| 中文名称Chinese name
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人宫颈癌Hela细胞-eGFP移植裸小鼠模型 |
| 编号Model number |
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| 英文名称English name |
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| 物种Species name |
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| 品系Strain name |
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| 人类疾病Human diseases |
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| 传染性Infectivity |
否 |
| 微生物Microorganism |
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| 类别Category |
感染性动物模型 |
| 造模因素Modeling factors |
Hela细胞转染 |
| 制作方法Making method |
模型制作采用BALB/cA-nu裸小鼠,鼠龄5周,体重15-18g,在无特定病原体(specific—pathogen free,SPF)的饲养间饲养。细胞培养:Hela细胞为本实验室冻存。构建带有筛选标记的载体:chicken-β-actin-promotor-eGFP。细胞转染和筛选:采用Lipofectamine 2000 Reagent 转染Hela细胞。转染后,用含G418的培养液筛选细胞,获得稳定表达GFP的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养。肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的高表达细胞株,进行裸鼠皮下接种,采用活体荧光影像系统摄像动态观察。每周观察一次,裸鼠麻醉后放入活体荧光系统摄像,Slide Book 4.0软件进行分析。肿瘤体积测定:在接种的14、21、28和35d,分别用游标卡尺测量肿瘤块3个互相垂直直径A、B、C,代入下式计算肿瘤块的体积V:V=1/6πABC(V为体积,A、B、C为瘤体的3个互相垂直的直径),并绘制肿瘤的生长曲线。肿瘤组织的HE和TUNEL染色:肿瘤生长5周后,剥取出移植瘤,制成石蜡切片并进行HE和TUNEL染色。 |
| 生物学特征Biological characteristics |
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| 医学用途Medical use |
该模型制作简单,模型成瘤率及成瘤大小基本一致,且有绿色荧光标记,易于进行活体光学成像。移植瘤保持着原发肿瘤的大部分生物学特性,适用于宫颈癌的药物筛选及药效评价等试验。 |
| 临床表现Clinical manifestation |
1周时肿瘤大小不能用游标卡尺测量,2周时肿瘤进入对数生长期,至5周时移植瘤体积可达474.08 mm ,3周时动物皮肤表面都出现了不同程度的坏死。 |
| 病理表现Pathology |
应用小动物活体荧光成像系统可监测到绿色荧光蛋白在裸小鼠皮下的稳定表达,从第1周至第3周,随着肿瘤移植时间的增加,表达绿色荧光蛋白的面积逐渐增大,荧光光子数也逐渐增加,移植瘤体积与荧光光子数成正相关。4周后,由于动物的皮下肿瘤出现了坏死,因此尽管肿瘤体积仍在增加但平均荧光光子数反而呈下降趋势,移植瘤体积与荧光光子数不再有相关性。 |
| 发病天数Days of onset |
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| 发病过程Pathogenesis process |
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| 临床诊断Clinical diagnosis |
成瘤 |
| 评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success |
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| 保藏单位Preservation unit |
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| 参考文献Reference |
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| 录入/更新时间Date |
12-03-20 |
| 备注Remarks |
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