白藜芦醇通过AMPK-P53途径调节糖尿病心肌线粒体自噬的研究

目的 观察白藜芦醇(RES)对糖尿病心肌线粒体自噬功能的影响并探讨其分子机制.方法 C57BL/6小鼠分为对照组、糖尿病组、RES组及RES+腺嘌呤核糖核苷酸依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂组.小动物超声检测各组实验动物的左室收缩末内径、左室舒张末内径、左室收缩末期容积及左室舒张末期容积;计算左室射血分数及短轴缩短率.Western blotting检测各组实验动物Parkin、P62、P53及磷酸化的AMPK(pAMPK)的蛋白表达.结果 与对照组相比,糖尿病小鼠心肌组织Parkin、pAMPK蛋白表达及左室射血分数、短轴缩短率显著降低,而P62、P53蛋白表达显著升高.给予RES处理后可以逆转上述改变,但RES的作用被AMPK抑制剂所阻断.结论 RES可能通过AMPK-P53途径增加糖尿病心肌线粒体自噬,改善心脏功能.

2020

2021/07/20

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火器伤致开放性骨缺损细菌感染学研究

目的 通过犬火器伤致开放性骨缺损模型研究火器伤的早期致病菌及抗菌谱.方法 选取健康比格犬60只,在20 m外用7.62 mm口径步枪对比格犬后腿股骨进行精准射击,建立动物火器伤开放性骨缺损模型.伤后2 h行伤道细菌学取材,清创,并进行伤道和骨缺损测量.将伤道处软组织匀浆后进行细菌培养及药敏实验.结果 比格犬均击中股骨干,造模成功率为100.0％(60/60).伤道入口平均周长为(3.3±1.7)cm,出口平均周长为(7.4±3.4)cm,清创后骨缺损平均长度为(3.3±0.7)cm.造模后,60只犬均存活,存活时间>6周.60例比格犬标本共培养出病原菌9种130株,其中,革兰阳性菌5种78株,革兰阴性菌4种52株.革兰阳性菌中,金黄色葡萄球菌检出率最高,占38.5％(30/78);革兰阴性菌中,铜绿假单胞菌检出率最高,占42.3％(22/52).革兰阳性菌普遍对利奈唑胺和万古霉素敏感,对青霉素G、头孢唑啉、克林霉素等耐药率较高;革兰阴性菌对包括亚胺培南、美罗培南在内的碳青霉烯类药物敏感性最高.结论 比格犬是良好的火器伤骨缺损模型动物.火器伤的早期感染率较高,革兰阳性菌对于传统的β-内酰胺类药物,如青霉素G、一代头孢等存在较高的耐药性,万古霉素、利奈唑胺及碳青霉烯类药物可作为控制火器伤早期感染的一线抗菌药物.

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2021/07/20

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罗哌卡因经原癌基因信号通路抑制胃癌细胞增殖和迁移的机制

目的 探讨罗哌卡因经原癌基因(c-MYC)信号通路抑制胃癌细胞增殖和迁移的机制.方法 体外培养人胃癌MGC-803细胞进行实验,分为对照组、罗哌卡因低剂量组、罗哌卡因中剂量组、罗哌卡因高剂量组和顺铂组.罗哌卡因低、中、高剂量组分别给予终浓度为100、200、400μg/mL的罗哌卡因;顺铂组给予终浓度为10 mmol/mL的顺铂;对照组无处理.继续培养24 h后,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖率,细胞划痕法检测MGC-803细胞迁移能力,同时检测MGC-803细胞中蛋白激酶C(PKC)、c-MYC、金属蛋白酶-9(MMP-9)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达.结果 罗哌卡因低、中、高剂量组和顺铂组的MGC-803细胞增殖率[(92.05±8.24)％、(76.26±6.93)％、(53.18±5.86)％、(42.18±15.17)％]和迁移能力[(36.34±4.03)μm、(31.21±3.56)μm、(24.60±2.57)μm、(18.07±1.26)μm]较对照组[(100.00±5.91)％、(40.12±5.17)μm]明显降低(P<0.05);上述各组MGC-803细胞中PKC[(0.62±0.06)、(0.50±0.08)、(0.42±0.08)、(0.36±0.10)]、c-MYC[(0.53±0.09)、(0.49±0.15)、(0.43±0.02)、(0.31±0.04)]、MMP-9[(0.47±0.03)、(0.42±0.05)、(0.30±0.04)、(0.21±0.06)]、PI3K[(0.39±0.04)、(0.33±0.08)、(0.28±0.04)、(0.25±0.01)]、AKT[(0.50±0.10)、(0.43±0.09)、(0.24±0.02)、(0.16±0.03)]和mTOR[(0.42±0.05)、(0.36±0.03)、(0.30±0.02)、(0.25±0.04)]表达较对照组[(0.74±0.08)、(0.63±0.06)、(0.53±0.05)、(0.46±0.07)、(0.71±0.04)、(0.49±0.06)]明显降低(P<0.05),且各罗哌卡因剂量组降低强度呈剂量依赖性,但各指标均仍高于顺铂组(P<0.05).结论 罗哌卡因可抑制人胃癌MGC-803细胞增殖和迁移,其机制可能与抑制c-MYC信号通路的激活有关.

2020

2021/07/20

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耐力训练对兔心房肌细胞IKAch和心房颤动的影响

目的 阐明持续训练相关性心房颤动(AF)的机制,可能为制定新的治疗方法和选择训练方法提供信息.本研究旨在评估兔动物模型中持续训练诱发房颤的机制.方法 33只新西兰大耳兔随机分为三组(每组11只):对照组(Group C)、中强度耐力运动训练组(Group M)及高强度耐力运动训练组(Group H),于训练前、训练后8周、12周分别检测各组兔固有心率(IHR);全部训练结束后,各组随机各取6只,共18只兔采用离体心脏Langendorff系统进行1μm/L乙酰胆碱(Ach)+不同浓度阿托品溶液(0 mg/ml～0.002 mg/ml)灌注冠脉,在左心耳置入的电极分别记录相应的心房有效不应期(AERP)及90％动作电位时程(APD90);给予心房早搏程序刺激(S1S2)诱发房颤.灌流完后剪取兔左心房,经PT-PCR技术检测心房肌组织IKAch通道Kir3.1、Kir3.4的mRNA表达.取剩余各组5只实验兔,共15只运用全细胞膜片钳技术,记录心房肌细胞IKAch电流密度.结果 长期高强度的耐力运动训练16周后,Group H兔IHR明显低于其他两组;1μm/L Ach背景下,相同剂量阿托品作用下,随着运动强度的增加APD90、AERP相应缩短有统计学差异(Group H vs.Group C and M,P<0.001);同一组内,随着阿托品剂量的增加APD90、AERP相应延长,房颤发生率降低有统计学差异(P<0.05);Group H心房肌细胞IKAch电流密度高于其他两组(Group H vs.Group C、M,P<0.05),Group H心房组织Kir3.1、Kir3.4的mRNA表达量高于其他两组(Group H vs.Group C、M,P<0.05).结论长期的高强度耐力运动训练促进运动试验兔房颤发生.

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2021/07/20

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急性缺血性脑卒中氧治疗的研究进展

急性缺血性脑卒中发生后核心梗死区周围仍存在保留了细胞代谢的缺血半暗带,提高血氧浓度可一定程度改善缺血缺氧脑组织的细胞代谢能力.氧治疗可分为常规低流量吸氧治疗和非常规氧治疗,后者又分为常压高氧治疗和高压氧治疗.目前,针对脑卒中本身病变所致呼吸系统受损或相关肺部并发症的氧治疗疗效确切,最新的大样本临床试验证实予以无缺氧指征的脑卒中患者预防性低流量吸氧并不能改善预后;而动物实验及临床试验均不同程度证实了常压高氧和高压氧疗法在急性缺血性脑卒中早期(6 h内)及短期治疗的疗效.常压高氧及高压氧疗法各自及分别与静脉溶栓等药物联用是当前热点研究方向.

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2021/07/20

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浅析儿科人群药物临床试验的风险管理

目的 为儿科人群药物临床试验风险管理提供参考.方法 借鉴风险管理的理论,查阅文献,结合实际工作经验,总结儿科人群药物临床试验风险因素和风险控制措施.结果 从临床试验项目评估风险,比如研究者手册有幼年动物的实验结果,有成人数据和国外儿童数据等;申办者风险管理;专业团队风险管理,比如主要研究者具有丰富的儿科临床经验;临床试验实施风险管理;试验用药品和生物样本风险管理及系统风险管理中进行风险识别和风险评估,通过风险规避;风险减轻,比如加强临床试验质量控制和加强临床试验机构管理;风险转移,比如购买保险、明确合同的赔偿和权益保护条款等措施进行风险控制.结论 通过对儿科人群药物临床试验风险因素进行风险识别和评估,采取相应的措施进行风险管理,从而减少和避免临床试验风险的发生,保护受试者和研究者的权益.

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2021/07/20

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姜黄素脂质体对高脂诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠的降脂保肝作用

目的 研究姜黄素脂质体对高脂诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的降脂保肝作用.方法 通过体外脂肪乳诱导LO2人正常肝细胞建立NAFLD细胞模型,测定细胞内三酰甘油水平变化.选取C57BL/6小鼠32只,随机分为空白对照组、模型对照组、姜黄素混悬液组(30 mg/kg)和姜黄素脂质体组(30 mg/kg),每组8只.空白对照组喂食普通饲料和纯净水,其余3组喂食高脂饲料,诱导建立NAFLD小鼠模型,12周后进行给药处理,给药方式为灌胃给药,每2天给药1次.持续给药8周后测定小鼠血清中总胆固醇、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)的含量,同时测定小鼠肝脏系数并对其肝脏和腹部脂肪组织做苏木精-伊红染色观察其病理学变化.结果 通过检测LO2人正常肝细胞内的三酰甘油含量发现,经过姜黄素脂质体干预的高剂量观察组、低剂量观察组细胞内三酰甘油含量均低于姜黄素混悬液组(均P ＜0.05).动物模型实验中,模型对照组小鼠血清总胆固醇、LDL和肝脏系数高于空白对照组,HDL低于空白对照组;姜黄素混悬液组总胆固醇、肝脏系数低于模型对照组;姜黄素脂质体组总胆固醇、LDL、肝脏系数低于姜黄素混悬液组,HDL高于姜黄素混悬液组[(2.57±0.19) mmol/L比(3.24±0.21) mmol/L、(1.05±0.31) mmol/L比(1.58±0.14) mmol/L、(2.58±0.17)比(3.14±0.23)、(3.14±0.27) mmol/L比(2.58±0.35) mmol/L],差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).组织病理学切片显示,通过姜黄素干预治疗后,腹部脂肪细胞不同程度减小;与姜黄素混悬液组相比,姜黄素脂质体组小鼠的腹部脂肪细胞更小,相同视野面积下能观测到更多的细胞.模型对照组小鼠肝脏组织与空白对照组相比出现脂肪变性,细胞质模糊,有脂质空泡出现,而空白对照组则肝脏组织结构完整,肝细胞排列规则,细胞核形态正常,通过药物干预后,姜黄素混悬液组和姜黄素脂质体组肝细胞内脂滴空泡样减少,细胞形态结构趋于完善,脂肪样病变减少.结论 姜黄素脂质体对NAFLD小鼠有较好的降脂保肝作用.

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2021/07/20

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静止期牙周病大鼠牙齿移动后上下颌牙槽骨骨微结构的差异

目的:观察静止期牙周病大鼠牙齿移动后上下颌牙槽骨骨微结构的差异.方法:SD雄性大鼠48只随机分为对照组和实验组(各半),实验组建立静止期牙周病动物模型,近中移动上、下颌右侧第一磨牙.各组于加力0d、7d、14d、21d各处死6只动物,取材,行Micro-CT扫描.结果:加力0d、7d,实验组大鼠上颌牙槽骨骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb·Th)低于下颌,骨小梁数量(Tb·N)高于下颌(P<0.05);加力14d,上颌牙槽骨Tb·Th低于下颌,骨小梁分离距离(Tb·Sp)高于下颌(P<0.05);加力21d,上颌牙槽骨BV/TV、Tb·Th低于下颌,Tb·N、Tb·Sp高于下颌(P<0.05).加力14d,实验组大鼠上、下颌牙槽骨BMD、BV/TV降至最低,Tb·Sp升至最高.上、下颌牙槽骨Tb·N分别在加力7d、14d升至最高,Tb·Th分别在加力14d、21d降至最低.结论:静止期牙周病大鼠牙齿移动后,上颌牙槽骨骨骼强度低于下颌,且骨小梁的退行性改变较下颌严重.上颌牙槽骨主要以骨小梁厚度和分离距离的改变为主,下颌牙槽骨主要以骨骼强度的改变为主,且下颌牙槽骨的骨吸收和骨形成较上颌牙槽骨快.

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2021/07/20

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泽泻炮制前后化学成分及其利尿作用研究

目的 分析比较泽泻饮片麸炒、盐炙、土炒、酒炙炮制前后14种三萜类成分的含量,探讨泽泻及其不同炮制品的利尿作用.方法 采用超高液相色谱-质谱联用(UPLC-MS),色谱柱为Waters CORTECS UPLCC18 (2.1 mm×100 mm,1.6 μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,单四级杆质谱采用正离子SIR模式,测定泽泻生品和炮制品饮片中16-羰基-23-乙酰泽泻醇A、16-羰基-24-乙酰泽泻醇A、泽泻醇C、泽泻醇F、23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇L、24-乙酰泽泻醇F、泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、泽泻醇G、泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇B、11-去氧泽泻醇B共14种三萜类成分的含量,探讨泽泻炮制过程中化学成分含量变化;采用水负荷大鼠代谢笼法,比较泽泻炮制前后的利尿作用.结果 经方法学验证,所建立UPLC-MS同时测定泽泻饮片中14种三萜类成分的方法符合分析要求.与生品比较,泽泻炮制品化学成分最主要的变化是泽泻三萜类24、25位环氧环发生开环转化,23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B、11-去氧泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C含量下降,而泽泻醇A类化合物含量升高,且盐炙泽泻的化学成分转化最为明显.动物实验结果显示:生品组和各炮制品组1h尿量较空白对照组显著增加,且利尿效应酒炙品＞土炒品＞麸炒品＞盐炙品＞生品;生品组和盐炙品组2h尿量与空白对照组比较差异无统计学意义,而酒炙品组、土炒品组、麸炒品组尿量较空白对照组显著增加,且利尿效应酒炙品＞土炒品＞麸炒品.结论 本研究建立的UPLC-MS测定泽泻生品及不同炮制品中化学成分含量方法准确、快速.泽泻炮制后化学成分发生明显变化,泽泻经酒炙、土炒和麸炒后较生品利尿作用显著增强.

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鞣花酸提升小鼠肌肉功能的研究及机制探讨

目的 探讨鞣花酸(ellagic acid,EA)对正常小鼠肌肉功能的影响.方法 ICR雄性小鼠随机分为实验组和对照组,每组各8只.实验组每天给予10 mg/100 g体重的鞣花酸,对照组给予等体积溶剂,1次/d,灌胃21 d.利用Echo MRITM小动物体成分分析仪测定小鼠体成分,抓力仪测定小鼠四肢抓力,轮转式疲劳仪测定小鼠掉落次数,HE染色计算腓肠肌横截面积,以及利用qRT-PCR分析泛素蛋白酶通路中的MuRF1和Atrogin-1基因表达.结果 鞣花酸干预后,体成分检测两组肌肉含量、脂肪含量差异无统计学意义.与对照组相比,实验组小鼠抓力和肌纤维横截面积增加,掉落次数、MuRF1和Atrogin-1的mRNA表达水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 鞣花酸可能通过抑制蛋白质降解,增强小鼠肌肉功能,提升小鼠运动耐力,有望作为提升肌力及运动功能的植物化合物.

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2021/07/20

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