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| 文献名称Document name | 大鼠细小病毒 H-1株和 KRV 株双重 PCR检测方法的建立及应用 |
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| 编号Document number | |
| PMIDPMID number | |
| 作者Author | 李晓波, 付瑞, 王吉, 卫礼, 王淑菁, 岳秉飞, 贺争鸣 |
| 中文摘要Abstract in Chinese | 目的：建立大鼠细小病毒H-1和KRV株双重PCR方法并对方法进行初步应用。方法根据NCBI发表的H-1（NC＿001358）和KRV（U790330）基因组序列分别设计特异引物，以H-1和KRV 病毒DNA为模板建立双重PCR方法，对方法进行优化后验证方法的敏感性和特异性；经口感染大鼠，分为H-1和KRV单独感染组和混合感染组，感染后第2，4，6，8，10天采集大鼠粪便，第10天处死所有大鼠，采集心、肝、脾、肺、肾和盲肠内容物等组织，用建立的方法对粪便和组织样本进行检测。结果建立的双重PCR方法以H-1和KRV为模板能够分别扩增出183 bp和302 bp 2个条带，敏感性验证显示能够检测到的最低H-1量为3.8 pg／mL，最低KRV量为0.73 pg／mL；在以小鼠微小病毒、犬细小病毒和猫细小病毒为模板时无任何条带扩增出，特异性良好。感染第2天在所有大鼠粪便中均检测到病毒核酸，感染大鼠均无明显临床症状，感染第10天采集组织，H-1在各组织的检出率分别是心50％（4／8），肝50％（4／8），脾62.5％（5／8），肺50％（4／8），肾37.5％（3／8），盲肠内容物62.5％（5／8），且单独感染组检出率高于混合感染组；KRV在各组织的检出率分别是心0（0／8），肝25％（2／8），脾87.5％（7／8），肺12.5％（1／8），肾25％（2／8），盲肠内容物62.5％（5／8），混合感染组检出率高于单独感染组。结论建立的H-1和KRV双重PCR方法能够高效的检测大鼠粪便及组织中的病毒感染，可作为实验动物国家标准的有力补充。 |
| 英文摘要Abstract in English | |
| 关键词Key word | 大鼠细小病毒, H-1, KRV, 双重PCR |
| 发表杂志Journal | 中国比较医学杂志 |
| 发表年份Year | 2015 |
| 录入/更新时间Date | 2021.7.1 |
