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建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法.采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴(rhesus macaque)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用含5％猴自体血清、1 000U·mL-1白介素-2(IL-2)和不同浓度唑来膦酸(1,5,10 μmol·L-1)的OpTmizer细胞培养基进行培养,并使用流式细胞仪进行纯度及表型分析.结果 显示:使用含不同浓度唑来膦酸培养基诱导第8d时,1μmol·L-1和5μ上mol· L-1处理组的猴γδT细胞分别扩增至总细胞的91.4％和93.1％;5μmol·L-1处理组表达CD56、CD69及HLA-DR蛋白的猴γδT细胞占总细胞的比例分别为75.6％、75.5％以及78.0％;5μmol·L-1处理组表达干扰素IFN-γ的猴γδT细胞比例为84.8％.本研究通过优化培养基的组成成分,仅添加猴自体血清和IL-2即能有效诱导猴γδT细胞在体外的大量扩增,且培养得到的猴γδT细胞能够显著表达CD56、CD69、HLA-DR及IFN-γ,并具有较强的免疫激活和细胞杀伤作用. |
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