单域抗体T7噬菌体展示文库构建与鉴定

文献名称Document name	单域抗体T7噬菌体展示文库构建与鉴定
编号Document number
PMIDPMID number
作者Author	徐海,王健,郭长明,等.
中文摘要Abstract in Chinese	优化噬菌体展示文库构建策略,获得高品质羊驼源天然纳米抗体T7噬菌体展示文库,并对文库质量进行鉴定.分离羊驼外周血淋巴细胞,提取总RNA,RT-PCR扩增羊驼重链抗体可变区(VHH)基因,插入T7 select 415-1b噬菌体载体构建文库,计算文库的库容量,测定文库传代稳定性.测序分析VHH基因的多样性和纳米抗体氨基酸序列特征.Western-blot检测纳米抗体在噬菌体表面的表达情况,电镜观察文库中重组噬菌体颗粒形态.结果表明,构建羊驼源纳米抗体T7噬菌体展示文库,有效库容达到2.73×109 PFU;纳米抗体与羊驼源抗体同源性高,氨基酸序列显示纳米抗体特征区域,并其在噬菌体表面高拷贝表达;重组噬菌体颗粒结构完整,但随着传代出现插入基因的丢失.
英文摘要Abstract in English
关键词Key word	羊驼, 纳米抗体, T7噬菌体, 表面展示
发表杂志Journal	浙江农业学报,Acta Agriculturae Zhejiangensis,2021,33(1)
发表年份Year	2021
录入/更新时间Date	2021/07/20