| 中文摘要Abstract in Chinese |
目的 探究豚鼠对口蹄疫病毒(FMDV)抗性的遗传学和免疫学机制.阐明FMDV假病毒感染的细胞用于研究FMDV发病机制的可行性.方法 通过含有FMDV-VP1片段的慢病毒载体侵染豚鼠原代肾细胞,构建FMDV假病毒感染的靶细胞.分离FMDV易感性(Zmu-1:DHP品系)和抵抗性(英国种)的两个品系豚鼠外周血淋巴细胞(PBLC,未经抗原处理),与假病毒侵染的靶细胞共培养,用细胞毒性实验测定PBLC的杀伤率,并使用ELISA检测细胞培养上清中细胞因子的含量.通过流式细胞分选测定两个品系豚鼠PBLC中CD3+/CD4+及CD3+/CD8+细胞的比例.结果 对于两个品系豚鼠而言,实验组PBLC的细胞毒性均显著大于各自的对照组(P<0.01);抵抗性品系豚鼠PBLC对靶细胞的细胞毒性显著大于易感性品系豚鼠(P<0.01);抵抗性品系豚鼠PBLC分泌的细胞杀伤因子PF、GRA、GRB及细胞表面Fas表达量显著大于易感性品系豚鼠(P<0.01),但分泌的FasL表达量无显著差异(P>0.05);抵抗性品系豚鼠PBLC分泌的细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2及IL-12含量显著大于易感品系(P<0.05),细胞表面MHC I及MHC II差异不显著(P>0.05);含有FMDV-VP1片段的慢病毒载体侵染豚鼠原代肾细胞,可使细胞表面表达FMDV-VP1蛋白;抵抗性品系豚鼠PBLC中CD4+细胞数量显著少于易感性品系(P<0.05),抵抗性品系豚鼠CD8+细胞数量显著高于易感性品系(P<0.05).结论 FMDV-VP1片段显著激发了效应细胞的免疫反应,增强效应细胞对靶细胞的细胞毒性;抵抗性豚鼠PBLC对FMDV感染细胞具有较强的天然细胞毒性;效应细胞对靶细胞产生细胞毒性的过程中,效应细胞分泌的细胞免疫因子参与了相关过程;通过含有FMDV-VP1片段的慢病毒载体侵染豚鼠原代肾细胞,构建FMDV假病毒感染的靶细胞有效模拟FMDV对靶细胞的感染,可提升后续研究工作的安全性.不同品系豚鼠的遗传特性决定了其对FMDV易感性的差异. |
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