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目的 探讨骨髓间充质干细胞移植在脑梗死小鼠中的作用机制及对大脑高迁移率族蛋白(HMG) B1水平的影响.方法 (1)细胞分离、鉴定.选择人组C57小鼠5只,获得骨髓单个核细胞,传代后培养、备用;采用流式细胞仪完成骨髓间充质干细胞鉴定;(2)动物实验.选择入组C57小鼠40只,随机取小鼠10只,设为空白对照组;剩余30只小鼠采用线栓法完成脑梗死动物模型建立,建模成功后分为模型对照组、溶剂组与干细胞组各10只.假体手术组与空白对照组进行常规喂养,溶剂组注射5％ 200μl鼠血清的RPMI1640培养基,干细胞组注射骨髓间充质干细胞5×106个,干预后30 d比较各组神经功能缺损、炎症因子及HMGB1水平.结果 (1)倒置显微镜下原代骨髓间充质干细胞形态不一,形状多为梭形;传代培养后第3代细胞增长迅速、排列具备一定的方向性,多呈旋涡状生长,但是细胞界限不清;流式细胞仪测定结果表明:分离获得的骨髓间充质干细胞CD3占1.4％,CD73为98.6％,CD90为99.1％,说明分离获得的细胞为骨髓间充质干细胞;(2)干细胞组干预后1d、10d、20d、30 d神经功能缺损评分均显著低于溶剂组、模型对照组(P＜0.05);溶剂组干预后1d、10 d、20 d、30 d神经功能缺损评分均显著低于模型对照组(P＜0.05);(3)干细胞组干预后30 d白细胞介素(IL)-6水平显著高于溶剂组与模型对照组(P＜0.05);干细胞组干预后30 d IL-10、转化生长因子(TGF)-β水平均显著低于溶剂组与模型对照组(P＜0.05);溶剂组干预后30 d IL-6水平显著高于模型对照组(P＜0.05);溶剂组干预后30 d IL-10、TGF-β水平均显著低于模型对照组(P＜0.05);(4)干细胞组HMGB1水平显著高于溶剂组与模型对照组(P＜0.05);溶剂组HMGB1水平显著高于模型对照组(P＜0.05).结论 将骨髓间充质干细胞移植用于小鼠脑梗死有助于减少神经缺损,降低炎症因子水平,能促进脑组织中HMGB1释放. |
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