2026年02月02日 星期一

> 小鼠乳腺癌细胞4T1-LUC移植BALB/c小鼠模型

中文名称Chinese name 小鼠乳腺癌细胞4T1-LUC移植BALB/c小鼠模型
编号Model number
英文名称English name
物种Species name
品系Strain name
人类疾病Human diseases
传染性Infectivity
微生物Microorganism
类别Category 感染性动物模型
造模因素Modeling factors 4T1细胞转染
制作方法Making method 表达载体构建:构建chicken β-actin-luc-NEO载体。CAG启动子由巨细胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增强子(early enhancer element)和鸡β-肌动蛋白( chicken beta-actin )启动子组成,用于驱动基因在哺乳动物载体的高水平表达。4T1-LUC荧光细胞系的获得:采用脂质体2000转染小鼠乳腺癌细胞4T1细胞,转染后24 h,用含有G418的培养液筛选细胞三周,获得稳定表达luciferase的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养。肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的转染细胞,稀释至5×106/mL。取0.1 mL细胞悬液接种于BALB/c小鼠(5周龄,体重15-18 g)右侧第二对乳腺脂肪垫内。1×106个细胞/只,接种后每隔一周,采用活体荧光影像系统摄像动态观察肿瘤的生长和转移情况。观察前每只小鼠腹腔注射荧光素底物(1.5 mg/10 g),饱和三溴乙醇(0.18 mL/10 g)麻醉后放人活体荧光影像系统摄像,Slide Book 4.0软件进行分析。
生物学特征Biological characteristics
医学用途Medical use 尾静脉途径建立的肿瘤转移模型仅涉及肿瘤转移的最后阶段,是实验性转移而非自发转移,未能真实的反应肿瘤细胞自发转移的特性。与尾静脉接种相比,乳腺原位自发转移模型不仅真实反应了肿瘤细胞在体的转移特性,而且能完整地呈现肿瘤转移的全过程,为探讨肿瘤转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的动物模型,利用这种模型和活体动物体内光学成像系统可以实现活体、动态和即时的转移肿瘤分析。
临床表现Clinical manifestation 本模型将Luc基因转染到小鼠乳腺癌细胞4T1中得到了高表达luciferase细胞株。取0.1 mL 4T1-Luc细胞悬液接种于BALB/c小鼠右侧第二对乳腺脂肪垫内。标记细胞稀释成1×107 细胞/mL,2×107细胞/mL,5×107细胞/mL和1×108细胞/mL四种剂量,取0.1 mL接种于BALB/c小鼠右侧第二对乳腺脂肪垫内,制作小鼠原位乳腺癌模型,比较肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况。结果,四种剂量细胞接种BALB/c小鼠后,均有肿瘤生长,但四种剂量接种的原位移植瘤均发生转移程度不同,最终确定接种1×106个细胞/只不仅肺转移明显,而且存活时间一般超过45 d,比高剂量接种存活时间长,为最佳肺转移剂量。4T1与66c14和4T07细胞模型比较。将Luc标记的4T1、66c14、4T07细胞对BALB/c小鼠乳腺原位接种4T1细胞乳腺原位移植瘤最大,66c14细胞瘤体次之,4T07细胞瘤体最小;接种后35 d,三株细胞乳腺原位移植瘤大小较一致。4T1和66c14原位移植瘤均可发生转移,其中4T1细胞较66c14细胞转移最为严重,而4T07细胞未见转移。
病理表现Pathology 用活体荧光成像系统连续观察,发现7d能够成瘤,21d肿瘤面积显著增大,35d后原位肿瘤面积变小, 但能够观察到肺转移。
发病天数Days of onset
发病过程Pathogenesis process
临床诊断Clinical diagnosis 肿瘤形成且可以转移
评价模型成功的指标Indicators for evaluating model success
保藏单位Preservation unit
参考文献Reference
录入/更新时间Date 12-03-20
备注Remarks
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