| 文献名称Document name |
大鼠CB1基因真核表达载体的构建及其对CaSki细胞凋亡的影响 |
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| PMIDPMID number
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| 作者Author |
严磊, 李晶, 赵婷婷, 王会娟, 王蕾, 赖国旗 |
| 中文摘要Abstract in Chinese |
目的：构建大鼠CB1（ rCB1）基因真核表达载体，检测rCB1基因在细胞中的表达，研究rCB1对人宫颈癌CaSki细胞凋亡的影响。方法从大鼠脑组织中提取总RNA，RT-PCR扩增rCB1基因，通过酶切、纯化、连接PCR纯化产物与pCDNA 3.1（＋）质粒，构建pcDNA3.1（＋）-rCB1。脂质体法将其转染到HEK293和CaSki细胞， Western blot及细胞免疫荧光联合激光扫描共聚焦方法检测rCB1的表达及定位，流式细胞仪检测细胞凋亡率， Western blot与实时荧光定量PCR检测rCB1、Bcl-2、Bax、Bad表达。结果酶切重组质粒获得5300 bp的载体片段和1500 bp的目的片段，测序结果和rCB1基因序列（ NM＿012784.4）一致。转染HEK293细胞后， rCB1在HEK293细胞细胞膜和细胞质表达。转染CaSki细胞后， rCB1使细胞凋亡率增加（ P＜0.05）；rCB1基因上调Bax、Bad的表达，同时抑制Bcl-2的表达，与空白组比较，其差异具有显著性（ P＜0.05）。结论成功构建了pcDNA3.1（＋）-rCB1真核表达载体， rCB1表达于细胞膜和细胞质，rCB1可以明显促进宫颈癌CaSki细胞凋亡，其机制是上调Bax、Bad和抑制Bcl-2表达。 |
| 英文摘要Abstract in English
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| 关键词Key word |
CB1基因, HEK293细胞, CaSki细胞, 细胞凋亡 |
| 发表杂志Journal |
中国实验动物学报 |
| 发表年份Year
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2015 |
| 录入/更新时间Date |
2021.7.1 |
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