| 中文摘要Abstract in Chinese |
目的：探讨Rab13-PKA通路对大鼠血睾屏障功能的调节。方法首先构建靶向大鼠Rab13的shRNA载体，通过大鼠睾丸内注射转染Rab13 shRNA，Western印迹检测Rab13体内沉默效果及沉默后BTB相关连接蛋白表达改变，放射自显影检测睾丸组织内PKA活性变化，睾丸组织冰冻切片免疫荧光染色及鬼笔环肽染色分别观察occludin及肌动蛋白丝在生精上皮的分布。结果 Rab13 shRNA睾丸内转染后Rab13表达量与对照shRNA转染相比下降约70％（ P＜0.01），而BTB相关连接蛋白表达无变化；Rab13沉默后PKA活性与对照组相比有明显升高（P＜0.01）；免疫荧光结果表明，Rab13沉默后occludin在VIII期生精上皮的分布显著高于对照组，而在其他期别生精上皮中则无显著变化；鬼笔环肽染色显示Rab13沉默后F-actin在BTB处的分布明显增强；此外，occludin及F-actin的分布变化可被PKA抑制剂H89所拮抗。结论 Rab13可通过影响PKA活性调节大鼠BTB紧密连接蛋白occludin及F-actin的分布，从而参与调节BTB功能。 |
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