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| 文献名称Document name | 小鼠Klf4基因的克隆及原核表达分析 |
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| 编号Document number | |
| PMIDPMID number | |
| 作者Author | 王春生, 罗芳, 杜文敬, 安铁洙 |
| 中文摘要Abstract in Chinese | 目的 克隆Klf4基因并对其重组蛋白进行原核表达及分析.方法 提取胎鼠皮肤mRNA后反转录为cDNA序列,用一对两端引入特定酶切位点引物,从该cDNA中扩增出Klf4基因编码区序列,将其克隆到pEasy-T3载体上.对质粒双酶切并回收其中Klf4基因片段后,克隆入pET-52b(+)载体后转化Origmai B(DE3)型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,最后采用SDS-PAGE对重组蛋白进行鉴定及分析.结果 对所克隆的Klf4 mRNA蛋白编码区的DNA序列分析表明,klf4 CDS区包括终止密码子在内为1452 bp,与参照序列对比仅有四处存在差异,不仅其同源性达到99.72%,且其氨基酸序列同源性为100%;在IPTG诱导下pET-52b(+)-Klf4重组质粒可表达与预期相符的约为57×103的蛋白质;经IPTG刺激后重组蛋白表达明显上调,其中IPTG为0.4 mol/L时效果最佳.结论 从胎鼠皮肤中克隆的Klf4基因可在原核中表达. |
| 英文摘要Abstract in English | |
| 关键词Key word | Klf4, 克隆, 原核表达 |
| 发表杂志Journal | 中国实验动物学报 |
| 发表年份Year | 2009 |
| 录入/更新时间Date | 2021.7.1 |
