| 中文摘要Abstract in Chinese |
本试验旨在探讨过氧化氢(H2O2)诱导草鱼原代肝细胞体外氧化损伤模型的建立条件,并利用所构建的模型评价8种天然植物的抗氧化能力.采用噻唑蓝(MTT)染色法检测不同浓度[0(对照组)、100、200、400、600 μmol/L]H2O2处理草鱼原代肝细胞0.5、1.0、2.0和4.0 h后的细胞存活率,并采用微板法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.选择不同浓度(100、200、400、600μmol/L)H2O2处理肝细胞1.0 h后,分光光度法检测细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,显微镜观察细胞形态学,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞中活性氧(ROS)水平.通过测定清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基能力和H2O2损伤细胞存活率,评价诃子、虎杖、荷叶、车前草、侧柏叶、甘草、大黄、肉桂这8种天然植物的抗氧化能力.结果显示:与对照组相比,200 μmol/L H2O2处理肝细胞1.0 h后,细胞存活率降低到(64.85±0.38)％;LDH和MDA含量显著或极显著升高(P＜0.05或P＜0.01),SOD活性显著降低(P＜0.01);ROS水平和细胞凋亡率极显著升高(P＜0.01).诃子组的细胞存活率最高,比模型组高出80.17％～150.68％.清除DPPH自由基能力大小排序为诃子≥虎杖≥荷叶≥大黄≥肉桂＞侧柏叶＞车前草＞甘草,且氧化损伤修复能力强弱与清除DPPH自由基能力的高低排序基本一致.综上可知,200 μmol/L H2O2处理1.0 h是建立草鱼原代肝细胞氧化损伤模型的最佳试验条件.8种天然植物中诃子的抗氧化能力最佳且氧化损伤修复能力最强. |
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