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背景:去垢剂作为目前较成熟的脱细胞方法,具有操作简便、破坏小、实验条件容易控制等优点,有研究将不同的去垢剂联合应用于脱细胞中取得了不错的效果.目的:对比两种去垢剂联合方案脱细胞的效果,以及两种脱细胞血管材料植入动物皮下后的免疫反应.方法:采用两种方案对猪颈动脉进行脱细胞处理,一组置于1％十二烷基硫酸钠与1％脱氧胆酸钠混合溶液内处理72 h(SDS+SDC组),另一组置于1％十二烷基硫酸钠与1％Triton Ⅹ-100混合溶液内处理72 h(SDS+Triton Ⅹ-100组),脱细胞后分别进行组织学分析、扫描电镜分析、力学分析与DNA含量检测.将两组脱细胞血管材料分别植入SD大鼠背部皮下,术后1,2,4,8周取出移植血管材料,进行苏木精-伊红染色与免疫荧光染色.实验己通过江南大学实验动物伦理委员会批准.结果 与结论:①组织学分析显示,SDS+SDC组方案有效去除了细胞成分,较完整的保留了细胞外基质结构,脱细胞效果优于SDS+Triton Ⅹ-100组;②SDS+SDC组DNA含量明显低于SDS+Triton Ⅹ-100组(P＜0.05),两组爆裂强度与缝合耐受强度比较差异无显著性意义(P＞0.05);③扫描电镜显示,SDS+Triton Ⅹ-100组细胞外基质破坏程度大于较SDS+SDC组:④皮下植入实验中,术后1周时两组颈动脉材料周围均可见大量炎性细胞浸润,术后8周时SDS+SDC组脱细胞材料周围已无炎性细胞浸润,SDS+Triton Ⅹ-100组脱细胞材料周围仍可见明显的淋巴细胞浸润;SDS+Triton Ⅹ-100组脱细胞材料主要诱导巨噬细胞向M1型分化,SDS+SDC组脱细胞材料主要诱导巨噬细胞向M2型分化;⑤结果表明相对比1％十二烷基硫酸钠联合1％Triton Ⅹ-100脱细胞处理方案,1％十二烷基硫酸钠联合1％脱氧胆酸钠脱是较有前景的脱细胞细胞处理方案. |
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