分析其二级结构、卷曲螺旋,以及柔韧性、表面可及性、转动、暴露表面及抗原倾向;TMHMM软件预测其跨膜结构域;ABCpred、Syfpeithi软件分别预测其B、T细胞抗原表位;STRING软件预测与其互作的蛋白.结果 CpSushi蛋白片段有237个氨基酸残基,分子质量为26 ku,有两个疏水峰;该蛋白无信号肽、跨膜结构域;α-螺旋、延伸链、β转角、无规则卷曲所占比例分别为28.27％、18.99％、8.86％和43.88％,且能形成规则的卷曲螺旋结构;含有22个O-GlcNAc和2个N-GlcNAc-糖基化修饰位点,但缺乏C-GlcNAc糖基化位点;其氨基酸序列中存在多处丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸磷酸化位点,蛋白的柔韧性(临界值1.9)、极性(临界值1.8)、亲水性(临界值1.9)位点分别有16、18和8个;含有2个Turn(临界值2.4)位点、7个抗原倾向(临界值1.9)位点、14个表面可及性(临界值1.9)位点、12个暴露表面(临界值2.3)位点,以及3个B细胞表位、7个限制性CTL细胞表位、9个限制性Th细胞表位;STRING分析显示,与该蛋白片段互作的隐孢子虫蛋白有10个. 结论 隐孢子虫CpPRP1 Sushi结构域蛋白片段具有良好的免疫原性,可成为潜在的隐孢子虫病疫苗候选分子.

2020

2021/07/20

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沙门菌Hfq依赖型小RNA GcvB靶基因trpE的鉴定

trpE基因在鼠伤寒沙门菌中编码邻氨基苯甲酸合酶Ⅰ并参与氨基酸生物合成和代谢.为鉴定鼠伤寒沙门菌Hfq依赖型小RNA GcvB所调控的基因trpE,本研究基于前期鼠伤寒沙门菌Hfq基因敲除株及gcvB基因敲除株转录组分析基础上,利用Red同源重组系统构建trpE基因lac融合菌株,并利用P22噬菌体转导技术构建gcvB和Hfq基因单缺失和双缺失菌株,通过β半乳糖苷酶试验检测trpE基因在不同情况下蛋白表达活性,结合生物信息学系统TargetRNA2预测GcvB R1区与trpE mRNA的作用位点.结果 表明,与野生型菌株相比,gcvB基因敲除导致trpE基因蛋白表达量增加1.2倍,Hfq基因敲除后表达量增加1.1倍,而双敲除增加量仅为0.5倍.Target RNA2预测trpE mRNA与GcvB R1区可形成8个连续或18个不连续的碱基互补.以上结果表明trpE基因受GcvB和Hfq调控,且极大可能受GcvB直接调控.本研究为鼠伤寒沙门菌GcvB的作用机理研究奠定理论基础,丰富了GcvB的靶基因数目.

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2021/07/20

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移植人外周血单个核细胞建立“人-鼠”异种急性移植物抗宿主病模型

目的 建立人源化小鼠急性移植物抗宿主病模型,并探究可以在早期预测急性移植物抗宿主病进程的细胞因子.方法 24只SPF级M-NSG小鼠分为对照组(n=6)、1组(n=5)、2组(n=4)及3组(n=9).通过尾静脉向1组、2组及3组小鼠输注不同来源的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),观察小鼠体质量变化、行为学临床表现和死亡率.在造模D8、D15及D22眼眦采血,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆中白介素2型受体α (interleukin-2 receptor α,IL-2Rα)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素(interleukin,IL)-2、IL-6和可溶性生长刺激表达基因2蛋白(growth STimulation expressed gene 2,ST2)表达水平,流式细胞术检测“人-鼠”细胞嵌合率.取肝、肠、肺部病理切片进行苏木精-伊红染色并观察病理变化.结果 通过向小鼠尾静脉输注PBMC成功建立异种急性移植物抗宿主病模型,小鼠于D28最早出现体质量减轻、弓背、背毛凌乱、眯眼等急性移植物抗宿主病特征临床表现,于D31出现死亡情况.D60,模型小鼠总死亡率为67.15％.人CD3+T细胞在小鼠体内嵌合率随淋巴细胞的活化逐渐上升,2组小鼠“人-鼠”细胞嵌合率最高.D8,2组ST2表达水平高于对照组(P＜0.05);D15,2组IL-2Rα、TNF-α、IL-6和ST2表达水平高于对照组,且高于D8 (P＜0.05);D22,2组和3组IL-2Rα及TNF-α表达水平高于对照组,且高于D8(P＜0.05).病理结果提示,急性移植物抗宿主病模型小鼠肝脏出现大面积内皮炎症病灶,肺部出现明显炎症细胞浸润,小肠出现明显绒毛钝化等特征急性移植物抗宿主病靶器官病变情况.结论 通过尾静脉向小鼠输注人外周血单个核细胞可建立异种急性移植物抗宿主病模型,通过IL-2Rα表达水平结合人-鼠细胞嵌合率可在早期预测异种急性移植物抗宿主病发病进程.

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2021/07/20

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霉茶蛋白对自发性高血压大鼠肾脏的保护作用及机制研究

目的:观察霉茶蛋白对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏的保护作用,并借助肾小管上皮细胞(NRK-52E)对其作用机制进行探讨.方法:将40只雄性SHR随机分为4组:模型组、复方罗布麻片组(阳性药物,50 mg·kg-1)、霉茶蛋白低、高(70,140 mg·kg-1)剂量组,每组10只.复方罗布麻片组和霉茶蛋白组早晚各灌胃给药1次,容量为10 ml· kg-1,连续给药7周,模型组给予等体积蒸馏水.末次给药后1h处死动物,迅速剥离肾脏组织,HE染色观察肾脏组织结构形态变化;测定肾脏组织Toll样受体4(TLR4)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA表达;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激NRK-52E后,经霉茶蛋白各剂量(0.05,0.1,0.2,0.4 μg·ml-1)干预24h,收集细胞,测定各组TLR4、IL-6、TNF-α mRNA表达.结果:霉茶蛋白可改善SHR肾脏组织的炎性病变,降低SHR肾脏组织和NRK-52E细胞中TLR4、IL-6、TNF-α mRNA表达水平,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:霉茶蛋白对SHR肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与下调炎性因子TLR4、IL-6、TNF-α的表达有关.

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2021/07/20

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三磷酸腺苷脂质体鼻用凝胶制备及其抗缺氧作用

制备三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)脂质体,评价其对缺氧性脑损伤的治疗作用.采用离子对薄膜分散法制备ATP脂质体,其最优处方:三磷酸腺苷二钠、十六烷基三甲基溴化铵、大豆磷脂、胆固醇的质量比为1∶1.98∶8∶3,此时ATP脂质体包封率为(81.50±0.82)％,载药量为(6.79±0.07)％.通过体外释放实验与流变学测定分别考察ATP脂质体与空白凝胶的理化性质;将ATP脂质体、ATP水溶液分别加入甲基纤维素凝胶中,以甲基纤维素凝胶为阴性对照,进行小鼠鼻腔给药.动物实验获得军事医学研究院伦理委员会批准.连续给药9天后,与空白凝胶或ATP水凝胶相比,ATP脂质体水凝胶显著提高了血中红细胞与血红蛋白数值(P＜0.01);连续给药13天后,在常压密闭缺氧实验中,与ATP水凝胶或空白凝胶相比,ATP脂质体鼻用凝胶能显著提高小鼠标准缺氧耐受时间(P＜0.05).小鼠海马促凋亡基因p53免疫组化染色显示,ATP脂质体对脑组织有明显保护作用.结果 表明,ATP脂质体鼻用凝胶预防给药能明显提高小鼠耐缺氧能力,是一种前景广阔的抗缺氧制剂.

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2021/07/20

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显微镜辅助下结肠区段切除术在裸鼠结肠癌模型中的应用研究

目的 探讨显微镜辅助下结肠区段切除术在裸鼠结肠癌模型中操作技术的可行性和肿瘤学行为的安全性.方法 首先建立稳定的裸鼠原发性结肠癌模型4周,其后将结肠癌模型裸鼠随机分成10只显微镜辅助下结肠区段切除术组(结肠癌切除手术模型组-研究组)和10只对照组(开关手术模型组).术后观察裸鼠4周,比较两组制模情况和生存情况.结果 结肠癌模型成瘤率100%(20/20).结肠癌切除手术模型组和开腹手术模型组在术中无1例 死亡.结肠癌切除手术模型组血性腹水、肠梗阻、淋巴结转移及腹膜种植转移明显少于开关手术模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组生存曲线分析,结肠癌切除手术模型组生存率明显优于开关手术模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 结肠癌切除手术模型为操作技术要求较高的动物实验模型.结肠癌切除手术模型在技术层面上安全、可行,但在相对局部晚期结肠癌模型中的远期肿瘤学行为有待于进一步探索.

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2021/07/20

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布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)信号通路与疾病

布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)是B细胞受体(BCR)信号传导的关键组分,并且作为体内B细胞增殖和细胞存活的重要调节剂起作用.本文综述了布鲁顿酪氨酸激酶信号通路的传导过程,包括主要的B细胞受体信号通路与其他通路.布鲁顿酪氨酸激酶基因缺陷会引发免疫缺陷X连锁性丙种球蛋白血症(XLA),而布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂如依鲁替尼最近在患有各种B细胞恶性肿瘤的患者的临床研究中显示出令人印象深刻的抗肿瘤活性,在狼疮和类风湿性关节炎的实验动物模型中也观察到一定治疗作用.

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2021/07/20

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桦树汁对高尿酸血症大鼠血尿酸及抗氧化能力的影响

目的 探讨桦树汁对高尿酸血症模型大鼠血尿酸及其抗氧化能力的影响.方法 将雄性SD大鼠随机分成5组,分别为空白组、模型组、别嘌醇组、桦树汁低剂量组、桦树汁高剂量组.模型组及各给药组分别给予氧嗪酸钾1g/(kg·d),连续灌胃14天,制备高尿酸血症动物模型.模型制备成功后,各给药组灌胃给予相应药物,空白组和模型组灌胃给予等体积蒸馏水,连续灌胃28天,于实验的第21天、第28天、第35天给药后,禁食12h,取大鼠尾部血,测定大鼠血清中血尿酸(UA)水平,并于实验末次给药后,测定大鼠血清中血尿酸(UA)、丙二醛(MDA)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果 与空白组比较,模型组大鼠血清UA含量升高,差异具有统计学意义(P<0.01),与模型组比较,别嘌醇组、桦树汁低剂量组、桦树汁高剂量组大鼠血清UA明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),桦树汁高剂量组MDA含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);桦树汁高剂量组SOD增加,差异有统计学意义;桦树汁及别嘌醇对高尿酸血症大鼠肾功能无明显保护作用,差异无统计学意义.结论 桦树汁对高尿酸血症大鼠有明显的降尿酸作用,以高剂量为优;桦树汁有明显抗氧化作用,表现为降低MDA和增加SOD;桦树汁及别嘌醇对高尿酸血症大鼠肾功能无明显保护作用.

2020

2021/07/20

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